目的:本實(shí)驗(yàn)通過(guò)建立UVA誘導(dǎo)的人成纖維細(xì)胞光老化模型,采用原代細(xì)胞培養(yǎng)、免疫熒光技術(shù)、流式細(xì)胞術(shù)、分子生物學(xué)等技術(shù)及方法,檢測(cè)人皮膚成纖維細(xì)胞體外増殖活性、細(xì)胞內(nèi)活性氧類(lèi)總量,檢測(cè)人皮膚成纖維細(xì)胞P38絲裂原活化蛋白激酶、c-jun氨基端激酶、基質(zhì)金屬蛋白酶-1的m RNA及蛋白表達(dá);探討CGF在UVA誘導(dǎo)的HDFs光老化中的作用及機(jī)制。方法:1. 人皮膚成纖維細(xì)胞原代培養(yǎng)及鑒定收集河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院整形美容科重瞼術(shù)后切除的正常眼瞼組織,采用貼壁法原代細(xì)胞培養(yǎng)。培養(yǎng)的成纖維細(xì)胞傳至3代后,爬片固定,采用形態(tài)學(xué)觀察及鼠抗人波形蛋白單克隆抗體、鼠抗角蛋白單克隆抗體對(duì)培養(yǎng)出的細(xì)胞進(jìn)行鑒定。2. 篩選UVA照射劑量,建立光損傷模型以UVA照射劑量分別為5J/cm²、10J/cm²、20J/cm²、30J/cm²,照射人皮膚成纖維細(xì)胞（HDFs）,照射結(jié)束后在培養(yǎng)皿中加入完全培養(yǎng)液（含雙抗的10%胎牛血清的低糖DMEM液）培養(yǎng)培養(yǎng)24h,對(duì)照組、UVA組細(xì)胞,分別于倒置顯微鏡下觀察照射后即刻及照射后培養(yǎng)2... 

【文章來(lái)源】：河北醫(yī)科大學(xué)河北省

【文章頁(yè)數(shù)】：58 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
英文摘要
英文縮寫(xiě)
前言
材料與方法
結(jié)果
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述 UVA及UVB致皮膚光老化損傷的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路
    參考文獻(xiàn)
致謝
個(gè)人簡(jiǎn)歷



本文編號(hào)：3200912