自1989年以來，腫瘤基因治療的研究有了較大的發(fā)展。應(yīng)用轉(zhuǎn)入細(xì)胞因子基因的瘤苗誘導(dǎo)體內(nèi)抗腫瘤免疫反應(yīng)治療腫瘤的方法，是目前腫瘤免疫治療和基因治療的熱點(diǎn)之一。為提高療效，尋找新的綜合應(yīng)用方法是一條重要途徑。本研究將IL-2 cDNA轉(zhuǎn)入高惡性、高轉(zhuǎn)移性、弱免疫原性的小鼠B₁₆黑色素瘤細(xì)胞。系統(tǒng)研究分泌IL2的轉(zhuǎn)基因B₁₆細(xì)胞(B₁₆-IL2)對小鼠免疫反應(yīng)的影響，以探討其增強(qiáng)機(jī)體抗腫瘤免疫能力的機(jī)理。同時(shí)觀察B₁₆-IL2細(xì)胞在體外誘導(dǎo)產(chǎn)生針對B₁₆黑色素瘤的特異性殺傷T細(xì)胞（CTL）的作用。并將此CTL與B₁₆-IL2瘤苗聯(lián)合用于荷瘤小鼠的免疫治療，以期獲得比單獨(dú)應(yīng)用轉(zhuǎn)基因瘤苗更佳的抗腫瘤療效。 IL2基因的轉(zhuǎn)導(dǎo)采用逆轉(zhuǎn)錄病毒感染法。首先構(gòu)建了含人IL2 cDNA的逆轉(zhuǎn)錄病毒載體XM6-IL2。將其轉(zhuǎn)入ψ—2包裝細(xì)胞后用G418篩選。Southern雜交證實(shí)所有陽性克隆中均有IL2cDNA的整合。產(chǎn)生的逆轉(zhuǎn)錄病毒滴度在10³-1... 

【文章來源】：北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院北京市 211工程院校 985工程院校

【文章頁數(shù)】：103 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

IL一2重組逆轉(zhuǎn)錄病毒載體酶切鑒定

10.人IL一2cNDA在觀6一IL2轉(zhuǎn)染的中一2細(xì)胞內(nèi)的整合1.PG哪一42一ILZ/Hind1112.沖一22083.沖XI‘4.中5.沖Xl116.沖XI157.沖XI沖XIZi9.沖經(jīng)切丫“幾1‘‘、、一‘養(yǎng)瓶內(nèi)長許多散在的陽性B16細(xì)胞克隆(Bl擴(kuò)ILZ)，)。反復(fù)轉(zhuǎn)代20天后，用xL一2eDNA0.7kb長的核普酸ern雜交，檢測IL一2基因在Bl。細(xì)胞內(nèi)的整合情況，結(jié)因組整合有IL一2oDNA，而野生型B16細(xì)胞未檢測到I12)

圖19.B16一兒2細(xì)胞(TEM又10K).IL一2基因轉(zhuǎn)移對Bl。細(xì)胞體外生長特性的影響.”H一TdR摻入及生長曲線測定結(jié)果表明，IL一2基因轉(zhuǎn)染對B，。細(xì)胞生長無明顯影響，結(jié)果見表3，圖20。表3.轉(zhuǎn)染前后B16細(xì)胞”H一TdR摻入值比較組別3H一化R摻入(epm)BisBi6一ILZ423.338士89.48450.00士117.17

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號：2994871