目的探討5-氨基酮戊酸光動(dòng)力療法（ALA-PDT）聯(lián)合3-甲基腺嘌呤（3-MA）對(duì)皮膚鱗狀細(xì)胞癌A431細(xì)胞的殺傷作用及其機(jī)制研究。方法體外培養(yǎng)人皮膚鱗狀細(xì)胞癌A431細(xì)胞,設(shè)置不同的ALA濃度（0、0.20、0.40、0.80、1.60 mmol/L）及不同的培養(yǎng)時(shí)間（12、24、48 h）,對(duì)A431細(xì)胞進(jìn)行ALA-PDT處理,采用MTT法檢測(cè)細(xì)胞增殖活性并計(jì)算半抑制濃度(IC₅₀)值。根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要將A431細(xì)胞分為空白對(duì)照組、ALA-PDT組、3-MA組和ALA-PDT+3-MA組。分組處理后,MTT法檢測(cè)細(xì)胞增殖;流式細(xì)胞術(shù)分別檢測(cè)細(xì)胞凋亡（Annexin V-FITC/PI雙染法）以及細(xì)胞線粒體膜電位變化（JC-1染色法）;單丹磺酰尸胺（MDC）染色法觀察細(xì)胞自噬情況;Western blot檢測(cè)凋亡和自噬相關(guān)蛋白的表達(dá)水平。結(jié)果 ALA-PDT對(duì)A431細(xì)胞的增殖活性有明顯的抑制作用,且呈劑量和時(shí)間依賴性。與對(duì)照組比較,ALA-PDT組細(xì)胞增殖活性、線粒體膜電位均顯著降低（P<0.05）,而細(xì)胞凋亡與自噬水平顯著提高（P<0.05）,Cle... 

【文章來(lái)源】：中國(guó)皮膚性病學(xué)雜志. 2020,34(06)北大核心CSCD

【文章頁(yè)數(shù)】：7 頁(yè)

【部分圖文】：

各組A431細(xì)胞線粒體膜電位的變化

各組A431細(xì)胞胞漿中Cyt C蛋白表達(dá)水平

與對(duì)照組比較,ALA-PDT組細(xì)胞自噬標(biāo)志物蛋白LC-3Ⅱ以及自噬相關(guān)蛋白Beclin1均顯著上調(diào)(t=32.63,17.33;P<0.05),而3-MA組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=0.40,1.37;P>0.05);與ALA-PDT組比較,ALA-PDT+3-MA組LC-3Ⅱ和Beclin1蛋白則顯著下調(diào)(t=21.32,16.01;P<0.05),見圖6。MDC染色結(jié)果顯示,與對(duì)照組比較,ALA-PDT組被MDC熒光標(biāo)記的自噬體明顯增多,熒光強(qiáng)度加強(qiáng),而3-MA組與對(duì)照組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;與ALA-PDT組比較,ALA-PDT+3-MA組被MDC熒光標(biāo)記的自噬體又顯著減少,熒光強(qiáng)度明顯減弱,見圖7。圖5 3-MA與ALA-PDT聯(lián)用對(duì)A431細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白表達(dá)的影響

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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