分泌型卷曲相關蛋白5（secreted frizzled-related protein 5,SFRP5）是分泌卷曲相關蛋白家族的一員,在調(diào)節(jié)組織器官分化和發(fā)育中起著重要作用。但是SFRP5對黑色素細胞生物學功能的影響尚不清楚。該研究利用過表達SFRP5腺病毒（Ad-SFRP5）感染PIG1黑色素細胞,利用多巴氧化法、NaOH裂解法、qRT-PCR以及蛋白質(zhì)免疫印跡等分析其對黑素合成相關指標的影響;并利用熒光素酶報告基因系統(tǒng)分析Ad-SFRP5對PIG1細胞中各信號通路活性的影響。研究結(jié)果表明,SFRP5在不影響PIG1細胞的增殖、凋亡以及細胞周期的情況下抑制PIG1細胞的酪氨酸酶活性和黑色素含量,并通過抑制Wnt/β-catenin信號通路下調(diào)小眼畸形相關轉(zhuǎn)錄因子（microphthalmia-associated transcription factor,MITF）及其靶蛋白的表達。該研究初步探討了SFRP5通過調(diào)控Wnt信號通路對黑色素細胞黑素合成的抑制作用,為色素性皮膚病的治療提供了新的治療靶點。 

【文章來源】：中國細胞生物學學報. 2020,42(05)CSCD

【文章頁數(shù)】：10 頁

【部分圖文】：

SFRP5在三種皮膚細胞中的相對表達量

利用熒光素酶報告基因系統(tǒng)檢測T細胞因子(T cell factor,TCF)/淋巴增強因子(lymphoid enhancer factor,LEF)、STAT、NF-κB、EST樣轉(zhuǎn)錄因子(ETS-like transcription factor,Elk1)/血清反應因子(serum response factor,SRF)的轉(zhuǎn)錄活性,以此來反映Wnt/β-catenin、JAK/STAT、NF-κB以及Erk/MAPK信號通路的活性。結(jié)果顯示,SFRP5對PIG1細胞中Wnt/β-catenin信號通路的活性抑制明顯,而對JAK/STAT、NF-κB以及Erk/MAPK信號通路的活性無明顯影響(圖6A)。為了進一步驗證SFRP5是通過Wnt信號通路影響黑色素細胞的黑素合成的,我們進一步檢測了Ad-SFRP5感染PIG1細胞之后,細胞中β-catenin、GSK-3β及p-GSK-3β的表達水平。結(jié)果顯示,Ad-SFRP5處理之后,β-catenin的表達量明顯下調(diào)(P<0.01);p-GSK-3β的表達量也顯著下降(P<0.01);而GSK-3β的表達差異不大,差異不具統(tǒng)計學意義(P>0.05)(圖6C);但是p-GSK-3β/GSK-3β的比值顯著下降(P<0.001)(圖6B)。圖3 過表達SFRP5對黑色素細胞增殖、細胞周期和凋亡的影響

過表達SFRP5對黑色素細胞增殖、細胞周期和凋亡的影響

【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3604561