[研究背景] 血管內皮生長因子(Vascular endothelial growth factor，VEGF)家族是目前研究較深入的血管生長因子家族，已經發(fā)現的成員包括VEGF-A、VEGF-B、VEGF-C、VEGF-D、VEGF-E和P1GF(placenta growth factor，胎盤生長因子)。VEGF-A，又稱VEGF，是其中最主要的成員。VEGF在基因轉錄過程中由于不同的剪接方式形成幾種分子量不同的VEGF同種異構體，在人類主要為VEGF_(121)、VEGF_(145)、VEGF_(165)、VEGF_(189)、VEGF_(206)等。 VEGF家族成員通過血管內皮細胞特異性的VEGF受體(VEGF receptor，VEGFR)介導內皮細胞增殖、微血管增生及增強血管通透性。目前已經發(fā)現的VEGF受體家族可分為兩大類：酪氨酸激酶受體和非酪氨酸激酶受體，其中前者包括VEGFR-1，VEGFR-2，VEGFR-3，后者包括neuropilin-1(NRP-1)，neuropilin-2(NRP-2)。VEGF對內皮細胞的增殖、分化作用主要是由VEGFR-2介導的。近年來，越來越多的研究發(fā)現VEGFR家族不僅表達在血管內皮細胞上，而且在一些非血管內皮細胞上也有表達，包括某些腫瘤細胞、造血干細胞、神經元細胞、血管平滑肌細胞、視網膜上皮細胞、黑素細胞等。我們實驗室曾經用免疫組化的方法發(fā)現在正常人的皮膚角質形成細胞、毛囊細胞及皮脂腺細胞均有VEGFR-1、VEGFR-2的表達，而在銀屑病的角質形成細胞表達VEGFR-1、VEGFR-2更明顯。而腫瘤的血管生成是促進腫瘤生長和轉移的重要機制，作為最重要的促血管生長因子及受體，VEGF、VEGFR與皮膚腫瘤血管生成的關系越來越受到關注。Lin EY等在惡性黑色素瘤腫瘤細胞中發(fā)現有VEGFR-2的表達。但目前尚無有關VEGFR-2在皮膚基底細胞癌(Basal cell carcinomas，BCC)組織中表達的研究。證實VEGFR-2在BCC中的表達情況有助于進一步研究VEGF及其受體在BCC中表達的生物學意義。 [目的] 研究血管內皮生長因子受體-2在皮膚基底細胞癌組織中的表達情況及意義。 [材料與方法] 本研究搜集7例經臨床與病理檢查確診的BCC組織標本，對照皮膚組織標本來源于我科手術切除的正常人皮膚。提取BCC組織的mRNA，以RT-PCR法檢測標本中VEGFR-2 mRNA的表達。同時應用Western-blot方法檢測VEGFR-2蛋白質的表達，免疫熒光法檢測VEGFR-2在BCC組織中的定位。 [結果] 一、RT-PCR：VEGFR-2 mRNA在正常對照和BCC組織標本中均有表達，但VEGFR-2在BCC表達明顯高于正常對照皮膚中的表達，二者相比具有顯著的統(tǒng)計學意義(P＜0.001)。 二、Western-blot：在蛋白質水平，VEGFR-2在BCC組織中的表達明顯高于其在正常表皮的表達，與mRNA結果一致。 三、免疫熒光：免疫熒光檢查發(fā)現VEGFR-2在BCC腫瘤組織及除角質層外的表皮全層中大量表達，而在正常表皮VEGFR-2表達以基底細胞層和鄰近基底細胞層的棘細胞層為主，角質層亦不表達。VEGFR-2在BCC細胞主要表達在細胞膜上。 [結論] 皮膚BCC組織細胞能夠高度異常表達VEGFR-2，可能是導致BCC細胞腫瘤性增殖的原因之一。
【學位單位】：浙江大學
【學位級別】：碩士
【學位年份】：2007
【中圖分類】：R739.5
【部分圖文】：

浙江大學碩士學位論文要為VEGF，21、VEGF145、VEGF，65、VEGF189、VEGFZo6等。這幾種類型的異構具有相同的生物學活性，在大多數情況下，vEGF165表達最常見，與vEGF:21、VEGF145同為可溶性分泌蛋白，另外兩種VEGF189、VEGF206則僅于細胞表面的白多糖結合形式存在【”’‘4](圖1)。

圖5VEGFR一2在BCC中W七sternBlot結果，VEGFR一2表達為18OKD條帶。l道為正常表皮，2一8道為BCC組織標本。三、免疫熒光:免疫熒光檢查發(fā)現VEGFR一2在BCC腫瘤組織及除角質層外的表皮全層中大量表達(圖6B，6C)，而在正常表皮VEGFR一2表達以基底細胞層和鄰近基底細胞層的棘細胞層為主，角質層亦不表達(圖6A)。真皮乳頭層血管內皮細胞VEGFR一2表達作為陽性對照(圖6A，6B)。VEGFR一2在BCC細胞和角質形成細胞主要為膜性分布。

D圖6免疫熒光顯示VEGFR一2在正常表皮和BCC組織標本中的表達。A:正常表尺:50腳);B:低倍鏡下一典型BCC組織(標尺:50阿);C:B圖放大后照片(標尺:20D:小鼠IgGI代替一抗作為陰性對照(標尺:50陰)。綠色熒光提示VEGFR一2在組織中的表達，紅色熒光為Pl細胞核染色。討論.VEGF是胚胎期血管形成，促進內皮細胞增殖，促血管形成和毛細管通透性升高的重要調節(jié)因子。VEGF的主要生物學效應為:VE過肝素樣分子的調節(jié)，與血管內皮細胞膜上的VEGF的受體結合后受體的自身磷酸化，激活絲裂原活化的蛋白激酶，實現VEGF的絲

【引證文獻】

相關碩士學位論文 前1條

1 高磊;VEGF121和VEGF165對血管內皮細胞通透性影響的研究[D];河北醫(yī)科大學;2011年

本文編號：2818329