編碼梅毒螺旋體47-、17-和15kD脂蛋白的基因克
發(fā)布時(shí)間:2021-07-21 18:32
梅毒是由Tp引起的一種慢性系統(tǒng)性臨床表現(xiàn)復(fù)雜多變的全球性性傳播疾病。由于Tp不能長(zhǎng)期在體外培養(yǎng),診斷和試驗(yàn)所用抗原多由Tp有毒株Nichols株(Tp-Nichols株)接種兔睪丸傳代繁殖而得。這種方法不僅費(fèi)用高、周期長(zhǎng)、需要?jiǎng)游镞M(jìn)行實(shí)驗(yàn),而且獲得的Tp量少,還不可避免地混有兔睪丸組織,加之Tp復(fù)雜的抗原結(jié)構(gòu)從而使特異多肽難以純化。另外,因梅毒螺旋體十分脆弱,分離和純化過(guò)程可破壞Tp結(jié)構(gòu)的完整性。以上諸多限制除阻礙對(duì)梅毒螺旋體形態(tài)學(xué)、結(jié)構(gòu)學(xué)、生理學(xué)和遺傳學(xué)的深入研究外,更為重要的是,還影響識(shí)別與發(fā)病機(jī)制和宿主免疫應(yīng)答有關(guān)的分子組成,不利于評(píng)價(jià)單個(gè)抗原的生物學(xué)意義。盡管如此,運(yùn)用含非離子型去垢劑Triton X-114相分配仍分離出一組抗原性強(qiáng)的梅毒螺旋體特異膜蛋白。其中,Tpp47、Tpp17和Tpp15的免疫原性先后得到許多實(shí)驗(yàn)證實(shí)。本研究旨在通過(guò)基因工程技術(shù)制各這3種重組脂蛋白抗原(rTpp47、rTpp17和rTpp15),并初步分析rTpp47和rTpp17,抗原與二期梅毒血清的反應(yīng)原性。 第一章:梅毒螺旋體基因組DNA的制備。將液氮凍存的Tp-Nichols株復(fù)蘇后,用...
【文章來(lái)源】:北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院北京市 211工程院校 985工程院校
【文章頁(yè)數(shù)】:101 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:博士
【部分圖文】:
%Agrose/EB凝膠電泳鑒定你,婆弄DNACPR結(jié)果.1標(biāo)準(zhǔn)DNA~ker.2一7t搏誣擠PRC,..
既人盯
圖10.既人盯。se/EB凝膠電泳鑒定回收純化的紅少荃舟PCR產(chǎn)物.1標(biāo)準(zhǔn)洲Amarker.2回收后你,荃舟PCR產(chǎn)物.圖20.8%A盯ose/EB化的你少荃2CPR產(chǎn)物.1凝膠電泳鑒定回收純標(biāo)準(zhǔn)D撇.目rker.2回收前亡即璧7PRC產(chǎn)物.3回收后燈,寸rCPR產(chǎn)物.23234500b--P500bp一圖31.踢Agrose/EB凝膠電泳鑒定回收純化的忿刀口1獷CPR擴(kuò)增產(chǎn)物.1標(biāo)準(zhǔn)D隊(duì)釁ker.2回收前‘即17PCR,3,17P.圖41.5%AgroseE/B凝膠電泳鑒定回收純化的£即1萬(wàn)CPR產(chǎn)物.l標(biāo)準(zhǔn)DNAnarIker.2回收前切口15PC雙產(chǎn)物.3回收后丈即J斤刃NAI.4回收
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]基因序列分析在麻風(fēng)分支桿菌分型中的應(yīng)用[J]. 尹躍平,吳勤學(xué),張良芬,余艷華. 中華皮膚科雜志. 2000(S1)
[2]重組梅毒螺旋體抗原的研究進(jìn)展[J]. 尹躍平. 國(guó)外醫(yī)學(xué)(皮膚性病學(xué)分冊(cè)). 1999(06)
本文編號(hào):3295555
【文章來(lái)源】:北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院北京市 211工程院校 985工程院校
【文章頁(yè)數(shù)】:101 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:博士
【部分圖文】:
%Agrose/EB凝膠電泳鑒定你,婆弄DNACPR結(jié)果.1標(biāo)準(zhǔn)DNA~ker.2一7t搏誣擠PRC,..
既人盯
圖10.既人盯。se/EB凝膠電泳鑒定回收純化的紅少荃舟PCR產(chǎn)物.1標(biāo)準(zhǔn)洲Amarker.2回收后你,荃舟PCR產(chǎn)物.圖20.8%A盯ose/EB化的你少荃2CPR產(chǎn)物.1凝膠電泳鑒定回收純標(biāo)準(zhǔn)D撇.目rker.2回收前亡即璧7PRC產(chǎn)物.3回收后燈,寸rCPR產(chǎn)物.23234500b--P500bp一圖31.踢Agrose/EB凝膠電泳鑒定回收純化的忿刀口1獷CPR擴(kuò)增產(chǎn)物.1標(biāo)準(zhǔn)D隊(duì)釁ker.2回收前‘即17PCR,3,17P.圖41.5%AgroseE/B凝膠電泳鑒定回收純化的£即1萬(wàn)CPR產(chǎn)物.l標(biāo)準(zhǔn)DNAnarIker.2回收前切口15PC雙產(chǎn)物.3回收后丈即J斤刃NAI.4回收
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]基因序列分析在麻風(fēng)分支桿菌分型中的應(yīng)用[J]. 尹躍平,吳勤學(xué),張良芬,余艷華. 中華皮膚科雜志. 2000(S1)
[2]重組梅毒螺旋體抗原的研究進(jìn)展[J]. 尹躍平. 國(guó)外醫(yī)學(xué)(皮膚性病學(xué)分冊(cè)). 1999(06)
本文編號(hào):3295555
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