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五味子乙素抑制UVA對組織工程皮膚損傷研究

發(fā)布時(shí)間:2021-05-23 19:43
  目的探討五味子乙素抵御UVA對組織工程皮膚損傷的保護(hù)機(jī)制。方法1體外將人永生化角質(zhì)形成細(xì)胞和成纖維細(xì)胞分別復(fù)合絲素蛋白修飾的聚酯聚酰胺無紡布生物支架,制備出組織工程皮膚模型,模型制備的第1、3、5、7、9天測定細(xì)胞在支架上的生長狀況與空白組進(jìn)行比較。2UVA損傷組織工程皮膚實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)分為5組:對照組、UVA照射不同能量2J、5J、8J、11J組,測定細(xì)胞損傷程度。3五味子乙素藥物保護(hù)作用實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)分為6組:UVA照射組、UVA照射+不同濃度的五味子乙素0.01μmol/L、0.1μmol/L、1μmol/L、10μmol/L、100μmol/L組,測定細(xì)胞生存率。4測定五味子乙素對UVA損傷組織工程皮膚中的SOD(超氧化物歧化酶)、NO(一氧化氮)、GSH(谷胱甘肽過氧化物酶)、LDH(乳酸脫氫酶)的變化,實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)分2組:不加藥對照組和加藥組。結(jié)果1永生化角質(zhì)形成細(xì)胞和成纖維細(xì)胞與絲素蛋白修飾的聚酯聚酰胺無紡布生物支架成功復(fù)合,在氣液面上培養(yǎng)生長良好。2當(dāng)照射達(dá)到一定強(qiáng)度后,細(xì)胞生存率降低,根據(jù)照射強(qiáng)度和細(xì)胞生存率,選定照射強(qiáng)度為30mJ/cm2即5J的能量建立UVA損傷組織工程皮膚模型。... 

【文章來源】:華北理工大學(xué)河北省

【文章頁數(shù)】:51 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
引言
第1章 實(shí)驗(yàn)研究
    1.1 材料與儀器
        1.1.1 主要試劑材料
        1.1.2 溶液配制
        1.1.3 主要儀器
        1.1.4 細(xì)胞株
    1.2 實(shí)驗(yàn)方法
        1.2.1 HaCaT 細(xì)胞和 FB 細(xì)胞的培養(yǎng)
        1.2.2 絲素蛋白溶液的制備
        1.2.3 絲素蛋白溶液的表征
        1.2.4 絲素蛋白修飾聚酯聚酰胺無紡布支架制備
        1.2.5 細(xì)胞與復(fù)合支架的三維培養(yǎng)
        1.2.6 MTT 檢測細(xì)胞增殖
        1.2.7 細(xì)胞復(fù)合支架掃描 SEM 電鏡觀察
        1.2.8 細(xì)胞復(fù)合支架 HE 染色觀察
        1.2.9 UVA 損傷能量測定
        1.2.10 五味子乙素溶液保護(hù)濃度測定
        1.2.11 氧化損傷實(shí)驗(yàn)
    1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
    1.4 結(jié)果
        1.4.1 HaCaT 細(xì)胞和 FB 細(xì)胞的培養(yǎng)
        1.4.2 絲素蛋白的分子量測試
        1.4.3 絲素蛋白修飾的聚酯聚酰胺無紡布支架的制備
        1.4.4 空白復(fù)合無紡布支架 HE 照片
        1.4.5 HaCaT 細(xì)胞與復(fù)合支架的三維培養(yǎng)
        1.4.6 MTT 分析細(xì)胞在復(fù)合支架上的增殖情況
        1.4.7 復(fù)合支架接種細(xì)胞 MTT 圖片
        1.4.8 細(xì)胞與復(fù)合支架三維培養(yǎng)的 SEM 電鏡觀察
        1.4.9 細(xì)胞與復(fù)合支架三維培養(yǎng)的 HE 染色觀察
        1.4.10 UVA 照射能量的確定
        1.4.11 不同濃度 Schb 對 UVA 損傷后模型保護(hù)作用
        1.4.12 不同濃度 Schb 對模型 SOD、GSH、LDH、NO 含量的影響
    1.5 討論
    1.6 結(jié)論
    參考文獻(xiàn)
第2章 綜述
    2.1 絲素蛋白的制備及性能
        2.1.1 生物相容性
        2.1.2 生物降解性
        2.1.3 絲素蛋白作為生物材料的優(yōu)越性
    2.2 絲素作為皮膚組織工程支架的應(yīng)用
        2.2.1 靜電紡絲素支架
        2.2.2 絲素海綿支架
        2.2.3 絲素膜
    2.3 展望
    參考文獻(xiàn)
致謝
導(dǎo)師簡介
作者簡介
學(xué)位論文數(shù)據(jù)集


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
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[7]絲素蛋白在電紡絲法構(gòu)建組織工程支架中的應(yīng)用進(jìn)展[J]. 陳玲,竺亞斌,李媛媛,劉玉新,俞珺瑤.  生物工程學(xué)報(bào). 2011(06)
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本文編號:3202875

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