過氧化物還原酶I（Peroxiredoxin I,Prdx1）是一種過氧化物還原酶,它在過氧化氫介導(dǎo)的信號通路中發(fā)揮重要作用。Prdx1既可以清除細(xì)胞內(nèi)活性氧,也可以與細(xì)胞內(nèi)的其他蛋白質(zhì)相互結(jié)合參與到細(xì)胞增殖,分化,細(xì)胞凋亡和腫瘤的發(fā)生過程中。雖然Prdx1在多種器官腫瘤發(fā)生過程中的作用及其機制研究較為深入,但是Prdx1在皮膚腫瘤發(fā)生過程中的調(diào)節(jié)作用尚不明確。在本實驗中,我們通過建立DMBA/TPA皮膚腫瘤模型,研究在DMBA/TPA誘導(dǎo)的皮膚腫瘤產(chǎn)生過程中Prdx1可能發(fā)揮的作用及其機制。在本實驗中,我們首先利用DMBA和TPA這兩種化合物分別對野生型小鼠和基因敲除型小鼠的背部皮膚處理1周和20周,測量腫瘤直徑并計數(shù)。我們通過組織病理學(xué)方法觀察兩種基因型小鼠皮膚在短期TPA處理和長期TPA處理后的病理學(xué)特征,包括表皮厚度,真皮內(nèi)炎性細(xì)胞浸潤和表皮凋亡細(xì)胞數(shù)量。為了研究Prdx1發(fā)揮作用的分子機理,我們對人正常角質(zhì)細(xì)胞系HaCaT細(xì)胞進行了Prdx1基因敲降處理,用以研究在DMBA/TPA引發(fā)的細(xì)胞凋亡過程中Prdx1發(fā)揮的作用。結(jié)果顯示,在TPA處理20周后,Prdx1基因敲除型小... 

【文章來源】：黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)黑龍江省

【文章頁數(shù)】：53 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
英文縮略語表
摘要
英文摘要
1 文獻綜述
    1.1 引言
    1.2 鱗狀細(xì)胞癌
    1.3 DMBA/TPA皮膚腫瘤模型
        1.3.1 引發(fā)階段
        1.3.2 促長階段
        1.3.3 進展階段
    1.4 Ras突變和細(xì)胞凋亡
    1.5 DMBA/TPA皮膚腫瘤模型中的免疫反應(yīng)
    1.6 Prdx家族
    1.7 研究意義
2 材料和方法
    2.1 實驗小鼠
    2.2 實驗主要儀器
    2.3 腫瘤誘導(dǎo)
        2.3.1 小鼠準(zhǔn)備
        2.3.2 化合物配置
        2.3.3 背部化合物處理
        2.3.4 腫瘤計數(shù)和測量
    2.4 小鼠皮膚組織的H&E染色
        2.4.1 實驗樣品獲得
        2.4.2 皮膚組織脫水
        2.4.3 H&E染色
    2.5 免疫印跡（Western blot）
    2.6 Prdx1基因敲降的HaCaT穩(wěn)定細(xì)胞系的建立
        2.6.1 確定最優(yōu)篩選濃度
        2.6.2 慢病毒轉(zhuǎn)染最適滴度篩選
        2.6.3 轉(zhuǎn)染和擴增
    2.7 MTT法
    2.8 主要實驗用試劑
3 結(jié)果與分析
    3.1 Prdx1缺失對皮膚腫瘤數(shù)量的影響
    3.2 Prdx1缺失對腫瘤形態(tài)和體積的影響
    3.3 Prdx1缺失對表皮厚度的影響
    3.4 Prdx1缺失對TPA引發(fā)的免疫反應(yīng)的影響
    3.5 Prdx1缺失對表皮凋亡細(xì)胞數(shù)量的影響
    3.6 表皮凋亡相關(guān)蛋白檢測
    3.7 HaCaT細(xì)胞Prdx1敲降效果檢測
    3.8 Prdx1敲降對過氧化氫誘導(dǎo)的細(xì)胞存活率的影響
    3.9 Prdx1敲降對過氧化氫誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡的影響
4 討論
5 結(jié)論
參考文獻
致謝
附錄
個人簡歷



本文編號：2900398