本文關(guān)鍵詞：尋常型銀屑病患者外周血中Th22細胞及血清中IL-22的表達，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的：銀屑�。╬soriasis）是一種常見的慢性、復(fù)發(fā)性、炎癥性皮膚病。特征皮損為：在大小不等，邊界清晰的紅色、圓形、干燥性斑塊上覆蓋疊瓦狀或板層狀銀白色鱗屑[1]。好發(fā)于頭皮、指（趾）甲、四肢伸側(cè)、肘膝等部位。可見于任何年齡，男女發(fā)病無顯著差異，常在青壯年時發(fā)病。銀屑病在我國的患病率，近年尚無大規(guī)模的調(diào)查結(jié)果。誘發(fā)因素及發(fā)病機制至今尚不完全清楚，多認為該銀屑病的發(fā)生與T淋巴細胞，特別是Th1細胞的過度活化及功能異常有關(guān)[2]，是一種自身免疫性疾病。 Th22細胞特征性產(chǎn)生白介素22(interleukin22，IL-22)，不分泌IL-17和IFN-γ。Stefanie Eyerich等運用免疫病理學(xué)等多種方法證明Th22細胞是獨特的人類T細胞亞型，，參與表皮免疫與重塑[3]。Th22細胞首次發(fā)現(xiàn)于銀屑病皮損中，與銀屑病的發(fā)病機制密切相關(guān)。但血液中Th22細胞的數(shù)量及作用尚不清楚。IL-22主要作用于上皮細胞，調(diào)節(jié)皮膚角質(zhì)形成細胞的分化和上皮增生，在伴有顯著棘層增厚的炎癥性皮膚病中發(fā)揮至關(guān)重要的作用[4]。本實驗應(yīng)用流式細胞術(shù)（Flow Cytometry，F(xiàn)CM）確認并計數(shù)尋常型銀屑病患者外周血中Th22細胞（CD4+IL-22+T細胞）的表達比例，應(yīng)用雙抗體夾心ELISA方法定量檢測尋常型銀屑病患者血清中IL-22的表達量。評估Th22細胞及IL-22在尋常型銀屑病不同分期（進展期和穩(wěn)定期）表達水平的差異，以及二者與銀屑病臨床皮損面積和嚴(yán)重程度指數(shù)（PASI）評分值之間的關(guān)系。初步探索Th22細胞及其效應(yīng)因子IL-22在銀屑病發(fā)病及皮損維持中的作用。 方法：選擇2011年3月至2011年12月期間就診于河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院皮膚科門診的尋常型銀屑病患者為病例組。入選標(biāo)準(zhǔn)：1尋常型銀屑病患者皮損典型、診斷明確。2檢測前1月內(nèi)未接受對免疫功能有影響的藥物的系統(tǒng)性治療，如糖皮質(zhì)激素、免疫抑制劑等。3除外自身免疫性疾病及其它各種嚴(yán)重的慢性系統(tǒng)性疾病，如系統(tǒng)性紅斑狼瘡、糖尿病等。選擇本院健康醫(yī)護人員為健康對照組。病例組共23人，男12例，女11例，年齡19～53歲，平均年齡33.30±11.30歲。按銀屑病分期將病例組分為：進展期組12例和穩(wěn)定期組11例。并由同一工作人員依據(jù)銀屑病臨床皮損面積和嚴(yán)重程度對病例組進行PASI評分。健康對照組共11人，男5例，女6例，年齡20～52歲，平均年齡27.27±8.63歲，經(jīng)t檢驗，性別、年齡與病例組無顯著差異。外周血Th22細胞的檢測:采集病例組及健康對照組肘靜脈血4ml放入肝素鈉抗凝管中，8小時內(nèi)分離出外周血單個核細胞（PBMC），加入莫能霉素（Monensinsolution）、佛波醇-12-肉豆蔻酯-13-乙酯（Phorbol-12-myristate-13-acetate PMA)、離子霉素（Ionomycin）置于37℃，5%二氧化碳孵箱中刺激4小時，然后進行細胞表面染色、固定、透化破膜及胞內(nèi)細胞因子染色，最后用流式細胞儀測定Th22細胞/淋巴細胞的百分比。血清中IL-22的檢測:采集病例組及健康對照組肘靜脈血2ml放入EDTA抗凝管中，離心收集血清標(biāo)本置于-20℃的冰箱中保存。應(yīng)用雙抗體夾心ELISA法檢測收集到的所有病例組及健康對照組血清標(biāo)本中IL-22的表達水平。應(yīng)用SPSS13.0軟件進行統(tǒng)計學(xué)分析，經(jīng)正態(tài)性檢驗，病例組和對照組，進展期組和靜止期組的實驗所得數(shù)據(jù)均呈正態(tài)分布，故實驗結(jié)果用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差描述，采用兩個獨立樣本t檢驗進行各組數(shù)據(jù)間的比較，分析外周血中Th22細胞及血清中IL-22的表達水平在病例組和對照組之間，進展期組和靜止期組之間有無統(tǒng)計學(xué)差異。經(jīng)正態(tài)性檢驗PASI評分值數(shù)據(jù)呈偏態(tài)分布，故采用非參數(shù)統(tǒng)計方法中的變量等級相關(guān)分析spearman法統(tǒng)計分析尋常型銀屑病患者外周血中Th22細胞及血清中IL-22表達水平與PASI評分值之間的關(guān)系。檢驗水準(zhǔn)取P0.05有統(tǒng)計學(xué)意義。 結(jié)果： 1流式細胞術(shù)檢測結(jié)果（％）：外周血中Th22細胞表達百分比病例組1.90±1.73與健康對照組1.47±0.96相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義(t=1.115P=0.273P＞0.05)；進展期組2.30±1.63與靜止期組1.75±1.29相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義(t=0.923P=0.367P＞0.05)；病例組外周血Th22細胞的表達水平與PASI評分值無直線相關(guān)關(guān)系(r=0.379P=0.074P＞0.05)。 2雙抗體夾心ELISA方法檢測結(jié)果（pg/ml）：血清中IL-22表達量病例組8.46±6.23高于健康對照組5.28±2.66，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(t=2.727P=0.01P0.05)；進展期組8.75±4.58高于靜止期組6.35±2.46，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(t=-2.509P=0.023P0.05)；血清中IL-22表達水平與PASI評分值有正相關(guān)關(guān)系(r=0.415P=0.049P0.05)。 結(jié)論： 1尋常型銀屑病患者外周血Th22細胞百分比與健康對照組比較差別無統(tǒng)計學(xué)意義，進展期組與穩(wěn)定期組比較差別無統(tǒng)計學(xué)意義。提示外周血Th22細胞表達百分比可能與尋常型銀屑病發(fā)病無直接相關(guān)性，與疾病發(fā)展和皮損維持亦無直接相關(guān)性。 2尋常型銀屑病患者外周血Th22細胞百分比與PASI評分值之間無相關(guān)關(guān)系。提示外周血Th22細胞百分比可能與銀屑病皮損面積及病情嚴(yán)重程度間無明確關(guān)聯(lián)，還不能將其作為反映評價疾病嚴(yán)重程度的指標(biāo)。 3尋常型銀屑病患者血清IL-22表達量高于正常對照組，進展期組高于穩(wěn)定期組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義。提示IL-22可能參與尋常型銀屑病的發(fā)病。血清中IL-22表達水平可能與尋常型銀屑病的炎癥發(fā)展和皮損維持密切相關(guān)。同時可能間接反映了Th22細胞在尋常型銀屑病中的作用。 4尋常型銀屑病患者血清中IL-22表達量與銀屑病PASI評分值之間呈正相關(guān)關(guān)系。提示PASI評分越高，血清中IL-22的表達水平越高。由此得出，血清中IL-22的表達水平可作為反映評價銀屑病嚴(yán)重程度的指標(biāo)。
【關(guān)鍵詞】：尋常型銀屑病 Th22細胞 IL-22 流式細胞術(shù) ELISA PASI評分
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2012
【分類號】：R758.63
【目錄】：

• 摘要4-7
• ABSTRACT7-11
• 前言11
• 材料與方法11-17
• 結(jié)果17-19
• 附圖19-24
• 附表24-26
• 討論26-32
• 結(jié)論32-33
• 參考文獻33-37
• 綜述 IL-22 的特征及 Th22 細胞的研究進展37-47
• 參考文獻42-47
• 致謝47-48
• 個人簡歷48

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