目的探討銀屑病中NLRP3炎癥小體通過調(diào)控Treg/Th17失衡對(duì)角質(zhì)形成細(xì)胞增殖及趨化能力的影響。方法通過qRT-PCR、Western Blot、免疫組織化學(xué)和免疫熒光化學(xué)檢測NLRP3在銀屑病患者受損皮膚中的表達(dá)。體外以10 ng/mL的KGF刺激HaCaT細(xì)胞建立銀屑病的細(xì)胞模型,通過慢病毒介導(dǎo)的sh-NLRP3轉(zhuǎn)染細(xì)胞,qRT-PCR和Western blot分析NLRP3表達(dá),CCK-8和Transwell小室分別檢測細(xì)胞增殖和趨化能力,ELISA檢測炎性因子IL-17A、IL-23、IL-1β和趨化因子CXCL1、CXCL2、CXCL8的分泌水平。體內(nèi)將慢病毒介導(dǎo)的sh-NLRP3注射入小鼠背部局部皮膚,再通過5%咪喹莫特（IMQ）誘導(dǎo)小鼠銀屑病樣皮損模型,qRT-PCR檢測NLRP3和Cytokeratin 14在皮膚組織的表達(dá),PASI評(píng)分評(píng)價(jià)小鼠銀屑病皮損面積和疾病嚴(yán)重程度,HE染色觀察皮膚組織病理改變,測量皮膚厚度,qRT-PCR檢測炎性因子IL-17A、IL-23、IL-1β和趨化因子CXCL1、CXCL2、CXCL8的表達(dá),流式細(xì)胞術(shù)檢測Th17、Treg細(xì)胞... 

【文章來源】：中國皮膚性病學(xué)雜志. 2020,34(11)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：11 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 臨床樣本
    1.2 細(xì)胞
    1.3 動(dòng)物
    1.4 藥品和試劑
    1.5 銀屑病細(xì)胞模型的建立與檢測
        1.5.1 細(xì)胞的培養(yǎng)
        1.5.2 細(xì)胞轉(zhuǎn)染
        1.5.3 實(shí)時(shí)熒光定量PCR(qRT-PCR)
        1.5.4 Western blot
        1.5.5 免疫組織化學(xué)染色和免疫熒光化學(xué)染色
        1.5.6 構(gòu)建銀屑病細(xì)胞模型
        1.5.7 Transwell小室實(shí)驗(yàn)
        1.5.8 CCK-8
        1.5.9 ELISA
    1.6 銀屑病小鼠模型的構(gòu)建與相關(guān)檢測
        1.6.1 構(gòu)建銀屑病小鼠模型
        1.6.2 小鼠PASI評(píng)分
        1.6.3 組織病理學(xué)分析
        1.6.4 流式細(xì)胞術(shù)
    1.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
2 結(jié)果
    2.1 NLRP3在銀屑病患者受損皮膚中的表達(dá)
    2.2 NLRP3在銀屑病細(xì)胞模型中的表達(dá)及對(duì)HaCaT細(xì)胞增殖的調(diào)控情況
    2.3 體外敲除NLRP3對(duì)炎性因子和趨化因子表達(dá)的影響
    2.4 NLRP3在銀屑病小鼠模型中的表達(dá)及敲除NLRP3銀屑病小鼠皮膚的影響
    2.5 體內(nèi)敲除NLRP3對(duì)Treg/Th17細(xì)胞平衡的影響
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]miR-20a靶向STAT3抑制角質(zhì)形成細(xì)胞增殖參與銀屑病的機(jī)制[J]. 周蓉,陳振平,黃盼,羅美俊子,潘意,楊志波,王暢.  中國皮膚性病學(xué)雜志. 2020(04)
[2]蜈蚣敗毒飲對(duì)轉(zhuǎn)基因銀屑病模型皮損IL-17和IL-23蛋白表達(dá)的影響及與皮損指數(shù)的相關(guān)性[J]. 安月鵬,柏青松,袁銳,楊素清.  中國皮膚性病學(xué)雜志. 2019(05)
[3]表皮細(xì)胞緊密連接在銀屑病發(fā)病機(jī)制中的作用[J]. 趙京霞,王燕,底婷婷,蒙玉嬌,劉宇,翟春燕,李萍.  中國皮膚性病學(xué)雜志. 2019(04)



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