【摘要】：目的:在臨床治療及動物皮膚創(chuàng)傷缺損模型中應(yīng)用人工真皮(Artificial dermal template,ADT)覆蓋創(chuàng)面,觀察其誘導(dǎo)皮膚及皮膚附屬器再生修復(fù)的情況,并做進(jìn)一步研究。方法:動物模型選取300-350g的雄性SD(Sprague Dawley)大鼠,用打孔器在老鼠背部中間兩側(cè)的皮膚制作直徑1.5cm大小的圓形全層皮膚缺損模型,并用相同大小的醫(yī)用材料制成隔離環(huán)隔絕創(chuàng)面與周圍皮膚,隔離環(huán)留有一個邊長為4mm的開口以連接缺損創(chuàng)面和周圍皮膚,4-0Prolene線縫合固定隔離環(huán)與創(chuàng)緣皮膚,避免傷口快速收縮導(dǎo)致愈合。以ADT作為實驗組,硅膠膜(SF)為對照組覆蓋創(chuàng)面,對創(chuàng)面皮膚愈合情況進(jìn)行觀察,于術(shù)后不同階段對隔離環(huán)內(nèi)新生皮膚取材行蘇木精—伊紅染色(Hematoxylin-eosin staining,HE)、免疫熒光等檢測,分析皮膚及皮膚附屬器的再生情況。此外,我們通過Lgr5-EGFP-Ires-Cre ERT2/Rosa26-Lac Z轉(zhuǎn)基因小鼠進(jìn)行了皮膚再生過程中的細(xì)胞譜系追蹤研究。結(jié)果:術(shù)后30天,ADT組創(chuàng)面修復(fù)后出現(xiàn)毛發(fā)生長現(xiàn)象,而SF組未出現(xiàn)。且ADT愈合率高于SF組,P(ADT組,SF組)0.01,兩組間有顯著統(tǒng)計學(xué)差異。ADT組術(shù)后14天、28天的Ki67染色結(jié)果顯示:新生皮膚的毛囊和皮脂腺細(xì)胞大多數(shù)都表達(dá)Ki67,而SF組的細(xì)胞大部分不表達(dá)Ki67。Lgr5-EGFP-Ires-Cre ERT2/Rosa26-Lac Z轉(zhuǎn)基因小鼠新生皮膚的Lgr5陽性細(xì)胞的子代細(xì)胞群在絕大多數(shù)毛囊的外根鞘、內(nèi)根鞘和毛囊隆突細(xì)胞中均被發(fā)現(xiàn),然而,正常皮膚中僅在數(shù)個毛囊的隆突區(qū)中能觀察到陽性標(biāo)記細(xì)胞。結(jié)論:人工真皮為創(chuàng)面修復(fù)提供適宜的條件從而誘導(dǎo)了皮膚及皮膚附屬器的再生,在此過程中人工真皮誘導(dǎo)再生的毛囊細(xì)胞部分起源于Lgr5陽性干細(xì)胞。
【圖文】：

頭皮缺損病人的術(shù)前創(chuàng)面（A），手術(shù)清創(chuàng)后（B）及完全愈合后的創(chuàng)面（C）

圖 2：術(shù)后第 9 周 Pelnac 硅膠膜自然脫落后傷口面積縮小至 7×4cm，靠近創(chuàng)面邊緣的再上皮化區(qū)可以觀察到許多新生的毛發(fā)，這些毛發(fā)短而細(xì)并且呈彎曲狀態(tài)，與正常頭皮處的頭發(fā)相比具有明顯不同的特征（A）。隨后 9 天同一區(qū)域毛發(fā)的密度增加，毛干生長得更長，未上皮化的肉芽組織區(qū)可以清楚的看到 2 根新生的毛發(fā)（黑色箭頭所示）（B）。術(shù)后 16 周，，創(chuàng)面面積縮小到 4×2cm，傷口邊緣的毛發(fā)分布范圍與 6 周前相似，在未上皮化的創(chuàng)面區(qū)觀察到 4 根新生毛發(fā)（C）。術(shù)后18 周，傷口面積進(jìn)一步縮小到 3×1.5cm，并且在該區(qū)域可見 2 根毛發(fā)（D）。
【學(xué)位授予單位】：華中科技大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R751

【參考文獻(xiàn)】

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