黑色素瘤具有惡性程度高、生長(zhǎng)迅速、預(yù)后差等特點(diǎn),近年來其發(fā)病率和死亡率急劇上升,引起較廣泛的社會(huì)關(guān)注。放射治療是惡性腫瘤治療的主要手段之一,也是晚期黑色素瘤的主要治療方法,但治療中常易出現(xiàn)放療耐受性增加,直接影響黑色素瘤的治療效果,如何降低黑色素瘤的放療耐受并研究其可能存在的相關(guān)機(jī)制關(guān)系到患者的預(yù)后生存,對(duì)臨床治療意義重大。MicroRNA（miRNA）是一類廣泛存在于真核生物長(zhǎng)度約為22個(gè)核苷酸的小分子單鏈RNA,目前已知的miRNA最廣泛的功能是通過其種子序列識(shí)別靶基因mRNA 3’-UTR上的結(jié)合位點(diǎn),抑制其靶基因的表達(dá)。研究發(fā)現(xiàn)miRNA能調(diào)節(jié)人類近1/3的基因,miRNA的基因調(diào)控作用也是一個(gè)復(fù)雜的網(wǎng)絡(luò)狀結(jié)構(gòu),目前越來越多的研究表明miRNA與腫瘤的進(jìn)展有著密切的關(guān)系,并且部分miRNA在腫瘤的放射治療中也發(fā)揮重要作用。研究表明,miR-615-3p可影響多種腫瘤的發(fā)生發(fā)展,發(fā)揮抑制腫瘤的作用,但在黑色素瘤中的作用及其機(jī)制仍不清楚,并且其對(duì)黑色素瘤放療療效的影響尚未見報(bào)道。目的:研究miR-615-3p對(duì)黑色素瘤A375細(xì)胞生物行為的影響,發(fā)掘miR-615-3p發(fā)揮作用潛在... 

【文章來源】：蘭州大學(xué)甘肅省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】：56 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

miRNA的形成和轉(zhuǎn)錄后調(diào)控[21]

22圖 3.1 黑色素瘤外泌體中輻射相關(guān) microRNA 的表達(dá)譜和輻射細(xì)胞內(nèi) miR-615-3p 的表達(dá)（A）外泌體 miRNA 高通量測(cè)序?qū)嶒?yàn)流程圖。（B）文庫(kù)構(gòu)建流程圖。（C）差異表達(dá) miRNA熱圖（Heatmap）。（D）差異表達(dá) miRNA 火山圖（Volcano Plot）。（E）qRT-PCR 檢測(cè)對(duì)照組和射線輻射組細(xì)胞中 miR-615-3p 的表達(dá)水平。**P＜0.01，與對(duì)照組比較。3.2 MiR-615-3p 對(duì)黑色素瘤生物學(xué)行為的影響研究發(fā)現(xiàn)，miR-615-3p 可影響多種腫瘤細(xì)胞的增殖、侵襲、遷移、周期和凋亡，但 miR-615-3p 對(duì)黑色素瘤生物學(xué)行為的影響仍不清楚，為進(jìn)一步了解miR-615-3p 對(duì)黑色素瘤增殖、遷移、周期的影響，本研究合成 miR-615-3p 的模擬物（miR-615-3p mimic）和抑制物（miR-615-3p inhibitor），并對(duì)其作用分別進(jìn)行驗(yàn)證。miR-615-3p mimic 轉(zhuǎn)入細(xì)胞內(nèi)，可模擬內(nèi)源性成熟 miR-615-3p 的高表達(dá)水平，增強(qiáng) miR-615-3p 的調(diào)控作用，進(jìn)行功能獲得性（gain-of-function）研究；miR-615-3p inhibitor 則可減弱內(nèi)源 miR-615-3p 的基因表達(dá)，可進(jìn)行功能缺失性

位論文 miR-615-3p對(duì)黑色素瘤的增殖抑制和輻nction ） 研 究 。 結(jié) 合 生 物 信 息 挖 掘 ， 通 過 轉(zhuǎn) 染tor，在后續(xù)研究中可進(jìn)一步驗(yàn)證其所調(diào)控靶基因的表達(dá)5-3p mimic 在 A375 細(xì)胞中轉(zhuǎn)染效率的檢測(cè)5 細(xì)胞系分為轉(zhuǎn)染 miR-615-3p mimic 組和轉(zhuǎn)染 mim檢測(cè)轉(zhuǎn)染 48 h 及 72 h 后 miR-615-3p 的表達(dá)水平。結(jié)果 72 h 后，轉(zhuǎn)染 miR-615-3p mimic 組 miR-615-3p 表達(dá)水NC組，且差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。該實(shí)驗(yàn)結(jié)果表75 細(xì)胞系轉(zhuǎn)染成功，可滿足后續(xù)實(shí)驗(yàn)要求，本研究將對(duì)細(xì)胞中產(chǎn)生的生物學(xué)行為的影響做進(jìn)一步研究。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]microRNAs, an active and versatile group in cancers[J]. Jeffrey Liu.  International Journal of Oral Science. 2011(04)
[2]卵巢癌相關(guān)基因的篩選與鑒定[J]. 岳文,孫麗亞,李春海,張立新,裴雪濤.  癌癥. 2004(02)



本文編號(hào)：2930086