發(fā)布時間：2021-01-20 14:21

　　白癜風(fēng)是一種常見的后天性局部脫色素性皮膚病,據(jù)國內(nèi)外統(tǒng)計其發(fā)病率約為0.5²%,且有逐年增高趨勢。白癜風(fēng)的病因和發(fā)病機(jī)制尚未明確,病理表現(xiàn)為皮損局部表皮和毛囊中的黑素細(xì)胞（melanocytes,MC）減少或缺失,從而使黑素合成減少或缺失,臨床表現(xiàn)為境界清楚的色素脫失斑。近年來,國外學(xué)者研究表明,白癜風(fēng)患者皮損局部和全身均可檢測到針對MC表面抗原的自身抗體和細(xì)胞毒性CD8+T細(xì)胞,認(rèn)為白癜風(fēng)是一種自身免疫性脫色素性皮膚病。白癜風(fēng)的治療比較困難,目前有很多治療方法,主要包括光化學(xué)治療、內(nèi)服藥物治療、外用藥物治療以及外科治療,前三種治療方法都存在療效個體差異大、副作用大等不足,外科治療主要包括自體表皮移植、自體MC移植和異體MC移植等方法,其中自體MC移植是療效最肯定、副作用最小的方法,因而外科治療已經(jīng)成為白癜風(fēng)治療研究的熱點。目前臨床應(yīng)用于移植治療的MC主要來源于患者自身正常皮膚分離的MC體外培養(yǎng)。成人表皮中MC含量極少,只占表皮細(xì)胞的2%左右,正常情況下體外培養(yǎng)的MC生長緩慢、增殖能力極為有限,常需使用促MC生長因子如經(jīng)典的霍亂毒素（cholera toxin,C... 

【文章來源】：中國人民解放軍陸軍軍醫(yī)大學(xué)重慶市

【文章頁數(shù)】：131 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

pEGFP-N1環(huán)形圖

1-2 SV40LTAg-loxP-EGFP-neo 質(zhì)粒環(huán)形 EcoRⅠ/BamHⅠ雙酶切 4h 后，1.2%瓊盒切膠回收 2.1kb 左右的目的片段。后，1%瓊脂糖凝膠電泳鑒定，用瓊脂糖片段。酶切反應(yīng)體系：物 體積(μl)雙酶切 buffer 2.0EGFP-loxP 片段 5.0R I 1.0H I 1.02O 11.0積 20.0h。用 T4 DNA 連接酶將 SV40LT 酶切

結(jié) 果一. SV40LTAg 片段的擴(kuò)增與鑒定(一) SV40TAg 兩個外顯子的擴(kuò)增與拼接：以質(zhì)粒 pUC19-SV40T 為模板，分別以 SV40T F01 / SV40T R01，SV40T F02 為引物，SV40T 兩個外顯子的擴(kuò)增 PCR 產(chǎn)物，SV40T I，SV40T II，經(jīng) 1.膠電泳分析，目的片段分別為 279bp 和 1.9kb(圖 1-3)。以 SV40T I, SV40T I40T F01/ SV40T R02 為引物，進(jìn)行 PCR 擴(kuò)增，擴(kuò)增產(chǎn)物即為 SV40LTAg，糖凝膠電泳分析，目的片段為 2.1kb(圖 1-4)。M 1 2 M 1

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]SV40大T抗原對人皮膚成纖維細(xì)胞生物學(xué)行為的影響[J]. 王新文,金巖,劉源,王軍琳,趙宇,董蕊.  第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報. 2003(06)
[2]白癜風(fēng)同種異體黑素細(xì)胞移植初步研究[J]. 盧濤,高天文,劉玉峰,李春英,孫林潮.  中國皮膚性病學(xué)雜志. 2001(04)
[3]SV40誘導(dǎo)髁突軟骨細(xì)胞永生化的實驗研究[J]. 段小紅,吳軍正,毛勇,李峰,楊彤元.  中華口腔醫(yī)學(xué)雜志. 2001(01)
[4]化學(xué)脫色法制備白癜風(fēng)動物模型[J]. 龍子江,白玫,樊彥,丁榮光,王元勛.  安徽中醫(yī)學(xué)院學(xué)報. 1997(06)



本文編號：2989202