[研究背景] 血管內(nèi)皮生長因子(Vascular endothelial growth factor，VEGF)家族是目前研究較深入的血管生長因子家族，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)的成員包括VEGF-A、VEGF-B、VEGF-C、VEGF-D、VEGF-E和P1GF(placenta growth factor，胎盤生長因子)。VEGF-A，又稱VEGF，是其中最主要的成員。VEGF在基因轉(zhuǎn)錄過程中由于不同的剪接方式形成幾種分子量不同的VEGF同種異構(gòu)體，在人類主要為VEGF_(121)、VEGF_(145)、VEGF_(165)、VEGF_(189)、VEGF_(206)等。 VEGF家族成員通過血管內(nèi)皮細(xì)胞特異性的VEGF受體(VEGF receptor，VEGFR)介導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞增殖、微血管增生及增強(qiáng)血管通透性。目前已經(jīng)發(fā)現(xiàn)的VEGF受體家族可分為兩大類：酪氨酸激酶受體和非酪氨酸激酶受體，其中前者包括VEGFR-1，VEGFR-2，VEGFR-3，后者包括neuropilin-1(NRP-1)，neuropilin-2(NRP-2)。VEGF對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞的增殖、分化作用主要是由VEGFR-2介導(dǎo)的。近年來，越來越多的研究發(fā)現(xiàn)VEGFR家族不僅表達(dá)在血管內(nèi)皮細(xì)胞上，而且在一些非血管內(nèi)皮細(xì)胞上也有表達(dá)，包括某些腫瘤細(xì)胞、造血干細(xì)胞、神經(jīng)元細(xì)胞、血管平滑肌細(xì)胞、視網(wǎng)膜上皮細(xì)胞、黑素細(xì)胞等。我們實(shí)驗(yàn)室曾經(jīng)用免疫組化的方法發(fā)現(xiàn)在正常人的皮膚角質(zhì)形成細(xì)胞、毛囊細(xì)胞及皮脂腺細(xì)胞均有VEGFR-1、VEGFR-2的表達(dá)，而在銀屑病的角質(zhì)形成細(xì)胞表達(dá)VEGFR-1、VEGFR-2更明顯。而腫瘤的血管生成是促進(jìn)腫瘤生長和轉(zhuǎn)移的重要機(jī)制，作為最重要的促血管生長因子及受體，VEGF、VEGFR與皮膚腫瘤血管生成的關(guān)系越來越受到關(guān)注。Lin EY等在惡性黑色素瘤腫瘤細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)有VEGFR-2的表達(dá)。但目前尚無有關(guān)VEGFR-2在皮膚基底細(xì)胞癌(Basal cell carcinomas，BCC)組織中表達(dá)的研究。證實(shí)VEGFR-2在BCC中的表達(dá)情況有助于進(jìn)一步研究VEGF及其受體在BCC中表達(dá)的生物學(xué)意義。 [目的] 研究血管內(nèi)皮生長因子受體-2在皮膚基底細(xì)胞癌組織中的表達(dá)情況及意義。 [材料與方法] 本研究搜集7例經(jīng)臨床與病理檢查確診的BCC組織標(biāo)本，對(duì)照皮膚組織標(biāo)本來源于我科手術(shù)切除的正常人皮膚。提取BCC組織的mRNA，以RT-PCR法檢測標(biāo)本中VEGFR-2 mRNA的表達(dá)。同時(shí)應(yīng)用Western-blot方法檢測VEGFR-2蛋白質(zhì)的表達(dá)，免疫熒光法檢測VEGFR-2在BCC組織中的定位。 [結(jié)果] 一、RT-PCR：VEGFR-2 mRNA在正常對(duì)照和BCC組織標(biāo)本中均有表達(dá)，但VEGFR-2在BCC表達(dá)明顯高于正常對(duì)照皮膚中的表達(dá)，二者相比具有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.001)。 二、Western-blot：在蛋白質(zhì)水平，VEGFR-2在BCC組織中的表達(dá)明顯高于其在正常表皮的表達(dá)，與mRNA結(jié)果一致。 三、免疫熒光：免疫熒光檢查發(fā)現(xiàn)VEGFR-2在BCC腫瘤組織及除角質(zhì)層外的表皮全層中大量表達(dá)，而在正常表皮VEGFR-2表達(dá)以基底細(xì)胞層和鄰近基底細(xì)胞層的棘細(xì)胞層為主，角質(zhì)層亦不表達(dá)。VEGFR-2在BCC細(xì)胞主要表達(dá)在細(xì)胞膜上。 [結(jié)論] 皮膚BCC組織細(xì)胞能夠高度異常表達(dá)VEGFR-2，可能是導(dǎo)致BCC細(xì)胞腫瘤性增殖的原因之一。
【學(xué)位單位】：浙江大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2007
【中圖分類】：R739.5
【部分圖文】：

浙江大學(xué)碩士學(xué)位論文要為VEGF，21、VEGF145、VEGF，65、VEGF189、VEGFZo6等。這幾種類型的異構(gòu)具有相同的生物學(xué)活性，在大多數(shù)情況下，vEGF165表達(dá)最常見，與vEGF:21、VEGF145同為可溶性分泌蛋白，另外兩種VEGF189、VEGF206則僅于細(xì)胞表面的白多糖結(jié)合形式存在【”’‘4](圖1)。

圖5VEGFR一2在BCC中W七sternBlot結(jié)果，VEGFR一2表達(dá)為18OKD條帶。l道為正常表皮，2一8道為BCC組織標(biāo)本。三、免疫熒光:免疫熒光檢查發(fā)現(xiàn)VEGFR一2在BCC腫瘤組織及除角質(zhì)層外的表皮全層中大量表達(dá)(圖6B，6C)，而在正常表皮VEGFR一2表達(dá)以基底細(xì)胞層和鄰近基底細(xì)胞層的棘細(xì)胞層為主，角質(zhì)層亦不表達(dá)(圖6A)。真皮乳頭層血管內(nèi)皮細(xì)胞VEGFR一2表達(dá)作為陽性對(duì)照(圖6A，6B)。VEGFR一2在BCC細(xì)胞和角質(zhì)形成細(xì)胞主要為膜性分布。

D圖6免疫熒光顯示VEGFR一2在正常表皮和BCC組織標(biāo)本中的表達(dá)。A:正常表尺:50腳);B:低倍鏡下一典型BCC組織(標(biāo)尺:50阿);C:B圖放大后照片(標(biāo)尺:20D:小鼠IgGI代替一抗作為陰性對(duì)照(標(biāo)尺:50陰)。綠色熒光提示VEGFR一2在組織中的表達(dá)，紅色熒光為Pl細(xì)胞核染色。討論.VEGF是胚胎期血管形成，促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞增殖，促血管形成和毛細(xì)管通透性升高的重要調(diào)節(jié)因子。VEGF的主要生物學(xué)效應(yīng)為:VE過肝素樣分子的調(diào)節(jié)，與血管內(nèi)皮細(xì)胞膜上的VEGF的受體結(jié)合后受體的自身磷酸化，激活絲裂原活化的蛋白激酶，實(shí)現(xiàn)VEGF的絲

【引證文獻(xiàn)】

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前1條

1 高磊;VEGF121和VEGF165對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞通透性影響的研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2011年

本文編號(hào)：2818329