帶狀皰疹后疼痛治療前后蛋白質(zhì)組學(xué)生物標(biāo)記特征研究
發(fā)布時(shí)間:2020-12-05 18:59
蛋白質(zhì)組學(xué)是在后基因組時(shí)代出現(xiàn)的一個(gè)新興的研究領(lǐng)域,它的主要任務(wù)是識(shí)別鑒定細(xì)胞、組織或機(jī)體的全部蛋白質(zhì)。主要應(yīng)用領(lǐng)域是醫(yī)藥市場(chǎng)和疾病的機(jī)理研究。帶狀皰疹后疼痛的確切機(jī)理目前尚不明確,蛋白質(zhì)組學(xué)的發(fā)展使人們有了新的認(rèn)識(shí)工具。本研究是治療帶狀皰疹后疼痛中藥“復(fù)元鎮(zhèn)痛湯”研究的一部分,隸屬于國(guó)家教育部重大項(xiàng)目——“中藥復(fù)方功能主治與其藥效物質(zhì)基礎(chǔ)的相關(guān)性研究”課題(課題編號(hào)00176)。1研究目的本研究通過(guò)熒光標(biāo)記和雙向電泳的方法考查帶狀皰疹后疼痛患者治療前后CSF蛋白質(zhì)表達(dá)的差異,探討用蛋白質(zhì)組學(xué)方法解釋PHN發(fā)病機(jī)理的可行性,為最終能夠找到該病的疾病特異性蛋白DSPs作準(zhǔn)備,為中藥的信息物質(zhì)鑒定和藥效組分生物篩選奠定基礎(chǔ)。2研究?jī)?nèi)容和方法2.1 Ettan 2-D Quant定量試劑盒進(jìn)行總蛋白含量測(cè)定;2.2分析型凝膠的樣品CyDyeTM DIGE熒光標(biāo)記。應(yīng)用CyDyeTM DIGE熒光標(biāo)記的雙向凝膠電泳,分離并分析帶狀皰疹患者治療前后CSF的蛋白質(zhì)表達(dá)差異。通過(guò)熒光掃描及差異分析確定表達(dá)量差異顯著的蛋白質(zhì)點(diǎn);2.3制備型凝膠電泳質(zhì)譜分析,應(yīng)用基質(zhì)輔助激光解吸電離/飛行時(shí)間質(zhì)譜(MA...
【文章來(lái)源】:北京中醫(yī)藥大學(xué)北京市 211工程院校 教育部直屬院校
【文章頁(yè)數(shù)】:88 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
9-1和9-2CSF-81回目:Cy2-green4回目:Cy5-red
左上的部分顯示為凝膠中被相互匹配了點(diǎn)蛋白質(zhì)點(diǎn)。以 1.1 倍蛋白濃度變化為基準(zhǔn),治療前(左)與治療后(右)蛋白質(zhì)濃度減。ㄗ兓笥1.1 倍)的點(diǎn)由紅色框表示;濃度增加(變化大于 1.1 倍)的點(diǎn)由藍(lán)色框表示;而蛋白質(zhì)的濃度變化范圍在 0.9-1.1 倍之間的點(diǎn)被視為濃度不變,由綠色框表示。右上的曲線圖綜合顯示出凝膠上所有點(diǎn)的變化情況。橫軸表明所有蛋白質(zhì)點(diǎn)濃度的變化狀況:0 點(diǎn)區(qū)為不變區(qū);-1 區(qū)為濃度減小的點(diǎn);1 區(qū)為濃度增大的點(diǎn)。縱軸表示該變化點(diǎn)的程度:離橫軸越遠(yuǎn),說(shuō)明該點(diǎn)的濃度變化越大。左下的部分顯示選中點(diǎn)的三維立體圖片,可任意方向旋轉(zhuǎn) 360°以便觀察。右下的部分以數(shù)字格式顯示所有點(diǎn)的信息。包括被自動(dòng)匹配了點(diǎn)的編號(hào),變化狀況,變化倍數(shù),峰高值,體積值等。分析處理結(jié)果Decrease Increase在凝膠電泳圖譜 2500 個(gè)蛋白質(zhì)點(diǎn)中,以體積變化為對(duì)象,統(tǒng)計(jì)得出,變化率(n=8)在 75%-100%,及 50%-75%的蛋白質(zhì)點(diǎn)數(shù)。如表 9、圖 12-1 和圖12-2 所示:表 9:差異100-75% 75-50% 100-75% 75-50%Number total106(4.4%) 248(9.9%) 13(0.5%) 132(5.3%)
58帶狀皰疹后疼痛治療前后蛋白質(zhì)組生物標(biāo)記特征研究將質(zhì)譜圖上單一同位素峰值 該點(diǎn)蛋白質(zhì)為Complementfactor B ,質(zhì)譜鑒定參數(shù)如表 10 ,鑒定結(jié)果截圖見(jiàn)圖 16 。該結(jié)果與文獻(xiàn)Electrophoresis 2004,25,2569所鑒定出的結(jié)果相一致。表10:質(zhì)譜鑒定參數(shù)NO. Name Mr PI Score Sequence Coverage Matched,輸入data base比較,鑒定A Complement factor B 86819 6.55 99 24% 20圖16:質(zhì)譜鑒定結(jié)果
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]胱抑蛋白C在腰椎間盤(pán)突出癥患者腦脊液中的改變 可否作為神經(jīng)源性疼痛的標(biāo)志物?[J]. 劉旭東,曾炳芳. 中國(guó)臨床康復(fù). 2005(41)
[2]腦下垂體阻滯術(shù)治療復(fù)雜性區(qū)域疼痛綜合征5例[J]. 柴玫,嚴(yán)相默. 延邊大學(xué)醫(yī)學(xué)學(xué)報(bào). 2005(01)
[3]蛋白質(zhì)組雙向電泳技術(shù)研究進(jìn)展[J]. 杜鵬,馮偉華,郭俊生. 衛(wèi)生研究. 2005(02)
[4]帶狀皰疹后遺神經(jīng)痛的特征及其預(yù)防[J]. 黃冰,孔杰,陸雅萍,孫磊,孫建良,侯健. 中國(guó)臨床康復(fù). 2005(06)
[5]蛋白質(zhì)組學(xué)研究方法[J]. 陳姍,劉志紅. 腎臟病與透析腎移植雜志. 2005(01)
[6]2-DE技術(shù)中疏水性和堿性蛋白質(zhì)的研究進(jìn)展[J]. 曹晶,謝錦云,張麗軍,陳平,梁宋平. 生命科學(xué)研究. 2004(03)
[7]腦脊液免疫球蛋白的電泳和等電點(diǎn)聚焦分析(講座)[J]. 喬立艷,許賢豪,王紅,張華,國(guó)紅,殷劍,耿瑩,魏雪飛,文詩(shī)廣,侯世芳,劉江紅,矯毓娟. 中國(guó)神經(jīng)免疫學(xué)和神經(jīng)病學(xué)雜志. 2002(04)
[8]帶狀皰疹后神經(jīng)痛[J]. 比嘉和夫,曲成業(yè). 日本醫(yī)學(xué)介紹. 2001(09)
[9]腰椎間盤(pán)突出癥病人血漿、腦脊液中β-內(nèi)啡肽含量的比較[J]. 肖曉山,陳造宏,李明友,劉瑛,周代偉,徐斌暉,劉志云. 中華麻醉學(xué)雜志. 2001(06)
本文編號(hào):2899929
【文章來(lái)源】:北京中醫(yī)藥大學(xué)北京市 211工程院校 教育部直屬院校
【文章頁(yè)數(shù)】:88 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
9-1和9-2CSF-81回目:Cy2-green4回目:Cy5-red
左上的部分顯示為凝膠中被相互匹配了點(diǎn)蛋白質(zhì)點(diǎn)。以 1.1 倍蛋白濃度變化為基準(zhǔn),治療前(左)與治療后(右)蛋白質(zhì)濃度減。ㄗ兓笥1.1 倍)的點(diǎn)由紅色框表示;濃度增加(變化大于 1.1 倍)的點(diǎn)由藍(lán)色框表示;而蛋白質(zhì)的濃度變化范圍在 0.9-1.1 倍之間的點(diǎn)被視為濃度不變,由綠色框表示。右上的曲線圖綜合顯示出凝膠上所有點(diǎn)的變化情況。橫軸表明所有蛋白質(zhì)點(diǎn)濃度的變化狀況:0 點(diǎn)區(qū)為不變區(qū);-1 區(qū)為濃度減小的點(diǎn);1 區(qū)為濃度增大的點(diǎn)。縱軸表示該變化點(diǎn)的程度:離橫軸越遠(yuǎn),說(shuō)明該點(diǎn)的濃度變化越大。左下的部分顯示選中點(diǎn)的三維立體圖片,可任意方向旋轉(zhuǎn) 360°以便觀察。右下的部分以數(shù)字格式顯示所有點(diǎn)的信息。包括被自動(dòng)匹配了點(diǎn)的編號(hào),變化狀況,變化倍數(shù),峰高值,體積值等。分析處理結(jié)果Decrease Increase在凝膠電泳圖譜 2500 個(gè)蛋白質(zhì)點(diǎn)中,以體積變化為對(duì)象,統(tǒng)計(jì)得出,變化率(n=8)在 75%-100%,及 50%-75%的蛋白質(zhì)點(diǎn)數(shù)。如表 9、圖 12-1 和圖12-2 所示:表 9:差異100-75% 75-50% 100-75% 75-50%Number total106(4.4%) 248(9.9%) 13(0.5%) 132(5.3%)
58帶狀皰疹后疼痛治療前后蛋白質(zhì)組生物標(biāo)記特征研究將質(zhì)譜圖上單一同位素峰值 該點(diǎn)蛋白質(zhì)為Complementfactor B ,質(zhì)譜鑒定參數(shù)如表 10 ,鑒定結(jié)果截圖見(jiàn)圖 16 。該結(jié)果與文獻(xiàn)Electrophoresis 2004,25,2569所鑒定出的結(jié)果相一致。表10:質(zhì)譜鑒定參數(shù)NO. Name Mr PI Score Sequence Coverage Matched,輸入data base比較,鑒定A Complement factor B 86819 6.55 99 24% 20圖16:質(zhì)譜鑒定結(jié)果
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]胱抑蛋白C在腰椎間盤(pán)突出癥患者腦脊液中的改變 可否作為神經(jīng)源性疼痛的標(biāo)志物?[J]. 劉旭東,曾炳芳. 中國(guó)臨床康復(fù). 2005(41)
[2]腦下垂體阻滯術(shù)治療復(fù)雜性區(qū)域疼痛綜合征5例[J]. 柴玫,嚴(yán)相默. 延邊大學(xué)醫(yī)學(xué)學(xué)報(bào). 2005(01)
[3]蛋白質(zhì)組雙向電泳技術(shù)研究進(jìn)展[J]. 杜鵬,馮偉華,郭俊生. 衛(wèi)生研究. 2005(02)
[4]帶狀皰疹后遺神經(jīng)痛的特征及其預(yù)防[J]. 黃冰,孔杰,陸雅萍,孫磊,孫建良,侯健. 中國(guó)臨床康復(fù). 2005(06)
[5]蛋白質(zhì)組學(xué)研究方法[J]. 陳姍,劉志紅. 腎臟病與透析腎移植雜志. 2005(01)
[6]2-DE技術(shù)中疏水性和堿性蛋白質(zhì)的研究進(jìn)展[J]. 曹晶,謝錦云,張麗軍,陳平,梁宋平. 生命科學(xué)研究. 2004(03)
[7]腦脊液免疫球蛋白的電泳和等電點(diǎn)聚焦分析(講座)[J]. 喬立艷,許賢豪,王紅,張華,國(guó)紅,殷劍,耿瑩,魏雪飛,文詩(shī)廣,侯世芳,劉江紅,矯毓娟. 中國(guó)神經(jīng)免疫學(xué)和神經(jīng)病學(xué)雜志. 2002(04)
[8]帶狀皰疹后神經(jīng)痛[J]. 比嘉和夫,曲成業(yè). 日本醫(yī)學(xué)介紹. 2001(09)
[9]腰椎間盤(pán)突出癥病人血漿、腦脊液中β-內(nèi)啡肽含量的比較[J]. 肖曉山,陳造宏,李明友,劉瑛,周代偉,徐斌暉,劉志云. 中華麻醉學(xué)雜志. 2001(06)
本文編號(hào):2899929
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