銀屑病是皮膚病中常見的易復(fù)發(fā)的由免疫細(xì)胞介導(dǎo)的慢性炎癥性皮膚病,在全球發(fā)病率約為2%-3%。主要的癥狀表現(xiàn)為表皮過度增殖、角化不全、真皮血管周圍大量免疫細(xì)胞浸潤(rùn)。銀屑病是角質(zhì)形成細(xì)胞和失調(diào)的免疫細(xì)胞共同作用的結(jié)果。目前認(rèn)為銀屑病的發(fā)病機(jī)制主要是由T細(xì)胞介導(dǎo)的以KC為靶點(diǎn)的免疫應(yīng)答反應(yīng)。Th22細(xì)胞是新發(fā)現(xiàn)的T細(xì)胞亞群,其功能主要通過IL-22實(shí)現(xiàn)。有研究表明,在銀屑病病人中,血漿中IL-22和銀屑病的嚴(yán)重程度呈明顯的正相關(guān)。我們的前期研究表明肝素結(jié)合表皮生長(zhǎng)因子樣生長(zhǎng)因子(heparin-binding epidermal-growth-factor-like growth factor, HB-EGF)在銀屑病表皮KC異常增殖和其轉(zhuǎn)歸中發(fā)揮重要作用。因此,我們推測(cè)Th22細(xì)胞及IL-22可能干擾KC分泌HB-EGF,進(jìn)而參與銀屑病表皮異常增殖的發(fā)生、發(fā)展。本實(shí)驗(yàn)研究IL-22對(duì)HaCaT細(xì)胞功能和HaCaT細(xì)胞中HB-EGF表達(dá)的影響對(duì)揭示銀屑病表皮異常增殖的發(fā)病機(jī)制具有重要意義。 目的：本文研究白介素22(Interleukin-22, IL-22)及IL-22siRNA對(duì)HaCaT細(xì)胞增殖、凋亡及分泌HB-EGF的影響。 方法：以不同濃度(12.5μg/L、25μg/L、50μg/L、100μg/L、200μg/L)IL-22和IL-22siRNA作用于HaCaT細(xì)胞,用MTT法檢測(cè)對(duì)細(xì)胞增殖的影響；用流式細(xì)胞術(shù)分析對(duì)細(xì)胞凋亡的影響；用免疫組化法、Western blot法、ELISA法和實(shí)時(shí)熒光定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)法檢測(cè)對(duì)HaCaT細(xì)胞分泌HB-EGF的影響。應(yīng)用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理,差異有顯著性標(biāo)準(zhǔn)為P0.05。 結(jié)果：1、IL-22促HaCaT細(xì)胞增殖作用的強(qiáng)度與其濃度有關(guān)：不同濃度IL-22處理組的細(xì)胞增殖率均高于對(duì)照組,當(dāng)IL-22濃度低于100μg/L時(shí),其促HaCaT細(xì)胞增殖作用隨著濃度的升高而增強(qiáng),但當(dāng)IL-22濃度高于100μg/L時(shí)其促HaCaT細(xì)胞增殖作用減弱。IL-22siRNA處理組細(xì)胞增殖率較對(duì)照組低。 2、IL-22抑制HaCaT細(xì)胞凋亡作用的強(qiáng)度與其濃度有關(guān)：不同濃度IL-22處理組的細(xì)胞早期凋亡率和晚期凋亡率均較對(duì)照組低,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。當(dāng)IL-22濃度低于100μg/L時(shí),其抑制HaCaT細(xì)胞凋亡作用隨著濃度的升高而增強(qiáng),但當(dāng)IL-22濃度高于100μg/L時(shí)其抑制HaCaT細(xì)胞凋亡作用減弱。IL-22siRNA處理組細(xì)胞早期和晚期凋亡率均高于對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 3、IL-22促HaCaT細(xì)胞分泌HB-EGF的作用的強(qiáng)度與其濃度有關(guān)：不同濃度IL-22處理組的細(xì)胞分泌HB-EGF的量均高于對(duì)照組,且隨著IL-22濃度的升高,其促HB-EGF分泌作用逐漸增強(qiáng)。ⅠL-22siRNA處理組HB-EGF分泌量較對(duì)照組低。 結(jié)論：IL-22可促進(jìn)HaCaT細(xì)胞增殖并抑制其凋亡,且可促進(jìn)HaCaT細(xì)胞分泌HB-EGF。IL-22siRNA可抑制HaCaT細(xì)胞增殖并促進(jìn)其凋亡,且可抑制HaCaT細(xì)胞分泌HB-EGF。HaCaT細(xì)胞分泌HB-EGF增加可能是IL-22促進(jìn)HaCaT增殖、抑制凋亡的原因之一。
【學(xué)位單位】：天津醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2014
【中圖分類】：R758.63
【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
縮略語(yǔ)/符號(hào)說明
前言
    研究現(xiàn)狀、成果
    研究目的、方法
一、IL-22及IL-22 siRNA對(duì)HaCaT細(xì)胞增殖、凋亡的影響
    1.1 對(duì)象和方法
        1.1.1 材料
        1.1.2 方法
        1.1.3 統(tǒng)計(jì)方法
    1.2 結(jié)果
        1.2.1 HaCaT細(xì)胞培養(yǎng)
        1.2.2 IL-22對(duì)HaCaT細(xì)胞增殖的影響
        1.2.3 IL-22 siRNA對(duì)HaCaT細(xì)胞增殖的影響
        1.2.4 IL-22對(duì)HaCaT細(xì)胞凋亡的影響
        1.2.5 IL-22 siRNA對(duì)HaCaT細(xì)胞凋亡的影響
    1.3 討論
        1.3.1 檢測(cè)HaCaT細(xì)胞增殖、凋亡方法的選擇
        1.3.2 IL-22或IL-22 siRNA對(duì)HaCaT細(xì)胞增殖、凋亡的影響
    1.4 小結(jié)
二、IL-22及IL-22 siRNA對(duì)HaCaT細(xì)胞分泌HB-EGF的影響
    2.1 對(duì)象和方法
        2.1.1 材料
        2.1.2 方法
        2.1.3 統(tǒng)計(jì)方法
    2.2 結(jié)果
        2.2.1 IHC檢測(cè)IL-22對(duì)HaCaT細(xì)胞分泌HB-EGF的影響
        2.2.2 IHC檢測(cè)IL-22 siRNA對(duì)HaCaT細(xì)胞分泌HB-EGF的影響
        2.2.3 WB檢測(cè)IL-22對(duì)HaCaT細(xì)胞分泌HB-EGF的影響
        2.2.4 WB檢測(cè)IL-22 siRNA對(duì)HaCaT細(xì)胞分泌HB-EGF的影響
        2.2.5 ELISA法檢測(cè)IL-22或IL-22 siRNA對(duì)HaCaT細(xì)胞HB-EGF蛋白濃度與總蛋白濃度比值的影響
        2.2.6 實(shí)施熒光定量RT-PCR檢測(cè)IL-22及IL-22 siRNA對(duì)HaCaT細(xì)胞HB-EGF mRNA表達(dá)的影響
    2.3 討論
        2.3.1 不同方法檢測(cè)IL-22及IL-22 siRNA對(duì)HaCaT細(xì)胞分泌HB-EGF的影響
        2.3.2 存在的缺陷和今后的研究方向
    2.4 小結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
發(fā)表論文和參加科研情況說明
綜述
    Th22及IL-22在銀屑病中的研究進(jìn)展
        綜述參考文獻(xiàn)
    銀屑病的研究進(jìn)展
        綜述參考文獻(xiàn)
致謝

【引證文獻(xiàn)】

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前1條

1 劉欣欣;IL-22對(duì)角質(zhì)形成細(xì)胞表達(dá)HB-EGF及TIG3作用機(jī)制的研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2015年

本文編號(hào)：2861029