背景 皮膚滲透性屏障位于表皮角質(zhì)層,主要作用是防止水份和電解質(zhì)丟失。板層小體（LB）存在于表皮棘層上部及顆粒層的角質(zhì)形成細(xì)胞（KC）內(nèi),在維持皮膚滲透屏障穩(wěn)定性中具有重要作用,其缺失或功能紊亂將導(dǎo)致一系列皮膚屏障損傷性皮膚病,如銀屑病、魚鱗病等。但LB的具體來源尚不明確。近年來研究顯示自噬可能參與LB的形成。窄譜中波紫外線（NB-UVB）照射是治療銀屑病的有效方法,且紫外線照射可誘導(dǎo)自噬。因此,我們推測(cè)自噬可能在LB形成中具有重要作用。目的 研究自噬在LB形成中的作用,從而為皮膚屏障損傷相關(guān)皮膚病提供新的治療方向。方法 首先使用自噬誘導(dǎo)劑雷帕霉素50nmol/L分別處理人永生化角質(zhì)形成細(xì)胞株HaCaT 0h、12h、24h和48h,用Western blot檢測(cè)哺乳動(dòng)物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）、微管相關(guān)蛋白1輕鏈3（LC3）、支架蛋白P62（P62）、Rab11a四種自噬相關(guān)蛋白表達(dá)變化情況,用透射電鏡（TEM）觀察LB數(shù)量及直徑大小變化情況。接著使用自噬抑制劑巴弗洛霉素A1 100nmol/L分別處理HaCaT細(xì)胞0h、12h、24h和48h后,用Western blot檢測(cè)自噬相... 

【文章來源】：安徽醫(yī)科大學(xué)安徽省

【文章頁數(shù)】：62 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

雷帕霉素處理后自噬及LB形成流程圖

安徽醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文29圖3 雷帕霉素處理HaCaT細(xì)胞后細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)變化情況 （a）用雷帕霉素分別處理HaCaT細(xì)胞0h、12h、24h、48h后，TEM觀察LB（黑色箭頭）變化情況，在LB周圍可見均勻密度的脂滴（空心箭頭）。（b）雷帕霉素處理細(xì)胞后，LB數(shù)量變化情況。（c）雷帕霉素處理細(xì)胞后，LB直徑變化情況。*P<0.05。Fig 3 Ultrastructural changes of HaCaT cells treated with rapamycin (a) After treatment withrapamycin for 0 h, 12 h, 24 h and 48 h, TEM observed the changes of LB (black arrow)

30 4 巴弗洛霉素A1處理后自噬及LB形成流程圖。自噬的早期階段與圖1相同，不同之巴弗洛霉素A1處理后溶酶體受到抑制，從而阻斷了自噬溶酶體的形成，同時(shí)LB數(shù)量至消失。 4 Flow chart of autophagy and LB formation after the treatment of Bafilomycin A1.rly stage of autophagy is the same as Figure 1. The difference is that, after exposurfilomycin A1, lysosome synthesis was inhibited and autolysosome formation was hindere same time, the number of LB decreased or even disappeared.


本文編號(hào)：3367373