目的探究lncRNA-EGFR-AS1與表皮生長因子受體（EGFR）的關系及其對黑素瘤細胞WM451增殖、轉移和凋亡的影響。方法敲低lncRNA-EGFR-AS1的表達,采用MTS法、劃痕修復實驗、Transwell法及流式Annexin-FITC/PI雙染方法檢測細胞的增殖、遷移、侵襲和凋亡,利用Western bolt檢測EGFR蛋白及其通路蛋白的表達情況。結果 lncRNA-EGFR-AS1在黑素瘤組織及細胞系中表達上調,并且和EGFR基因的表達具有相關性。敲低lncRNA-EGFR-AS1基因,黑素瘤細胞WM451增殖、轉移、侵襲能力降低,細胞發(fā)生凋亡。lncRNA-EGFR-AS1通過改變EGFR蛋白及其通路相關蛋白的表達發(fā)揮其功能。結論 lncRNA-EGFR-AS1作為一個癌基因,在黑素瘤的發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮著重要的作用。 

【文章來源】：中國皮膚性病學雜志. 2020,34(09)北大核心CSCD

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【部分圖文】：

lncRNA-EGFR-AS1及EGFR在黑素瘤細胞及組織中表達上調

lncRNA是長度大于200 nt且不具有蛋白編碼功能的RNA分子。lncRNA會根據組織類型、細胞類型、發(fā)育階段和疾病種類進行特異性的表達。lncRNA通過多個層面參與基因的表達與調控,在腫瘤的形成中具有潛在的促癌或抑癌作用,且在多種類型的腫瘤中存在異常表達。HOTAIR是首個被發(fā)現可調控腫瘤轉移的lncRNA。目前,有研究發(fā)現在黑素瘤的原發(fā)病灶及轉移病灶中,HOTAIR的表達顯著上調,尤其在轉移播散的淋巴結組織中表達量最高,提示其可能與黑素瘤的發(fā)展及轉移密切相關[14]。SPRY4最初是在脂肪組織測序中被發(fā)現的,日前研究發(fā)現,在黑素瘤中其主要聚集在細胞質中,敲低SPRY4的表達可導致黑素瘤細胞增殖遷移能力降低,凋亡率增加[15]。H19是第一個被發(fā)現的印記基因,雖然目前還沒有研究報道H19與黑素瘤具有相關性,但有研究發(fā)現,H19 的多態(tài)性可能影響黑素瘤的發(fā)生、發(fā)展[16]。lncRNA MALAT1是最早發(fā)現的腫瘤相關lncRNA之一,有關實驗表明,MALAT1的表達改變可能影響黑素瘤的轉移能力[17]。本研究中當敲低lncRNA-EGFR-AS1的表達之后,黑素瘤細胞WM451的增殖轉移侵襲能力顯著下調,細胞發(fā)生顯著的凋亡,可見lncRNA-EGFR-AS1在黑素瘤中發(fā)揮著重要的功能。圖3 敲低lncRNA-EGFR-AS1下調了EGFR及其通路蛋白的表達

圖2 敲低lncRNA-EGFR-AS1細胞WM451增殖轉移和侵襲能力下降并發(fā)生凋亡lncRNA可通過多種方式發(fā)揮其功能,可在多個水平發(fā)揮調控作用。lncRNA-EGFR-AS1是EGFR基因的反義互補RNA,對于很多反義轉錄來說,能夠與互補mRNA特異性相互作用,影響轉錄后過程,如選擇性剪接、RNA編輯、轉運、降解和mico RNA介導的調控[18]。在本研究中,當敲低lncRNA-EGFR-AS1的表達之后,EGFR的表達也顯著下調,這說明lncRNA-EGFR-AS1可通過調控EGFR蛋白的表達發(fā)揮重要的作用。

【參考文獻】：
期刊論文
[1]長鏈非編碼RNA在腫瘤中的研究進展[J]. 張彬彬,殷媛,黃朝暉.  腫瘤防治研究. 2014(06)
[2]lncRNA:腫瘤分子診斷中的一顆新星[J]. 李琪兒,葉國良,郭俊明.  中國生物化學與分子生物學報. 2014(03)



本文編號：3346181