蛋白質組學是在后基因組時代出現(xiàn)的一個新興的研究領域,它的主要任務是識別鑒定細胞、組織或機體的全部蛋白質。主要應用領域是醫(yī)藥市場和疾病的機理研究。帶狀皰疹后疼痛的確切機理目前尚不明確,蛋白質組學的發(fā)展使人們有了新的認識工具。本研究是治療帶狀皰疹后疼痛中藥“復元鎮(zhèn)痛湯”研究的一部分,隸屬于國家教育部重大項目——“中藥復方功能主治與其藥效物質基礎的相關性研究”課題（課題編號00176）。1研究目的本研究通過熒光標記和雙向電泳的方法考查帶狀皰疹后疼痛患者治療前后CSF蛋白質表達的差異,探討用蛋白質組學方法解釋PHN發(fā)病機理的可行性,為最終能夠找到該病的疾病特異性蛋白DSPs作準備,為中藥的信息物質鑒定和藥效組分生物篩選奠定基礎。2研究內容和方法2.1 Ettan 2-D Quant定量試劑盒進行總蛋白含量測定;2.2分析型凝膠的樣品CyDyeTM DIGE熒光標記。應用CyDyeTM DIGE熒光標記的雙向凝膠電泳,分離并分析帶狀皰疹患者治療前后CSF的蛋白質表達差異。通過熒光掃描及差異分析確定表達量差異顯著的蛋白質點;2.3制備型凝膠電泳質譜分析,應用基質輔助激光解吸電離/飛行時間質譜（MA... 

【文章來源】：北京中醫(yī)藥大學北京市 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：88 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

9-1和9-2CSF-81回目:Cy2-green4回目:Cy5-red

左上的部分顯示為凝膠中被相互匹配了點蛋白質點。以 1.1 倍蛋白濃度變化為基準，治療前（左）與治療后（右）蛋白質濃度減�。ㄗ兓笥�1.1 倍）的點由紅色框表示；濃度增加（變化大于 1.1 倍）的點由藍色框表示；而蛋白質的濃度變化范圍在 0.9-1.1 倍之間的點被視為濃度不變，由綠色框表示。右上的曲線圖綜合顯示出凝膠上所有點的變化情況。橫軸表明所有蛋白質點濃度的變化狀況：0 點區(qū)為不變區(qū)；-1 區(qū)為濃度減小的點；1 區(qū)為濃度增大的點�？v軸表示該變化點的程度：離橫軸越遠，說明該點的濃度變化越大。左下的部分顯示選中點的三維立體圖片，可任意方向旋轉 360°以便觀察。右下的部分以數(shù)字格式顯示所有點的信息。包括被自動匹配了點的編號，變化狀況，變化倍數(shù)，峰高值，體積值等。分析處理結果Decrease Increase在凝膠電泳圖譜 2500 個蛋白質點中，以體積變化為對象，統(tǒng)計得出，變化率（n＝8）在 75％－100％，及 50％－75％的蛋白質點數(shù)。如表 9、圖 12-1 和圖12-2 所示：表 9：差異100-75% 75-50% 100-75% 75-50%Number total106(4.4%) 248(9.9%) 13(0.5%) 132(5.3%)

58帶狀皰疹后疼痛治療前后蛋白質組生物標記特征研究將質譜圖上單一同位素峰值 該點蛋白質為Complementfactor B ，質譜鑒定參數(shù)如表 10 ，鑒定結果截圖見圖 16 。該結果與文獻Electrophoresis 2004，25，2569所鑒定出的結果相一致。表10：質譜鑒定參數(shù)NO. Name Mr PI Score Sequence Coverage Matched，輸入data base比較，鑒定A Complement factor B 86819 6.55 99 24% 20圖16：質譜鑒定結果

【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：2899929