目的:檢測內(nèi)皮抑素基因腺病毒載體表達系統(tǒng)（Ad-mES）體外生物學活性及其治療小鼠黑色素瘤的效果;初步探討內(nèi)皮抑素的抗腫瘤機理。方法:在HEK293細胞內(nèi)擴增腺病毒,50%組織培養(yǎng)感染劑量法測定其滴度;RT-PCR、Western Blot和ELISA法檢測目的基因的表達;MTT法和流式細胞術(shù)檢測靶細胞的體外生長情況。多因素多水平析因分析法設計測定體內(nèi)轉(zhuǎn)染率;觀察各組小鼠腫瘤的生長、轉(zhuǎn)移和生存率,Western Blot、免疫組化和透射電鏡等鑒定組織內(nèi)目的基因的表達、血管生成和靶細胞的生長。結(jié)果:腺病毒的滴度為10¹⁰pfu/ml,靶細胞明確表達內(nèi)皮抑素基因,Ad-mES抑制內(nèi)皮細胞的增殖;治療小鼠黑色素瘤時,取瘤內(nèi)注射和間隔7天給藥Ad的體內(nèi)轉(zhuǎn)染率最高（MOI=500時,37.33%）。治療組小鼠平均生存時間延長,腫瘤體積增長減慢,腫瘤新生血管生成減少。結(jié)論:Ad-mES對小鼠黑色素瘤有較好的治療效果。 

【文章來源】：中國人民解放軍海軍軍醫(yī)大學上海市 211工程院校

【文章頁數(shù)】：97 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

HEK293感染Ad一mES5d(x200)圖l一8HEK293細胞感染Ad一GFP5d(x200)

圖1一7HEK293感染Ad一mES5d(x200)圖l一8HEK293細胞感染Ad一GFP5d(x200)圖1一9小量擴增時GFP陽性細胞(x200)圖l一10Ad一mES和Ad一GFP濃縮后的終產(chǎn)物圖1一11培養(yǎng)72h的黑色素瘤細胞(x200)圖1一12培養(yǎng)72h的ECV304細胞(X200)

圖1一7HEK293感染Ad一mES5d(x200)圖l一8HEK293細胞感染Ad一GFP5d(x200)圖1一9小量擴增時GFP陽性細胞(x200)圖l一10Ad一mES和Ad一GFP濃縮后的終產(chǎn)物圖1一11培養(yǎng)72h的黑色素瘤細胞(x200)圖1一12培養(yǎng)72h的ECV304細胞(X200)

【參考文獻】：
期刊論文
[1]重組人血管內(nèi)皮抑制素抗腫瘤效應的應用研究[J]. 劉江秋,李忠義,陳林生,孫亦紅,徐璐,汪軍遠,劉萬興,夏結(jié)來.  細胞與分子免疫學雜志. 2001(01)



本文編號：2923327