發(fā)布時(shí)間：2021-07-25 15:31

　　目的:（1）研究皮膚惡性黑素瘤中尿激酶型纖溶酶原激活劑（uPA）基因及基質(zhì)金屬蛋白酶-9（MMP-9）基因啟動(dòng)子區(qū)甲基化狀態(tài)與其mRNA表達(dá)的關(guān)系。（2）探討uPA、MMP-9基因甲基化在皮膚惡性黑素瘤發(fā)生和發(fā)展中的作用。方法:（1）體外培養(yǎng)人表皮惡性黑素瘤A375細(xì)胞系,采用MTT法觀察S-腺苷甲硫氨酸（SAM）對(duì)A375細(xì)胞增殖的影響。（2）按不接受和接受不同濃度SAM（100,250,400μmol/L）干預(yù)2天,3天,5天,分別將A375細(xì)胞系設(shè)立為對(duì)照組和處理組。采用半定量PCR（RT-PCR）法比較對(duì)照組和處理組A375細(xì)胞系uPA、MMP-9mRNA轉(zhuǎn)錄水平的差異。（3）采用甲基化特異性多聚酶鏈反應(yīng)法（MS-PCR）比較兩組A375細(xì)胞系uPA、MMP-9基因啟動(dòng)子區(qū)甲基化狀態(tài)的變化。結(jié)果:（1）MTT結(jié)果顯示SAM對(duì)A375細(xì)胞增殖有抑制作用。（2）uPA、MMP-9 mRNA在對(duì)照組A375細(xì)胞中均顯著表達(dá),且基因啟動(dòng)子區(qū)分別呈完全去甲基化或部分去甲基化狀態(tài)。（3）經(jīng)SAM干預(yù)后uPA、MMP-9 mRNA表達(dá)不同程度降低,并且SAM對(duì)基因轉(zhuǎn)錄的抑制作用呈劑量和時(shí)間依... 

【文章來源】：中南大學(xué)湖南省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】：50 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

375細(xì)胞用不同濃度SAMSAM對(duì)A375(0，200，4003，4，5d)，檢測(cè)A375細(xì)胞存活率

0.4S一山<2-J>9比VdnE之利一中門�？飯D2一 2SAM對(duì)人皮膚惡性黑色素瘤細(xì)胞株A375中uPAmRNA的表達(dá)水平的影響用不同濃度sAM(0，100，250，400協(xié)mol/L)干預(yù)A375較對(duì)照組和處理組 uPAmRNA的表達(dá)水平的差異。細(xì)胞系2天，3天，5天后，分別比*P<0.05具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異3.SAM干預(yù)前后人皮膚惡性黑素瘤A375細(xì)胞系中MMP一gmRNA表達(dá)的差異實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，MMP一9在A375細(xì)胞系中顯著表達(dá)

碩{學(xué)位論文結(jié)果圖3一 1RT一PCR分析皮膚黑色素瘤細(xì)胞株A375經(jīng)SAM干預(yù)前后MMP一gmRNA的表達(dá)A:sAM干預(yù)5天前后MMP一 9mRNA的表達(dá)B:口一a。 tin內(nèi)參照MMP一9:目的片段(385bp)，口一a。tin內(nèi)參照(550bp)吸翻 0umol/L巨二〕 100umol/L〔二」250。mol/L ..400umol/L P<0.05 **P<0.01S一QJA田 N--JV叱6E·d一乏乏祠山七門Q叱圖3一2用不同濃度5天SAM對(duì)人皮膚惡性黑色素瘤細(xì)胞株 A375MMP一 9mRNA的表達(dá)水平的影響sAM(o， 200，250，礴00科moz/L)干預(yù)A375細(xì)胞5天后，比較對(duì)照組和處理組朋P一 9mRNA的表達(dá)水平的差異。 *P<0.05具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]uPA基因啟動(dòng)子甲基化與喉鱗狀細(xì)胞癌的關(guān)系[J]. 王大力,王鐵,任重.  臨床耳鼻咽喉科雜志. 2006(09)
[2]喉癌中尿激酶型纖溶酶原激活劑的表達(dá)與腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移的關(guān)系[J]. 王大力,任重,張勇,張澍,王鐵.  中華耳鼻咽喉科雜志. 2004(07)



本文編號(hào)：3302294