發(fā)布時間：2020-12-06 20:49

　　血小板活化因子（PAF）是由多種炎癥細(xì)胞（嗜中性白細(xì)胞、巨噬細(xì)胞及酸性粒細(xì)胞等）、血小板及血管內(nèi)皮細(xì)胞等產(chǎn)生的一種高生理活性磷脂。PAF通過與細(xì)胞膜表面的受體結(jié)合而發(fā)揮效應(yīng),已證實PAF不僅在生殖、胚胎發(fā)育、血壓等方面具有調(diào)節(jié)功能,同時又是強(qiáng)效的炎癥介質(zhì),在許多疾病如:哮喘、敗血癥性休克、自身免疫性疾病、變態(tài)反應(yīng)性疾病、移植排斥發(fā)病過程中扮演重要角色,在動物實驗中,PAF受體拮抗劑能有效地改善病變的過程。PAF在生物體內(nèi)以動態(tài)形式存在,細(xì)胞受刺激后生成PAF,隨之很快被代謝清除。Barr在1980年首先報道血漿中存在著一種滅活PAF的物質(zhì),即PAF乙酰水解酶（PAF-AH）。近年來的研究表明,PAF-AH在控制PAF的釋放及降解,維持體內(nèi)PAF的生理平衡中起著重要的作用。PAF-AH可以水解PAF 的sn-2位上的乙酰基而使PAF失活。PAF-AH根據(jù)存在形式分為兩種類型即:血漿型（pPAH-AH）及細(xì)胞型（cPAF-AH）,其中后者有三種同工酶Ⅰa, Ⅰb及Ⅱ型。PAF-AHⅠb與人類LIS-1基因產(chǎn)物同源（99%）,LIS-1基因突變可導(dǎo)致MDL,即一種大腦皮層腦回缺失性疾病,已證... 

【文章來源】：中國人民解放軍海軍軍醫(yī)大學(xué)上海市 211工程院校

【文章頁數(shù)】：58 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

PAF-AH活性檢測反應(yīng)原理

醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文 林2.2 配制檢測緩沖液 Buffer 1（0.1 mol/L Tris-HCl 和 1 mmol/L EGTA，pH 7.-2-硝基苯甲酸(DTNB)溶液和反應(yīng)底物 2-硫代 PAF（2-Thio PAF）溶液。.3 測定 PAF-AH 活性[1]：空白對照孔為 10μl DTNB+15μl 檢測緩沖液；陽性對照DTNB+10μl PAF-AH 標(biāo)準(zhǔn)品+5μl 檢測緩沖液；樣品孔 10μl DTNB+10μl 血漿樣品+沖液，均復(fù)孔測定。上述試劑混勻后每孔加 200μl 底物 2-Thio PAF，室溫放置 3讀取不同時間（5 個以上時間點）各樣本在 405nm 波長下的吸光度值（A405），并計本的吸光度變化率ΔA405/min，用試劑盒提供的 PAF-AH 標(biāo)準(zhǔn)品（2μg/mL）作為對

圖 3 各組 PAF-AH 活性值的比較3 討論　PAF 是由多種炎癥細(xì)胞（嗜中性粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、酸性粒細(xì)胞等）、血小板及血管內(nèi)皮胞等產(chǎn)生的一種高生理活性磷脂，具有廣泛的生物學(xué)活性，同時又是強(qiáng)效炎癥介質(zhì)[2]，在屑病發(fā)病中具有重要的病理生理作用。Mallet 等證實在有炎癥及增生性的銀屑病皮損中 PAF 含量明顯高于正常人的皮膚[3]。PAF-AH 屬于磷脂酶 A2 家族，特異性作用于 PAF 甘油架的 sn-2 位乙酰基，將其水解為無活性的 lyso-PAF，是 PAF 代謝的主要方式。近年來的究表明，PAF-AH 在控制 PAF 的釋放及降解，維持體內(nèi) PAF 的生理平衡中起著重要的作用漿 PAF-AH 的活性可間接的反映 PAF 的含量[4]，其活性缺陷與多種炎癥性、過敏性疾病具相關(guān)性，如系統(tǒng)性紅斑狼瘡，異位性皮炎，哮喘等[5]。Tjoelker 等報道了重組 PAF-AH 對F 誘發(fā)的炎癥反應(yīng)具有抑制作用[6]，體外實驗也顯示 PAF-AH 可明顯抑制 PAF 誘導(dǎo)的中性細(xì)胞活化，而炎癥過程是銀屑病發(fā)病機(jī)制中的一個重要環(huán)節(jié)。鑒于以上研究推測 PAF-A能在銀屑病中起到一定的作用。


本文編號：2902009