目的:特應(yīng)性皮炎（atopic dermatitis,AD）是一種遺傳相關(guān)性、慢性、復(fù)發(fā)性、炎癥性皮膚病,在發(fā)達(dá)國家兒童中的發(fā)病率可高達(dá)10%²0%,且在世界范圍內(nèi)呈上升的趨勢。本病通常初發(fā)于嬰兒期,病程呈慢性,部分患者病情可以遷延到成年,患者往往有劇烈瘙癢,嚴(yán)重影響生活質(zhì)量,并給家庭帶來持續(xù)的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。AD確切的發(fā)病機(jī)制尚不完全清楚,但免疫異常、伴隨炎性介質(zhì)的釋放在本病中起重要作用。目前,對于AD的治療以口服抗組胺藥,外用糖皮質(zhì)激素、鈣調(diào)磷酸酶抑制劑及保濕劑等為主,但慢性復(fù)發(fā)性或頑固性AD的治療仍是一個難題。因此,研究AD的致病因素,探索有效控制皮炎癥狀的新的治療靶點和措施,對改善患者預(yù)后和生活質(zhì)量具有重要的理論和實踐意義。高遷移率族蛋白-1（high mobility group box-1,HMGB1）是一種普遍存在于真核細(xì)胞中,高度保守的非組蛋白染色體蛋白。它的主要功能是穩(wěn)定核小體的結(jié)構(gòu)和調(diào)節(jié)基因轉(zhuǎn)錄。然而,研究發(fā)現(xiàn)HMGB1可因細(xì)胞損傷或壞死而被動地釋放,或者由單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和中性粒細(xì)胞等免疫細(xì)胞主動分泌到細(xì)胞外基質(zhì),作為細(xì)胞因子與多種細(xì)胞表面的受體... 

【文章來源】：中國醫(yī)科大學(xué)遼寧省

【文章頁數(shù)】：118 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮略語
第一部分 ：HMGB1在特應(yīng)性皮炎樣綜合征小鼠模型中的作用
    1 前言
    2 材料和方法
        2.1 主要試劑和儀器
            2.1.1 主要試劑
            2.1.2 主要儀器
            2.1.3 需要配制的試劑
        2.2 研究對象和分組
        2.3 實驗方法
            2.3.1 建立AD樣綜合征動物模型
            2.3.2 皮炎評分
            2.3.3 ELISA法檢測血清總IgE
            2.3.4 小鼠皮膚組織切片制作
            2.3.5 組織HE染色
            2.3.6 組織甲苯胺藍(lán)染色
            2.3.7 組織間接免疫熒光染色
            2.3.8 Westernblot
            2.3.9 Real-timePCR
            2.3.10 統(tǒng)計學(xué)方法
    3 結(jié)果
        3.1 DNCB誘導(dǎo)的AD樣綜合征小鼠模型大體表現(xiàn)及皮炎評分
        3.2 皮損組織病理改變
        3.3 血清總IgE水平改變
        3.4 HMGB1及其受體RAGE在皮損組織中的表達(dá)
        3.5 皮損組織中HMGB1、RAGE、NF-κB、TNF-α和IL-6蛋白的表達(dá)
        3.6 皮損組織中TNF-αmRNA和IL-6mRNA的表達(dá)
    4 討論
    5 結(jié)論
第二部分 ：HMGB1/RAGE在肥大細(xì)胞中的表達(dá)
    6 前言
    7 材料和方法
        7.1 主要試劑和儀器
            7.1.1 主要試劑
            7.1.2 主要儀器
            7.1.3 需要配制的試劑
        7.2 實驗細(xì)胞
        7.3 實驗方法
            7.3.1 細(xì)胞培養(yǎng)
            7.3.2 細(xì)胞甲苯胺藍(lán)染色
            7.3.3 細(xì)胞間接免疫熒光染色
            7.3.4 流式細(xì)胞術(shù)檢測FSMC表面分子FcεRI和CD117的表達(dá)
            7.3.5 Westernblot檢測FSMC中HMGB1、RAGE、TNF-α和IL-6蛋白的表達(dá)
            7.3.6 統(tǒng)計學(xué)方法
    8 結(jié)果
        8.1 細(xì)胞培養(yǎng)
        8.2 FSMC的鑒定
            8.2.1 FSMC不同培養(yǎng)時期甲苯胺藍(lán)染色
            8.2.2 流式細(xì)胞術(shù)檢測FSMC表面FcεRI和CD117的表達(dá)
        8.3 HMGB1及其受體RAGE在肥大細(xì)胞中的表達(dá)
            8.3.1 HMGB1及其受體RAGE在FSMC中的表達(dá)
            8.3.2 HMGB1及其受體RAGE在P815細(xì)胞中的表達(dá)
            8.3.3 FSMC中HMGB1、RAGE、TNF-α和IL-6蛋白的表達(dá)
    9 討論
    10 結(jié)論
第三部分 ：HMGB1對肥大細(xì)胞活化的影響
    11 前言
    12 材料和方法
        12.1 主要試劑和儀器
        12.2 實驗對象
        12.3 實驗方法
            12.3.1 CCK-8法檢測HMGB1和GL對P815細(xì)胞增殖的影響
            12.3.2 細(xì)胞實驗分組
            12.3.3 P815細(xì)胞脫顆粒實驗
            12.3.4 流式細(xì)胞術(shù)檢測HMGB1對P815細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度的影響
            12.3.5 流式細(xì)胞術(shù)檢測HMGB1對P815細(xì)胞表面CD117表達(dá)的影響
            12.3.6 Westernblot
            12.3.7 Real-timePCR
            12.3.8 募集作用檢測
            12.3.9 統(tǒng)計學(xué)方法
    13 結(jié)果
        13.1 HMGB1和GL對P815細(xì)胞增殖的影響
        13.2 HMGB1對P815細(xì)胞脫顆粒的影響
        13.3 HMGB1對P815細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度的影響
        13.4 HMGB1對P815細(xì)胞CD117表達(dá)的影響
        13.5 HMGB1對P815細(xì)胞RAGE、TNF-α、IL-6和MCTryptase蛋白表達(dá)的影響
        13.6 HMGB1對P815細(xì)胞NF-κB信號通路的影響
        13.7 HMGB1對P815細(xì)胞HMGB1mRNA和RAGEmRNA表達(dá)的影響
        13.8 HMGB1對小鼠腹腔肥大細(xì)胞的募集作用
    14 討論
    15 結(jié)論
本研究創(chuàng)新性的自我評價
參考文獻(xiàn)
綜述一
    參考文獻(xiàn)
綜述二
    參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間取得的研究成果
致謝
個人簡歷



本文編號：3040234