目的研究KPNA2基因在皮膚黑素瘤中的生物學(xué)功能。方法基因芯片分析KPNA2在皮膚黑素瘤中的表達(dá),Real time PCR檢測(cè)KPNA2基因在皮膚黑素瘤組織及細(xì)胞中的表達(dá)水平。小干擾RNA轉(zhuǎn)染A375細(xì)胞株,平板克隆、MTT法檢測(cè)KPNA2基因敲低組、對(duì)照組皮膚黑素瘤細(xì)胞的增殖活性。Transwell實(shí)驗(yàn)計(jì)算皮膚黑素瘤細(xì)胞過(guò)膜數(shù)量,研究KPNA2與皮膚黑素瘤細(xì)胞遷移作用的關(guān)系。結(jié)果 KPNA2在皮膚黑素瘤組織中的表達(dá)顯著高于癌旁皮膚組織,表達(dá)隨著病理分級(jí)的惡性程度的升級(jí)而增高。高表達(dá)KPNA2組患者預(yù)后明顯比KPNA2組患者差。平板克隆及MTT實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示si-KPNA2組的細(xì)胞活性及增殖明顯受抑制（P均<0.01）,Transwell實(shí)驗(yàn)顯示si-KPNA2組的細(xì)胞過(guò)膜數(shù)量（87.33±6.20）/視野,明顯低于對(duì)照組（271.70±8.70）/視野,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。結(jié)論 KPNA2在皮膚黑素瘤組織表達(dá)升高,促進(jìn)黑素瘤細(xì)胞的增殖和遷移,其可作為黑素瘤的潛在臨床診治靶點(diǎn)及預(yù)后標(biāo)志物。 

【文章來(lái)源】：中國(guó)皮膚性病學(xué)雜志. 2020,34(01)北大核心CSCD

【文章頁(yè)數(shù)】：6 頁(yè)

【部分圖文】：

KPNA2小干擾RNA轉(zhuǎn)染A375細(xì)胞后敲減效果

MTT結(jié)果顯示si-KPNA2轉(zhuǎn)染顯著抑制A375黑素瘤細(xì)胞的增殖,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均<0.01),見圖4。此外,克隆形成實(shí)驗(yàn)同樣表明,與NC組相比,si-KPNA2轉(zhuǎn)染組中的A375黑素瘤細(xì)胞的集落形成效率顯著降低(t=12.77,P<0.01),見圖5。2.5 轉(zhuǎn)染后皮膚黑素瘤細(xì)胞的體外遷移能力transwell實(shí)驗(yàn)

結(jié)果顯示si-KPNA2組的細(xì)胞過(guò)膜數(shù)量(87.33±6.20)/視野,明顯低于NC組(271.70±8.70)/視野,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=10.92,P<0.01)。進(jìn)一步Western blot 結(jié)果顯示促進(jìn)腫瘤細(xì)胞遷移相關(guān)的蛋白N-cadherin明顯下降,抑制腫瘤細(xì)胞遷移相關(guān)的蛋白E-cadherin明顯增加,見圖6。圖6 KPNA2敲減后抑制A375黑素瘤細(xì)胞遷移能力

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子及其受體在人皮膚黑素瘤的組學(xué)數(shù)據(jù)分析[J]. 姚戰(zhàn)非,張雪梅,馬樅.  中國(guó)皮膚性病學(xué)雜志. 2019(06)
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本文編號(hào)：3561929