目的研究小分子化合物I942對(duì)黑素細(xì)胞黑素合成的作用及相關(guān)機(jī)制。方法采用多巴染色法對(duì)正常人永生化黑素細(xì)胞系PIG1進(jìn)行鑒定,用不同濃度的小分子化合物I942處理黑素細(xì)胞PIG1。用CCK-8法檢測(cè)小分子化合物I942對(duì)細(xì)胞活力的影響,用氫氧化鈉裂解法檢測(cè)細(xì)胞中黑素含量,用多巴氧化反應(yīng)法檢測(cè)細(xì)胞中酪氨酸酶活性,用qRT-PCR檢測(cè)細(xì)胞中黑素合成相關(guān)蛋白小眼畸形相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子（MITF）、酪氨酸酶（TYR）、酪氨酸酶相關(guān)蛋白1（TRP1）、酪氨酸酶相關(guān)蛋白2（TRP2）mRNA的表達(dá)量,用蛋白質(zhì)印跡法檢測(cè)TYR、TRP2的蛋白表達(dá)情況。結(jié)果在0～50μmol/L的濃度范圍內(nèi),小分子化合物I942對(duì)黑素細(xì)胞PIG1細(xì)胞活力的影響差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。小分子化合物I942可增加黑素細(xì)胞PIG1中黑素含量（P<0.01）,升高細(xì)胞內(nèi)酪氨酸酶活性（P<0.01）。使用小分子化合物I942處理后,黑素細(xì)胞PIG1中MITF、TYR、TRP1、TRP2 mRNA表達(dá)均上升（P<0.01,P<0.05）,TYR、TRP2蛋白表達(dá)無明顯變化。結(jié)論小分子化合物I942... 

【文章來源】：第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào). 2020,41(02)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：6 頁

【部分圖文】：

小分子化合物I942化學(xué)結(jié)構(gòu)式及化學(xué)性質(zhì)

正常培養(yǎng)條件下,細(xì)胞呈梭形或多角形貼壁生長,細(xì)胞內(nèi)可見少量淺色顆粒(圖2A)。在培養(yǎng)液中加入0.1% 多巴溶液后,細(xì)胞逐漸呈現(xiàn)棕色至黑色,并且隨著時(shí)間的延長細(xì)胞色素逐漸加深(圖2B),證實(shí)培養(yǎng)出的細(xì)胞為黑素細(xì)胞。2.2 不同濃度小分子化合物I942對(duì)黑素細(xì)胞PIG1活力的影響

CCK-8細(xì)胞凋亡實(shí)驗(yàn)結(jié)果(圖3)顯示,加入不同濃度(0、3.125、6.25、12.5、25、50 μmol/L)小分子化合物I942后黑素細(xì)胞PIG1的細(xì)胞活力隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長而上升,但不同濃度小分子化合物I942對(duì)細(xì)胞活力的影響差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,說明在0～50 μmol/L范圍內(nèi),小分子化合物I942作用于黑素細(xì)胞 PIG1進(jìn)行后續(xù)研究是安全的。2.3 不同濃度小分子化合物I942對(duì)黑素細(xì)胞PIG1中黑素含量的影響


本文編號(hào)：3564222