目的:本實驗通過建立UVA誘導(dǎo)的人成纖維細胞光老化模型,采用原代細胞培養(yǎng)、免疫熒光技術(shù)、流式細胞術(shù)、分子生物學(xué)等技術(shù)及方法,檢測人皮膚成纖維細胞體外増殖活性、細胞內(nèi)活性氧類總量,檢測人皮膚成纖維細胞P38絲裂原活化蛋白激酶、c-jun氨基端激酶、基質(zhì)金屬蛋白酶-1的m RNA及蛋白表達;探討CGF在UVA誘導(dǎo)的HDFs光老化中的作用及機制。方法:1. 人皮膚成纖維細胞原代培養(yǎng)及鑒定收集河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院整形美容科重瞼術(shù)后切除的正常眼瞼組織,采用貼壁法原代細胞培養(yǎng)。培養(yǎng)的成纖維細胞傳至3代后,爬片固定,采用形態(tài)學(xué)觀察及鼠抗人波形蛋白單克隆抗體、鼠抗角蛋白單克隆抗體對培養(yǎng)出的細胞進行鑒定。2. 篩選UVA照射劑量,建立光損傷模型以UVA照射劑量分別為5J/cm²、10J/cm²、20J/cm²、30J/cm²,照射人皮膚成纖維細胞（HDFs）,照射結(jié)束后在培養(yǎng)皿中加入完全培養(yǎng)液（含雙抗的10%胎牛血清的低糖DMEM液）培養(yǎng)培養(yǎng)24h,對照組、UVA組細胞,分別于倒置顯微鏡下觀察照射后即刻及照射后培養(yǎng)2... 

【文章來源】：河北醫(yī)科大學(xué)河北省

【文章頁數(shù)】：58 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
英文摘要
英文縮寫
前言
材料與方法
結(jié)果
討論
結(jié)論
參考文獻
綜述 UVA及UVB致皮膚光老化損傷的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路
    參考文獻
致謝
個人簡歷



本文編號：3200912