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JAK2信號通路介導(dǎo)人惡性黑素瘤A375細(xì)胞的自噬和凋亡機制研究

發(fā)布時間:2021-12-22 06:09
  目的:探討JAK2/STAT3信號通路介導(dǎo)人惡性黑素瘤A375細(xì)胞的自噬和凋亡活性,為黑素瘤的發(fā)生機制和潛在干預(yù)靶點提供理論依據(jù)。方法:人惡性黑素瘤A375細(xì)胞經(jīng)復(fù)蘇和傳代后隨機分為對照組和JAK2抑制劑干預(yù)組,比較兩組細(xì)胞培養(yǎng)12h、24h、48h和72h的增殖率(采用MTT定量法)及凋亡率(采用流式細(xì)胞術(shù)),培養(yǎng)72h的細(xì)胞JAK2、p-JAK2、STAT3、LC3B和p-STAT3蛋白相對表達(dá)量(采用Western blot法),檢測IL-6和TNF-α水平(采用ELISA法),檢測Caspase-3和Bax/Bcl-2 mRNA相對表達(dá)量[采用反轉(zhuǎn)錄PCR(RT-PCR)法]。結(jié)果:兩組培養(yǎng)12h、24h、48h和72h的細(xì)胞增殖率比較,干預(yù)組各時間點均明顯小于對照組,而凋亡率明顯大于對照組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。干預(yù)組培養(yǎng)72h的細(xì)胞p-JAK2和p-STAT3蛋白相對表達(dá)量、IL-6和TNF-α水平明顯低于對照組,但LC3B蛋白、Caspase-3和Bax/Bcl-2 mRNA相對表達(dá)量均明顯高于對照組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論:JAK...

【文章來源】: 中國美容醫(yī)學(xué). 2020,29(04)

【文章頁數(shù)】:4 頁

【文章目錄】:
1 資料和方法
    1.1 細(xì)胞培養(yǎng):
    1.2 研究方法:
    1.3 檢測方法
        1.3.1 MTT法檢測細(xì)胞增殖率:
        1.3.2 流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞凋亡率:
        1.3.3 Western blot法檢測JAK2/STAT3、LC3B蛋白:
        1.3.4 ELISA法檢測IL-6和TNF-α:
        1.3.5 RT-PCR法檢測Caspase-3和Bax/Bcl-2 mRNAs:
    1.4 統(tǒng)計學(xué)分析:
2 結(jié)果
    2.1 兩組細(xì)胞增殖率比較:
    2.2 兩組細(xì)胞凋亡率比較:
    2.3 兩組JAK2/STAT3蛋白相對表達(dá)量比較:
    2.4 兩組細(xì)胞IL-6和TNF-α表達(dá)水平比較:
    2.5 兩組細(xì)胞LC3B蛋白表達(dá)情況:
    2.6 兩組細(xì)胞Caspase-3和Bax/Bcl-2 mRNAs相對表達(dá)量比較:
3 討論


【參考文獻】:
期刊論文
[1]毛蘭素通過MAPK途徑抑制葡萄膜黑色素瘤增殖并誘導(dǎo)凋亡 [J]. 查桂平,汪卓瓊.  中國現(xiàn)代醫(yī)生. 2019(22)
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[4]IRE1α-XBP1通過上調(diào)IL-6表達(dá)促進黑色素瘤細(xì)胞增殖的分子機制 [J]. 陳誠,張學(xué)軍.  復(fù)旦學(xué)報(醫(yī)學(xué)版). 2018(05)
[5]miR-let-7b通過調(diào)控相關(guān)細(xì)胞周期蛋白影響皮膚黑色素瘤的增殖和凋亡 [J]. 秦琴,寧花蘭,陳小燕,陳少英,張艷珍,陳大江.  中國美容醫(yī)學(xué). 2018(07)
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[8]重組慢病毒LV-hTERT-tumstatin-dNK對黑色素瘤細(xì)胞A-375增殖和凋亡的影響研究 [J]. 董曉申,鄭新宇.  中國美容整形外科雜志. 2018(05)
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本文編號:3545898

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