目的探討5-氨基酮戊酸光動力療法（ALA-PDT）聯(lián)合3-甲基腺嘌呤（3-MA）對皮膚鱗狀細胞癌A431細胞的殺傷作用及其機制研究。方法體外培養(yǎng)人皮膚鱗狀細胞癌A431細胞,設(shè)置不同的ALA濃度（0、0.20、0.40、0.80、1.60 mmol/L）及不同的培養(yǎng)時間（12、24、48 h）,對A431細胞進行ALA-PDT處理,采用MTT法檢測細胞增殖活性并計算半抑制濃度(IC₅₀)值。根據(jù)實驗需要將A431細胞分為空白對照組、ALA-PDT組、3-MA組和ALA-PDT+3-MA組。分組處理后,MTT法檢測細胞增殖;流式細胞術(shù)分別檢測細胞凋亡（Annexin V-FITC/PI雙染法）以及細胞線粒體膜電位變化（JC-1染色法）;單丹磺酰尸胺（MDC）染色法觀察細胞自噬情況;Western blot檢測凋亡和自噬相關(guān)蛋白的表達水平。結(jié)果 ALA-PDT對A431細胞的增殖活性有明顯的抑制作用,且呈劑量和時間依賴性。與對照組比較,ALA-PDT組細胞增殖活性、線粒體膜電位均顯著降低（P<0.05）,而細胞凋亡與自噬水平顯著提高（P<0.05）,Cle... 

【文章來源】：中國皮膚性病學雜志. 2020,34(06)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：7 頁

【部分圖文】：

各組A431細胞線粒體膜電位的變化

各組A431細胞胞漿中Cyt C蛋白表達水平

與對照組比較,ALA-PDT組細胞自噬標志物蛋白LC-3Ⅱ以及自噬相關(guān)蛋白Beclin1均顯著上調(diào)(t=32.63,17.33;P<0.05),而3-MA組差異無統(tǒng)計學意義(t=0.40,1.37;P>0.05);與ALA-PDT組比較,ALA-PDT+3-MA組LC-3Ⅱ和Beclin1蛋白則顯著下調(diào)(t=21.32,16.01;P<0.05),見圖6。MDC染色結(jié)果顯示,與對照組比較,ALA-PDT組被MDC熒光標記的自噬體明顯增多,熒光強度加強,而3-MA組與對照組比較差異無統(tǒng)計學意義;與ALA-PDT組比較,ALA-PDT+3-MA組被MDC熒光標記的自噬體又顯著減少,熒光強度明顯減弱,見圖7。圖5 3-MA與ALA-PDT聯(lián)用對A431細胞凋亡相關(guān)蛋白表達的影響

【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3099905