番荔素類成分對黑色素瘤的抗癌作用及其機(jī)制研究
發(fā)布時間:2017-04-09 11:17
本文關(guān)鍵詞:番荔素類成分對黑色素瘤的抗癌作用及其機(jī)制研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:番荔索類成分是番荔枝科植物的特征性成分之一,具有很強(qiáng)的體內(nèi)外抗腫瘤作用,且抗瘤譜廣。本論文在已有的工作基礎(chǔ)上,研究番荔素類成分對黑色素瘤細(xì)胞的抑制活性及其作用機(jī)制,以期為番荔素類成分在抗腫瘤藥物上的開發(fā)和利用提供科學(xué)的理論依據(jù)。 1、粗提物AS9(為番荔枝Annona Squamosa中子的提取物,主要含有番荔素類成分)和3種番荔枝內(nèi)酯類單體Desacetyluvaricin去乙酰紫玉盤素)、Bullatacin泡番荔枝辛)、Squamocin(番荔辛)對人黑色素瘤A875、A375和小鼠黑色素瘤B16細(xì)胞的增殖抑制作用研究。采用體外SRB檢測法,酶標(biāo)儀測定其光密度值,計算IC50值,從而確定敏感瘤株。結(jié)果表明:粗提物AS9和單體化合物Desacetyluvaricin、Squamocin、Bullatacin均可顯著抑制黑色素瘤A875、A375、B16細(xì)胞的增殖,并呈現(xiàn)濃度依賴效應(yīng)。Desacetyluvaricin對人黑色素瘤A375細(xì)胞抑瘤效果最好,IC50為0.71μg/mL; Squamocin對人黑色素瘤A875細(xì)胞有很強(qiáng)的殺傷作用,IC50為0.06μg/mL;而AS9和Bullatacin對B16細(xì)胞的IC50分別為5.93μg/mL、2.07μg/mL。 2、粗提物AS9對黑色素瘤A875細(xì)胞抑瘤機(jī)制研究。采用H33342/PI雙染法觀察細(xì)胞核形態(tài)變化,熒光倒置顯微鏡下可見A875細(xì)胞核染色質(zhì)隨著AS9濃度的升高逐漸聚積在一起,并且發(fā)生皺縮、邊緣化,細(xì)胞核內(nèi)出現(xiàn)致密的顆粒狀或塊狀熒光,多數(shù)細(xì)胞核發(fā)生碎裂;乳酸脫氫酶LDH含量測定檢測其與活細(xì)胞的比例變化關(guān)系,結(jié)果發(fā)現(xiàn)乳酸脫氫酶的釋放率隨著AS9濃度的升高而逐漸增大,培養(yǎng)基中LDH的含量與死細(xì)胞成正比例關(guān)系;利用Annexin V/PI雙、單染流式細(xì)胞技術(shù)檢測AS9對人黑色素瘤A875細(xì)胞周期及凋亡影響,結(jié)果顯示,AS9主要將細(xì)胞阻滯在G1期,并以濃度依賴的方式誘導(dǎo)A875細(xì)胞凋亡。 3、利用Annexin V/PI雙染、PI單染流式細(xì)胞儀技術(shù)檢測,發(fā)現(xiàn)Desacetyluvaricin可明顯誘導(dǎo)黑色素瘤A375細(xì)胞凋亡,并且將細(xì)胞阻滯在S期,阻斷其向G2期轉(zhuǎn)化,從而抑制黑色素瘤細(xì)胞增殖。
【關(guān)鍵詞】:番荔素類成分 粗提物AS9 去乙酰紫玉盤素 黑色素瘤 抑瘤作用 SRB法 細(xì)胞周期 細(xì)胞凋亡
【學(xué)位授予單位】:吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2013
【分類號】:R285;R739.5
【目錄】:
- 摘要4-5
- ABSTRACT5-9
- 前言9-10
- 第一篇 文獻(xiàn)綜述10-18
- 第一章 番荔素類成分的抗腫瘤研究進(jìn)展10-17
- 1.1 番荔素類成分的結(jié)構(gòu)類型10-11
- 1.2 番荔素類成分的構(gòu)效關(guān)系11
- 1.3 番荔素類成分的抗腫瘤活性研究11-12
- 1.4 番荔素類成分的抗腫瘤機(jī)制研究12-16
- 1.5 小結(jié)16-17
- 第二章 黑色素瘤簡介17-18
- 第二篇 研究內(nèi)容18-44
- 第一章 番荔素類成分體外抗黑色素瘤活性篩選18-28
- 1.1 材料和方法18-21
- 1.2 結(jié)果21-26
- 1.3 討論26-27
- 1.4 小結(jié)27-28
- 第二章 AS9對人黑色素瘤A875細(xì)胞的抑瘤機(jī)制研究28-39
- 2.1 H33342/PI熒光染色法28-30
- 2.2 乳酸脫氫酶LDH測定實驗30-32
- 2.3 流式細(xì)胞儀檢測AS9對人黑色素瘤A875細(xì)胞凋亡的影響32-35
- 2.4 流式細(xì)胞儀檢測AS9對人黑色素瘤A875細(xì)胞周期的影響35-37
- 2.5 小結(jié)37-39
- 第三章 DESACETYLUVARICIN對A375細(xì)胞周期及凋亡影響的研究39-44
- 3.1 材料和方法39-40
- 3.2 結(jié)果40-42
- 3.3 討論42-43
- 3.4 小結(jié)43-44
- 結(jié)論44-46
- 參考文獻(xiàn)46-51
- 作者簡介51-52
- 致謝52
【參考文獻(xiàn)】
中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前6條
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本文編號:295146
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