發(fā)布時間：2021-01-23 08:08

　　自1989年以來，腫瘤基因治療的研究有了較大的發(fā)展。應用轉入細胞因子基因的瘤苗誘導體內抗腫瘤免疫反應治療腫瘤的方法，是目前腫瘤免疫治療和基因治療的熱點之一。為提高療效，尋找新的綜合應用方法是一條重要途徑。本研究將IL-2 cDNA轉入高惡性、高轉移性、弱免疫原性的小鼠B₁₆黑色素瘤細胞。系統(tǒng)研究分泌IL2的轉基因B₁₆細胞(B₁₆-IL2)對小鼠免疫反應的影響，以探討其增強機體抗腫瘤免疫能力的機理。同時觀察B₁₆-IL2細胞在體外誘導產(chǎn)生針對B₁₆黑色素瘤的特異性殺傷T細胞（CTL）的作用。并將此CTL與B₁₆-IL2瘤苗聯(lián)合用于荷瘤小鼠的免疫治療，以期獲得比單獨應用轉基因瘤苗更佳的抗腫瘤療效。 IL2基因的轉導采用逆轉錄病毒感染法。首先構建了含人IL2 cDNA的逆轉錄病毒載體XM6-IL2。將其轉入ψ—2包裝細胞后用G418篩選。Southern雜交證實所有陽性克隆中均有IL2cDNA的整合。產(chǎn)生的逆轉錄病毒滴度在10³-1... 

【文章來源】：北京協(xié)和醫(yī)學院北京市 211工程院校 985工程院校

【文章頁數(shù)】：103 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

IL一2重組逆轉錄病毒載體酶切鑒定

10.人IL一2cNDA在觀6一IL2轉染的中一2細胞內的整合1.PG哪一42一ILZ/Hind1112.沖一22083.沖XI‘4.中5.沖Xl116.沖XI157.沖XI沖XIZi9.沖經(jīng)切丫“幾1‘‘、、一‘養(yǎng)瓶內長許多散在的陽性B16細胞克隆(Bl擴ILZ)，)。反復轉代20天后，用xL一2eDNA0.7kb長的核普酸ern雜交，檢測IL一2基因在Bl。細胞內的整合情況，結因組整合有IL一2oDNA，而野生型B16細胞未檢測到I12)

圖19.B16一兒2細胞(TEM又10K).IL一2基因轉移對Bl。細胞體外生長特性的影響.”H一TdR摻入及生長曲線測定結果表明，IL一2基因轉染對B，。細胞生長無明顯影響，結果見表3，圖20。表3.轉染前后B16細胞”H一TdR摻入值比較組別3H一化R摻入(epm)BisBi6一ILZ423.338士89.48450.00士117.17

【參考文獻】：
期刊論文
[1]硒對LAK細胞活性的影響及其機理研究[J]. 牛桂蓮,龔伊紅,王麗,董繼紅,張學全.  中華微生物學和免疫學雜志. 1995(02)
[2]IL—2激活的腫瘤浸潤性淋巴細胞與LAK細胞體內外抗腫瘤作用的比較[J]. 曹雪濤,葉天星,楊嗣坤.  中國免疫學雜志. 1990(02)
[3]人外周血中LAK細胞的克隆化[J]. 毛寧,張明偉,江飛子,任蘊芳,田潔,奚永志,李秀森,唐佩弦.  中國應用生理學雜志. 1990(01)
[4]用3H-TdR釋放法測量細胞介導的細胞毒功能[J]. 吳厚生,謝琪,姜小玲,范行義.  上海免疫學雜志. 1987(04)
[5]血卟啉激光治療腫瘤后對腫瘤轉移影響的實驗研究[J]. 高進,錢書森,李寶貴,陳錫萍.  中華腫瘤雜志. 1986 (04)



本文編號：2994871