[目的]瘢痕疙瘩是繼發(fā)于皮膚創(chuàng)傷、炎癥后的一種病理性愈合,其發(fā)病機(jī)制不明確,前期研究顯示磷酯酸肌醇-3 激酶/蛋白激酶 B（Phosphatidylinositol 3-kinase/Protein Kinase B,PI3K/AKT）信號(hào)通路在增生性瘢痕形成過程中發(fā)揮作用,線粒體應(yīng)激可能導(dǎo)致瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞凋亡異常核心事件之一。由于三七皂苷R1具有抗肝細(xì)胞纖維化的作用[1],三七皂苷R1是否能影響瘢痕疙瘩的增殖?其可能的作用機(jī)制是什么?本文通過三七皂苷R1干預(yù)體外培養(yǎng)的瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞,檢測(cè)PI3K/AKT通路相關(guān)蛋白及mRNA、ROS、AKR1-C3的表達(dá),探討三七皂苷R1抑制體外培養(yǎng)的瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞的可能機(jī)制,為進(jìn)一步了解瘢痕疙瘩發(fā)病機(jī)制和臨床藥物作用研究提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。[方法]1、原代培養(yǎng)成纖維細(xì)胞（Fibroblast,FB）;實(shí)驗(yàn)分組為:瘢痕疙瘩組:對(duì)照組,實(shí)驗(yàn)組:三七皂苷R1組、LY294002組、NAC組;正常皮膚組:對(duì)照組,實(shí)驗(yàn)組:三七皂苷R1組、LY294002組、NAC組。用不同濃度LY294002干預(yù)瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞24小時(shí)后,通過CCK-8（Cell ... 

【文章來源】：昆明醫(yī)科大學(xué)云南省

【文章頁數(shù)】：68 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖１??，［９］，??

、體外分離培養(yǎng)原代成纖維細(xì)胞。??１０例手術(shù)切取的瘢痕疙瘩和６例正常皮膚標(biāo)本組織，組織塊原代培養(yǎng)成纖維細(xì)胞，??在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)及形態(tài)，５－７天后瘢痕疙瘩可見較多細(xì)胞爬出（見圖１），??而正常皮膚８？１０天后才可見少數(shù)單個(gè)細(xì)胞貼壁（見圖２），細(xì)胞呈梭形、長(zhǎng)條形。瘢痕??疙瘩細(xì)胞約１０天左右鋪滿培養(yǎng)皿的７０－８０％，正常皮膚細(xì)胞約１４天作右鋪滿培養(yǎng)皿的??７０－８０％?（見圖３）。待細(xì)胞鋪滿培養(yǎng)皿約８０％－１００％?（見圖４），用吸管移出組織塊，進(jìn)??行原代細(xì)胞第一次傳代。??ｍ?ｗ??圖１瘢痕疙瘩細(xì)胞原代培養(yǎng)５？７天（１０〇ｘ）?圖２正常皮膚細(xì)胞原代培養(yǎng)８？１０天（１０〇ｘ）??Ｆｉｇ．?１?Ｔｈｅ?ｐｒｉｍａｒｙ?ｃｕｌｔｕｒｅｄ?ｏｆ?ｋｅｌｏｉｄ?ｃｅｌｌ?ａｆｔｅｒ?５?ｔｏ?７?ｄａｙｓ?Ｆｉｇ．?２?Ｔｈｅ?ｐｒｉｍａｒｙ?ｃｕｌｔｕｒｅｄ?ｏｆ?ｋｅｌｏｉｄ?ｃｅｌｌ?ａｆｔｅｒ?８?ｔｏ?１０?ｄａｙｓ??（１００Ｘ）?（１０〇ｘ）??圖３正常皮膚細(xì)胞原代培養(yǎng)１０天（１０

７０－８０％?（見圖３）。待細(xì)胞鋪滿培養(yǎng)皿約８０％－１００％?（見圖４），用吸管移出組織塊，進(jìn)??行原代細(xì)胞第一次傳代。??ｍ?ｗ??圖１瘢痕疙瘩細(xì)胞原代培養(yǎng)５？７天（１０〇ｘ）?圖２正常皮膚細(xì)胞原代培養(yǎng)８？１０天（１０〇ｘ）??Ｆｉｇ．?１?Ｔｈｅ?ｐｒｉｍａｒｙ?ｃｕｌｔｕｒｅｄ?ｏｆ?ｋｅｌｏｉｄ?ｃｅｌｌ?ａｆｔｅｒ?５?ｔｏ?７?ｄａｙｓ?Ｆｉｇ．?２?Ｔｈｅ?ｐｒｉｍａｒｙ?ｃｕｌｔｕｒｅｄ?ｏｆ?ｋｅｌｏｉｄ?ｃｅｌｌ?ａｆｔｅｒ?８?ｔｏ?１０?ｄａｙｓ??（１００Ｘ）?（１０〇ｘ）??

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]三七改善慢性腎臟病大鼠腎臟纖維化的研究[J]. 徐穎,王麗,吉琳梅,沈宏春,程偲婧,樊均明,文丹.  重慶醫(yī)學(xué). 2016(33)
[2]三七中皂苷成分及其藥理作用的研究進(jìn)展[J]. 王瑩,禇揚(yáng),李偉,馬曉慧,魏振平.  中草藥. 2015(09)
[3]三七皂苷R1對(duì)肝纖維化大鼠TGF-β1/Smad3信號(hào)的影響[J]. 普顯宏,何媛,黃微,茹金,楊金偉.  現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展. 2015(04)
[4]線粒體凋亡途徑在瘢痕疙瘩中的作用機(jī)制[J]. 施曉曉,湯諹.  中國(guó)皮膚性病學(xué)雜志. 2014(11)
[5]Smashing Tissue Extraction and HPLC Determination of Active Saponins from Different Parts of Panax notoginseng[J]. SHI Sheng-ming1,2,LIU Yan-ze3,4,TAI Wen2,CHEN Chang-qing2,ZHAO Yu-qing1,5 1.Shenyang Pharmaceutical University,Shenyang 110006,China 2.Tianjin Institute of Pharmaceutical Research,Tianjin 300193,China 3.Bio-Organic and Natural Product Laboratory,MRC 311,McLean Hospital/Harvard Medical School,115 Mill Street,Belmont,MA 02478,USA 4.Institute of Medicinal Plant Development,Chinese Academy of Medical Sciences,Beijing 100193,China 5.Key Laboratory of Structure-Based Drug Design and Discovery,Ministry of Education,Shenyang Pharmaceutical University,Shenyang 110016,China.  Chinese Herbal Medicines. 2012(04)
[6]復(fù)元膠囊及其主要成分淫羊藿苷、三七皂苷R1治療骨關(guān)節(jié)炎的分子機(jī)制研究[J]. 張文亮,李榮亨,王淑美,周小莉,鐘玉.  中國(guó)中藥雜志. 2011(15)
[7]三七總皂苷、三七皂苷R1、人參皂苷Rb1、人參皂苷Rg1對(duì)光化學(xué)反應(yīng)誘導(dǎo)的大鼠腸系膜細(xì)靜脈血栓的抑制作用——三七主要成分抑制細(xì)靜脈血栓[J]. 王芳,劉育英,劉漣祎,曾慶江,樊景禹,王傳社,韓晶巖.  世界科學(xué)技術(shù)-中醫(yī)藥現(xiàn)代化. 2008(03)
[8]410例遼籍漢族瘢痕疙瘩臨床流行病學(xué)分析[J]. 舒春梅,何春滌,劉勇,龐瑩,陳洪鐸.  中國(guó)麻風(fēng)皮膚病雜志. 2007(07)
[9]瘢痕疙瘩發(fā)病機(jī)理的研究進(jìn)展[J]. 陳陽,高建華,宋良萍.  中國(guó)美容整形外科雜志. 2006(05)
[10]瘢痕疙瘩一家系調(diào)查[J]. 柳青,王芝琪,孫淼,張學(xué).  臨床皮膚科雜志. 2004(04)

博士論文
[1]人增生性瘢痕成纖維細(xì)胞PI3K/Akt信號(hào)通路的作用及其與結(jié)締組織生長(zhǎng)因子相關(guān)性研究[D]. 劉劍毅.第三軍醫(yī)大學(xué) 2008
[2]中國(guó)漢族瘢痕疙瘩致病基因初步連鎖分析和相關(guān)基因多態(tài)性的研究[D]. 劉勇.中國(guó)醫(yī)科大學(xué) 2007

碩士論文
[1]三七皂苷R1對(duì)體外培養(yǎng)瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞Wnt/β-catenin信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的作用機(jī)制研究[D]. 費(fèi)猛.昆明醫(yī)科大學(xué) 2017
[2]三七單體成分R1、Rd的活血化瘀功能及機(jī)制研究[D]. 陳重華.四川大學(xué) 2003



本文編號(hào)：3268130