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過(guò)表達(dá)miR-330-3p通過(guò)BMI1對(duì)黑色素瘤A375細(xì)胞增殖、侵襲及凋亡的影響

發(fā)布時(shí)間:2021-03-27 23:58
  目的探討過(guò)表達(dá)miR-330-3p對(duì)黑色素瘤A375細(xì)胞增殖、侵襲及凋亡的影響。方法采用miR-330-3p模擬物轉(zhuǎn)染黑色素瘤A375細(xì)胞,設(shè)置空白組(未進(jìn)行轉(zhuǎn)染)、miR-330-3p正常對(duì)照組(轉(zhuǎn)染無(wú)義序列)、miR-330-3p模擬物轉(zhuǎn)染組(轉(zhuǎn)染miR-330-3p模擬物),采用CCK-8法檢測(cè)各組A375細(xì)胞的增殖,Transwell檢測(cè)各組細(xì)胞侵襲能力,流式細(xì)胞儀檢測(cè)各組細(xì)胞凋亡,Western blot檢測(cè)各組細(xì)胞BMI1蛋白表達(dá),應(yīng)用Targetscan和雙熒光素酶報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)檢測(cè)BMI1是否為miR-330-3p的靶基因。結(jié)果 miR-330-3p過(guò)表達(dá)后,A375細(xì)胞的增殖和侵襲能力下降,細(xì)胞凋亡率上升,BMI1蛋白表達(dá)水平下降,生物信息學(xué)分析及雙熒光素酶實(shí)驗(yàn)證實(shí)BMI1為miR-330-3p的靶基因。結(jié)論過(guò)表達(dá)miR-330-3p抑制A375細(xì)胞增殖和侵襲,促進(jìn)其凋亡,與下調(diào)BMI1的表達(dá)相關(guān)。 

【文章來(lái)源】:解剖科學(xué)進(jìn)展. 2020,26(06)

【文章頁(yè)數(shù)】:4 頁(yè)

【文章目錄】:
1 材料和方法
    1.1 材料
    1.2 細(xì)胞培養(yǎng),轉(zhuǎn)染和分組
    1.3 q RT-PCR檢測(cè)mi R-330-3p的表達(dá)水平
    1.4 Western blot檢測(cè)BMI1蛋白表達(dá)
    1.5 CCK-8檢測(cè)細(xì)胞增殖
    1.6 Transwell檢測(cè)細(xì)胞侵襲能力
    1.7 流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡
    1.8 mi R-330-3p的靶基因預(yù)測(cè)及雙熒光素酶報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)
    1.9 統(tǒng)計(jì)分析
2 結(jié)果
    2.1 q RT-PCR檢測(cè)mi R-330-3p轉(zhuǎn)染效率
    2.2 Western blot檢測(cè)各組細(xì)胞BMI1蛋白表達(dá)
    2.3 CCK-8檢測(cè)細(xì)胞增殖活性
    2.4 Transwell檢測(cè)細(xì)胞侵襲能力
    2.5 流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡
    2.6 mi R-330-3p靶基因預(yù)測(cè)及雙熒光素酶實(shí)驗(yàn)
3 討論


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]Bmi-1、Ki-67在黑色素瘤中的表達(dá)及其意義[J]. 尹利華,劉純青,曾亮,孟秀香.  現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué). 2010(10)



本文編號(hào):3104478

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