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腸道菌群紊亂模型小鼠皮膚濕疹樣改變的相關(guān)機制研究

發(fā)布時間:2017-04-28 07:01

  本文關(guān)鍵詞:腸道菌群紊亂模型小鼠皮膚濕疹樣改變的相關(guān)機制研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:目的:通過檢測小鼠皮膚屏障功能、血清IFN-γ及IL-4的水平以及血液中CD4、CD8水平,探討腸道菌群紊亂引起小鼠皮膚濕疹的相關(guān)機制及益生菌的作用。 方法:1、分組方法:選擇SPF級昆明小鼠90只,雌雄各半,將小鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)5d后隨機分成3組,即正常對照組(A組)、模型組(B組)、金雙歧治療組(C組),每組30只。2、采用德國Courage Khazaka electronic公司生產(chǎn)的多功能皮膚測試儀MPA9分別檢測小鼠背部皮膚經(jīng)皮水分丟失量(TEWL)、角質(zhì)層含水量;測試環(huán)境溫度為19.8℃~21.4℃,相對濕度為45.8%~49%。;角質(zhì)層含水量及皮脂含量的單位為au(arbitraryunit),經(jīng)皮水分丟失量的單位為g/m2h;3、用糞便標本直接涂片觀察的方法檢測腸道菌群:取新鮮糞便0.1g,加生理鹽水0.9ml用無菌玻珠打碎制成勻漿液,取糞便混懸液制成涂片,用科氏革蘭染色的改良方法進行染色,,染色成功后,使用油鏡直接觀察糞便標本情況;4、采用SemiBio細胞玻片計數(shù)法檢測小鼠血液中CD4、CD8水平;5、采用ELISA法檢測小鼠血清中IFN-γ、IL-4細胞因子水平;6、所得數(shù)據(jù)采用SPSS13.0統(tǒng)計學軟件進行統(tǒng)計學處理,所得計量資料以均數(shù)±標準差(錯誤!未找到引用源!纒)表示,采用t檢驗、方差分析等方法進行統(tǒng)計分析,以P㩳0.05為差異有統(tǒng)計學意義。 結(jié)果:模型組與對照組相比,腸道菌群總數(shù)明顯減少,但3組小鼠腸道中各菌群數(shù)占總菌群數(shù)的比率有所變化,結(jié)果顯示:B組與A、C組相比G+b及G-b占腸道總菌群數(shù)比率明顯下降,G+c及G-c占總菌群數(shù)的比率明顯升高,差異均有顯著統(tǒng)計學意義(P0.01);與A組相比,C組G+b占總菌群數(shù)的比率升高,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05),而其余各菌群數(shù)占總菌群數(shù)比率差異均無統(tǒng)計學意義。 小鼠皮膚TEWL及角質(zhì)層含水量檢測結(jié)果:與A組相比,B、C組小鼠TEWL值低,有統(tǒng)計學意義(P<0.05);與B組TEWL值相比,C組差異無統(tǒng)計學意義(P0.05);B組角質(zhì)層含水量與A、C組相比較高,差異顯著有統(tǒng)計學意義(P<0.01);A組與C組相比,差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)。 小鼠血液中CD4、CD8的表達程度結(jié)果顯示:B組與A、C組相比CD4、CD8表達程度受抑制,均有顯著的統(tǒng)計學差異(P0.01);與A組相比,C組CD4、CD8表達減少,差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05)。 小鼠血清中IFN-γ、IL-4細胞因子水平結(jié)果顯示:與A組相比,B組IL-4水平升高,IFN-γ水平降低,差異均有統(tǒng)計學意義(P0.05);與B組相比,C組IFN-γ水平升高,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05),而IL-4水平差異無統(tǒng)計學意義(P0.05);A組與C組相比,兩者差異均無統(tǒng)計學意義(P0.05)。 HE染色光鏡觀察結(jié)果顯示用抗生素灌胃2周后,B、C組部分小鼠背部、肛周出現(xiàn)濕疹樣改變,光鏡下可見表皮細胞角化不全、表皮局部壞死、滲出并伴有炎癥細胞浸潤,浸潤的細胞主要為淋巴細胞及少量中性粒細胞,符合急性濕疹的病理改變。C組小鼠用金雙歧灌胃10d后,皮疹有所好轉(zhuǎn),光鏡下可見亞急性濕疹及其恢復(fù)期改變,并向慢性濕疹轉(zhuǎn)化,表現(xiàn)為角化過度、角化不全,顆粒層增厚,表皮輕度肥厚,真皮淺層水腫伴成纖維細胞增生,基底細胞液化已不明顯。 結(jié)論: (1)抗生素引起小鼠腸道菌群紊亂可以使小鼠皮膚出現(xiàn)濕疹樣皮疹。 (2)腸道菌群紊亂可以引起小鼠血清中IFN-γ、IL-4細胞因子的失衡及CD4、CD8細胞數(shù)量減少,這可能與小鼠皮膚濕疹有一定的關(guān)系。 (3)腸道菌群紊亂引起皮膚濕疹與經(jīng)皮水分丟失量增加和角質(zhì)層含水量降低也有一定的關(guān)系。 (4)益生菌對抗生素導(dǎo)致的腸道菌群紊亂有明顯的調(diào)節(jié)作用,并且對小鼠皮膚濕疹有一定的治療效果。 本實驗所得的結(jié)論可以為今后臨床治療中使用益生菌制劑防治過敏性皮膚病提供理論依據(jù)。
【關(guān)鍵詞】:腸道菌群 濕疹 免疫 皮膚屏障功能 益生菌
【學位授予單位】:桂林醫(yī)學院
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2014
【分類號】:R758.23
【目錄】:
  • 摘要4-7
  • ABSTRACT7-11
  • 英漢縮略詞對照表11-12
  • 前言12-15
  • 1 材料與方法15-20
  • 2 結(jié)果20-23
  • 3 討論23-34
  • 4 結(jié)論34-35
  • 參考文獻35-40
  • 綜述40-54
  • 參考文獻49-54
  • 攻讀學位期間發(fā)表的學術(shù)論文目錄54-55
  • 致謝55-56

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本文編號:332300

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