本文關(guān)鍵詞：尋常型銀屑病患者外周血中Th22細(xì)胞及血清中IL-22的表達(dá)，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的：銀屑�。╬soriasis）是一種常見(jiàn)的慢性、復(fù)發(fā)性、炎癥性皮膚病。特征皮損為：在大小不等，邊界清晰的紅色、圓形、干燥性斑塊上覆蓋疊瓦狀或板層狀銀白色鱗屑[1]。好發(fā)于頭皮、指（趾）甲、四肢伸側(cè)、肘膝等部位�？梢�(jiàn)于任何年齡，男女發(fā)病無(wú)顯著差異，常在青壯年時(shí)發(fā)病。銀屑病在我國(guó)的患病率，近年尚無(wú)大規(guī)模的調(diào)查結(jié)果。誘發(fā)因素及發(fā)病機(jī)制至今尚不完全清楚，多認(rèn)為該銀屑病的發(fā)生與T淋巴細(xì)胞，特別是Th1細(xì)胞的過(guò)度活化及功能異常有關(guān)[2]，是一種自身免疫性疾病。 Th22細(xì)胞特征性產(chǎn)生白介素22(interleukin22，IL-22)，不分泌IL-17和IFN-γ。Stefanie Eyerich等運(yùn)用免疫病理學(xué)等多種方法證明Th22細(xì)胞是獨(dú)特的人類T細(xì)胞亞型，，參與表皮免疫與重塑[3]。Th22細(xì)胞首次發(fā)現(xiàn)于銀屑病皮損中，與銀屑病的發(fā)病機(jī)制密切相關(guān)。但血液中Th22細(xì)胞的數(shù)量及作用尚不清楚。IL-22主要作用于上皮細(xì)胞，調(diào)節(jié)皮膚角質(zhì)形成細(xì)胞的分化和上皮增生，在伴有顯著棘層增厚的炎癥性皮膚病中發(fā)揮至關(guān)重要的作用[4]。本實(shí)驗(yàn)應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)（Flow Cytometry，F(xiàn)CM）確認(rèn)并計(jì)數(shù)尋常型銀屑病患者外周血中Th22細(xì)胞（CD4+IL-22+T細(xì)胞）的表達(dá)比例，應(yīng)用雙抗體夾心ELISA方法定量檢測(cè)尋常型銀屑病患者血清中IL-22的表達(dá)量。評(píng)估Th22細(xì)胞及IL-22在尋常型銀屑病不同分期（進(jìn)展期和穩(wěn)定期）表達(dá)水平的差異，以及二者與銀屑病臨床皮損面積和嚴(yán)重程度指數(shù)（PASI）評(píng)分值之間的關(guān)系。初步探索Th22細(xì)胞及其效應(yīng)因子IL-22在銀屑病發(fā)病及皮損維持中的作用。 方法：選擇2011年3月至2011年12月期間就診于河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院皮膚科門診的尋常型銀屑病患者為病例組。入選標(biāo)準(zhǔn)：1尋常型銀屑病患者皮損典型、診斷明確。2檢測(cè)前1月內(nèi)未接受對(duì)免疫功能有影響的藥物的系統(tǒng)性治療，如糖皮質(zhì)激素、免疫抑制劑等。3除外自身免疫性疾病及其它各種嚴(yán)重的慢性系統(tǒng)性疾病，如系統(tǒng)性紅斑狼瘡、糖尿病等。選擇本院健康醫(yī)護(hù)人員為健康對(duì)照組。病例組共23人，男12例，女11例，年齡19～53歲，平均年齡33.30±11.30歲。按銀屑病分期將病例組分為：進(jìn)展期組12例和穩(wěn)定期組11例。并由同一工作人員依據(jù)銀屑病臨床皮損面積和嚴(yán)重程度對(duì)病例組進(jìn)行PASI評(píng)分。健康對(duì)照組共11人，男5例，女6例，年齡20～52歲，平均年齡27.27±8.63歲，經(jīng)t檢驗(yàn)，性別、年齡與病例組無(wú)顯著差異。外周血Th22細(xì)胞的檢測(cè):采集病例組及健康對(duì)照組肘靜脈血4ml放入肝素鈉抗凝管中，8小時(shí)內(nèi)分離出外周血單個(gè)核細(xì)胞（PBMC），加入莫能霉素（Monensinsolution）、佛波醇-12-肉豆蔻酯-13-乙酯（Phorbol-12-myristate-13-acetate PMA)、離子霉素（Ionomycin）置于37℃，5%二氧化碳孵箱中刺激4小時(shí)，然后進(jìn)行細(xì)胞表面染色、固定、透化破膜及胞內(nèi)細(xì)胞因子染色，最后用流式細(xì)胞儀測(cè)定Th22細(xì)胞/淋巴細(xì)胞的百分比。血清中IL-22的檢測(cè):采集病例組及健康對(duì)照組肘靜脈血2ml放入EDTA抗凝管中，離心收集血清標(biāo)本置于-20℃的冰箱中保存。應(yīng)用雙抗體夾心ELISA法檢測(cè)收集到的所有病例組及健康對(duì)照組血清標(biāo)本中IL-22的表達(dá)水平。應(yīng)用SPSS13.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，經(jīng)正態(tài)性檢驗(yàn)，病例組和對(duì)照組，進(jìn)展期組和靜止期組的實(shí)驗(yàn)所得數(shù)據(jù)均呈正態(tài)分布，故實(shí)驗(yàn)結(jié)果用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差描述，采用兩個(gè)獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)進(jìn)行各組數(shù)據(jù)間的比較，分析外周血中Th22細(xì)胞及血清中IL-22的表達(dá)水平在病例組和對(duì)照組之間，進(jìn)展期組和靜止期組之間有無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。經(jīng)正態(tài)性檢驗(yàn)PASI評(píng)分值數(shù)據(jù)呈偏態(tài)分布，故采用非參數(shù)統(tǒng)計(jì)方法中的變量等級(jí)相關(guān)分析spearman法統(tǒng)計(jì)分析尋常型銀屑病患者外周血中Th22細(xì)胞及血清中IL-22表達(dá)水平與PASI評(píng)分值之間的關(guān)系。檢驗(yàn)水準(zhǔn)取P0.05有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)果： 1流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)結(jié)果（％）：外周血中Th22細(xì)胞表達(dá)百分比病例組1.90±1.73與健康對(duì)照組1.47±0.96相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=1.115P=0.273P＞0.05)；進(jìn)展期組2.30±1.63與靜止期組1.75±1.29相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=0.923P=0.367P＞0.05)；病例組外周血Th22細(xì)胞的表達(dá)水平與PASI評(píng)分值無(wú)直線相關(guān)關(guān)系(r=0.379P=0.074P＞0.05)。 2雙抗體夾心ELISA方法檢測(cè)結(jié)果（pg/ml）：血清中IL-22表達(dá)量病例組8.46±6.23高于健康對(duì)照組5.28±2.66，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=2.727P=0.01P0.05)；進(jìn)展期組8.75±4.58高于靜止期組6.35±2.46，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=-2.509P=0.023P0.05)；血清中IL-22表達(dá)水平與PASI評(píng)分值有正相關(guān)關(guān)系(r=0.415P=0.049P0.05)。 結(jié)論： 1尋常型銀屑病患者外周血Th22細(xì)胞百分比與健康對(duì)照組比較差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，進(jìn)展期組與穩(wěn)定期組比較差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。提示外周血Th22細(xì)胞表達(dá)百分比可能與尋常型銀屑病發(fā)病無(wú)直接相關(guān)性，與疾病發(fā)展和皮損維持亦無(wú)直接相關(guān)性。 2尋常型銀屑病患者外周血Th22細(xì)胞百分比與PASI評(píng)分值之間無(wú)相關(guān)關(guān)系。提示外周血Th22細(xì)胞百分比可能與銀屑病皮損面積及病情嚴(yán)重程度間無(wú)明確關(guān)聯(lián)，還不能將其作為反映評(píng)價(jià)疾病嚴(yán)重程度的指標(biāo)。 3尋常型銀屑病患者血清IL-22表達(dá)量高于正常對(duì)照組，進(jìn)展期組高于穩(wěn)定期組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。提示IL-22可能參與尋常型銀屑病的發(fā)病。血清中IL-22表達(dá)水平可能與尋常型銀屑病的炎癥發(fā)展和皮損維持密切相關(guān)。同時(shí)可能間接反映了Th22細(xì)胞在尋常型銀屑病中的作用。 4尋常型銀屑病患者血清中IL-22表達(dá)量與銀屑病PASI評(píng)分值之間呈正相關(guān)關(guān)系。提示PASI評(píng)分越高，血清中IL-22的表達(dá)水平越高。由此得出，血清中IL-22的表達(dá)水平可作為反映評(píng)價(jià)銀屑病嚴(yán)重程度的指標(biāo)。
【關(guān)鍵詞】：尋常型銀屑病 Th22細(xì)胞 IL-22 流式細(xì)胞術(shù) ELISA PASI評(píng)分
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2012
【分類號(hào)】：R758.63
【目錄】：

• 摘要4-7
• ABSTRACT7-11
• 前言11
• 材料與方法11-17
• 結(jié)果17-19
• 附圖19-24
• 附表24-26
• 討論26-32
• 結(jié)論32-33
• 參考文獻(xiàn)33-37
• 綜述 IL-22 的特征及 Th22 細(xì)胞的研究進(jìn)展37-47
• 參考文獻(xiàn)42-47
• 致謝47-48
• 個(gè)人簡(jiǎn)歷48

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