【摘要】： 背景 白癜風(fēng)是一種黑素細(xì)胞選擇性毀損導(dǎo)致的的色素脫失性疾病,患者表皮皮損處黑素細(xì)胞明顯減少或完全消失。白癜風(fēng)發(fā)病率約0.5～2%,好發(fā)年齡0～20歲,無明顯性別和種族差異。白癜風(fēng)的發(fā)病機(jī)制目前尚不清楚,既往學(xué)者從不同角度提出了多種學(xué)說,如自身免疫學(xué)說、神經(jīng)化學(xué)因子學(xué)說、黑素細(xì)胞自身破壞學(xué)說、遺傳學(xué)說等。但任何單一學(xué)說均不能完全解釋白癜風(fēng)的發(fā)病機(jī)理。臨床上白癜風(fēng)存在明顯的家族聚集性和遺傳傾向,但其遺傳模式并不遵守孟德爾遺傳規(guī)律,可以認(rèn)為白癜風(fēng)是一種多因素、多基因累積致病,染色體上多基因累積遺傳效應(yīng)加上環(huán)境因素共同影響疾病的發(fā)生和發(fā)展。 近年來的大量研究支持了白癜風(fēng)是一種自身免疫相關(guān)性疾病,白癜風(fēng)患者存在明顯的細(xì)胞和體液免疫的異常,既往研究顯示細(xì)胞免疫參與了白癜風(fēng)的發(fā)病,但不同研究之間結(jié)果有所爭論,具體表現(xiàn)在CD4~+T細(xì)胞水平以及CD4~+/CD8~+比例升高還是降低上。CD4~+CD25~+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(regulatory T cells, Treg)的鑒定豐富了人們對免疫調(diào)節(jié)和外周免疫耐受的認(rèn)識。CD4~+CD25~+ Treg細(xì)胞能夠阻遏自身免疫性CD4~+CD25-T細(xì)胞的增殖活性,抑制CD4~+及CD8~+T細(xì)胞的免疫應(yīng)答,進(jìn)而維持機(jī)體免疫平衡。免疫性疾病患者外周血Treg(高表達(dá)FOXP3)的抑制能力不足而同時CD4~+效應(yīng)性T細(xì)胞(多數(shù)表達(dá)CXCR3)的增殖活性則過強(qiáng)、體外的增殖試驗表明Treg對效應(yīng)性T細(xì)胞的抑制能力也減弱。這些間接提示了白癜風(fēng)的發(fā)病可能與Treg的數(shù)量或功能改變有關(guān)。然而,白癜風(fēng)常伴發(fā)多種具有遺傳傾向的自身免疫性疾病,如自身免疫性甲狀腺炎、1型糖尿病、惡性貧血、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡和斑禿等,而白癜風(fēng)本身亦具有遺傳傾向和遺傳易感性。已有研究證實了在多個白癜風(fēng)相關(guān)的遺傳性疾病中,NALP1、PTPN22等基因為它們的共同易感基因。因此,造成自身免疫發(fā)生的遺傳易感性因子可能會影響白癜風(fēng)的發(fā)病。FOXP3(forkhead/winged helix transcription factor),又稱叉狀頭/翅膀狀螺旋轉(zhuǎn)錄因子,特異性表達(dá)于Treg細(xì)胞,并對其發(fā)育和功能起到重要的作用,被認(rèn)為是CD4~+ CD25~+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞發(fā)揮功能的主開關(guān)。FOXP3主要表達(dá)于CD4~+T淋巴細(xì)胞,與Tr細(xì)胞的發(fā)育和功能密切相關(guān)。FOXP3/Scurfin gene在外周T細(xì)胞中表達(dá)的精密控制對于維持免疫系統(tǒng)的內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定具有重要意義。Foxp3/FOXP3基因缺陷,會影響Treg的發(fā)育和功能,導(dǎo)致IPEX綜合癥的發(fā)生。已有多種實驗證明FOXP3基因多態(tài)性與1型糖尿病等自身免疫性疾病的發(fā)生發(fā)展有關(guān)。迄今為止,CD4~+ CD25~+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞在白癜風(fēng)中有、無數(shù)量或功能的改變, Treg細(xì)胞的發(fā)育和功能相關(guān)基因FOXP3的多態(tài)性是否與白癜風(fēng)的易感性有關(guān),尚無文獻(xiàn)報道。目的觀察CD4~+CD25~+T細(xì)胞CD4~+CD25~+FOXP3~+nTreg細(xì)胞在尋常型進(jìn)展期白癜風(fēng)患者中的水平變化情況;分析FOXP3基因外顯子-3279,-6054,-924位點多態(tài)性與和白癜風(fēng)的遺傳易感性的關(guān)系,為闡明白癜風(fēng)的免疫及遺傳機(jī)制提供試驗依據(jù),并為白癜風(fēng)的診斷和預(yù)后提供新的指標(biāo)。 方法 1.選取2007年8月-2007年11月在本院皮膚科門診就診的45例尋常型進(jìn)展期未經(jīng)免疫治療的白癜風(fēng)患者,以Ficoll密度梯度離心法提取外周血單個核淋巴細(xì)胞,流式細(xì)胞學(xué)技術(shù)檢測CD4~+CD25~+Treg細(xì)胞的水平變化。采用24例健康體檢者作為正常對照組。 2.應(yīng)用病例-對照研究方法,在中國漢族人群中選取無血緣關(guān)系的白癜風(fēng)患者和正常人群作為研究對象的基因組DNA,應(yīng)用PCR-SSP (序列特異性引物聚合酶鏈反應(yīng))技術(shù)比較FOXP3基因外顯子-3279位點、-924位點、-6054位點多態(tài)性在臨床確診的600例白癜風(fēng)患者和600例正常人中分布頻率的差異,分析患者FOXP3基因多態(tài)性與白癜風(fēng)罹患的關(guān)系。 結(jié)果 1.細(xì)胞學(xué)檢測 尋常型進(jìn)展期白癜風(fēng)患者外周血CD4~+CD25~+Treg和CD4~+CD25~+FOXP3~+ nTreg細(xì)胞數(shù)量在患者和正常對照之間有明顯統(tǒng)計學(xué)差異(P0.05),患者組明顯高于正常對照組。將CD4~+CD25~+Treg細(xì)胞占CD4~+細(xì)胞比例在白癜風(fēng)患者和正常對照之間進(jìn)行比較,白癜風(fēng)患者中CD4~+CD25~+Treg細(xì)胞的比例明顯升高,且具有統(tǒng)計學(xué)差異(P0.01)。選取CD4~+CD25highT細(xì)胞,在此基礎(chǔ)上對比患者和正常對照之間CD4~+CD25~+FOXP3~+Treg細(xì)胞占CD4~+CD25high細(xì)胞比例變化,結(jié)果患者組CD4~+CD25~+FOXP3~+Treg明顯低于正常對照組,(P0.01)。 2.FOXP3基因多態(tài)性檢測 2.1.單因素分析結(jié)果發(fā)現(xiàn)中國漢族人白癜風(fēng)患者及正常人群FOXP3基因3個多態(tài)性位點的基因型頻率分布情況,其中FOXP3位點-6054 AA基因型,-3279 AA基因型,-924 GG基因型在白癜風(fēng)患者中頻率較高且攜帶者罹患白癜風(fēng)的風(fēng)險增加。-6054位點A等位基因頻率在兩組人群中有統(tǒng)計學(xué)差異,與白癜風(fēng)的發(fā)生發(fā)展相關(guān)。 2.2. FOXP3基因-6054位點,不論年齡性別,及臨床分型是皮節(jié)型或?qū)こＰ?攜帶AA基因型都可能增加罹患白癜風(fēng)的風(fēng)險。 2.3. -3279位點,攜帶AA基因型男性增加罹患白癜風(fēng)的風(fēng)險。在發(fā)病年齡不論大于或是小于等于20歲組中,攜帶AA基因型都可能增加罹患白癜風(fēng)的風(fēng)險。不論臨床分型是皮節(jié)型還是尋常型,攜帶AA基因型都可能增加罹患白癜風(fēng)的風(fēng)險 2.4. -924位點,攜帶GG基因型男性增加罹患白癜風(fēng)的風(fēng)險。在發(fā)病年齡不論大于或是小于等于20歲組中,GG基因型都可能增加罹患白癜風(fēng)的風(fēng)險。在臨床分型中,攜帶GG基因型的患者增加了罹患尋常型白癜風(fēng)的傾向。 結(jié)論 本研究首次發(fā)現(xiàn)CD4~+CD25~+Treg細(xì)胞在尋常型進(jìn)展期白癜風(fēng)患者外周血中的水平發(fā)生變化,患者可能處于免疫失衡狀態(tài),細(xì)胞免疫尤其是Treg細(xì)胞可能參與了白癜風(fēng)的發(fā)病。在中國漢族人群中FOXP3基因-3279,-6054,-924位點多態(tài)性可能與白癜風(fēng)的發(fā)病相關(guān)。本研究的兩部分研究結(jié)果支持了白癜風(fēng)的發(fā)病與免疫學(xué)說、遺傳學(xué)說相關(guān),并為將來白癜風(fēng)的個體化預(yù)防和治療提供新思路。
【圖文】：

癜風(fēng)相關(guān)自身免疫性疾病及已確定的可影響白癜風(fēng)易感性[引自 Spritz, 2007]。著研究的不斷深入，，人們已經(jīng)篩選出了一些白癜風(fēng)易感性年來的發(fā)現(xiàn)的基因數(shù)量還在增加。然而，其中大部分的基因物學(xué)候選基因的位置并不相符。表 2 列舉了大量的白癜風(fēng)易及其基因座位置。白癜風(fēng)候選基因[引自 Passeron and Ortonne, 2005]Mapping Product Disease11p13 Catalase Vitiligo2p21 ? Vitiligo21q22.3 Transcription factor APECE3p14.1-p12.3 Transcription factor Vitiligo 22q11.2Catecholamine-O-methyltransferaseVitiligoRate-limiting enzyme of

圖 3.Treg 細(xì)胞維持正常免疫穩(wěn)態(tài)的模式圖。模型顯示了 Treg 在調(diào)節(jié)常情況下的穩(wěn)態(tài)控制、炎癥部位的損傷控制、免疫反應(yīng)后的感染性耐受infectious tolerance）等時的可能參與機(jī)制[引自 Tang and Blueston008]。.3 CD4+CD25+Treg 在治療上的前景
【學(xué)位授予單位】：第四軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2008
【分類號】：R758.41

【共引文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 薛磊;徐志飛;;轉(zhuǎn)錄因子FOXP3在腫瘤免疫中的作用[J];第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報;2009年09期

2 王治校;王崇全;何朝榮;詹中群;王俊峰;李大主;;高血脂對小鼠Foxp3基因表達(dá)的影響[J];第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報;2010年13期

3 趙書山;李向培;;FOXP3在免疫自穩(wěn)中的決定性作用[J];中華風(fēng)濕病學(xué)雜志;2006年10期

4 王宏偉;陳福琴;;FOXP3與自身免疫性甲狀腺疾病[J];國際內(nèi)科學(xué)雜志;2009年10期

5 汪薔華;趙守松;;CD4~+CD25~+Treg細(xì)胞在慢性乙型肝炎發(fā)病機(jī)制中的作用研究進(jìn)展[J];實用肝臟病雜志;2012年06期

6 王治校;周建華;毛山;詹中群;何朝榮;王崇全;;負(fù)向調(diào)控調(diào)節(jié)性T細(xì)胞對小鼠動脈粥樣硬化形成的影響[J];中國動脈硬化雜志;2011年08期

7 奚敏;張瑞祺;;CD_4~+CD_(25)~+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞在病毒性肝炎中的研究進(jìn)展[J];臨床肝膽病雜志;2008年06期

8 王禮文;CD4~+CD25~+調(diào)節(jié)性T淋巴細(xì)胞及相關(guān)標(biāo)記物的研究進(jìn)展[J];臨床檢驗雜志;2005年02期

9 曹新國;王禮文;;人類免疫調(diào)控轉(zhuǎn)錄因子FOXP3研究進(jìn)展[J];臨床檢驗雜志;2006年01期

10 王治校;毛曉波;林靜;王崇全;詹中群;李大主;;Roles of FOXP3 in experimental atherosclerosis of ApoE-knockout mice[J];South China Journal of Cardiology;2011年02期

相關(guān)會議論文 前1條

1 邱曉燕;焦正;張明;陳建平;施孝金;鐘明康;;FOXP3基因多態(tài)性對腎移植患者排斥發(fā)生率的影響[A];第十二次全國臨床藥理學(xué)學(xué)術(shù)會議會議論文集[C];2010年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 陸永光;CD4+T淋巴細(xì)胞異常表達(dá)微小核糖核酸在不穩(wěn)定型心絞痛中的作用及機(jī)制研究[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2011年

2 安云飛;高IgM綜合征及IPEX臨床與分子特征研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2011年

3 郭昊;白介素35基因治療協(xié)同地西他濱抑制小鼠心臟移植排斥反應(yīng)的研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2011年

4 宋秋荷;FOXP3基因內(nèi)含子1區(qū)SNP與尋常型銀屑病發(fā)病相關(guān)性的研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2010年

5 昌薇;TSLP在動脈粥樣硬化炎癥反應(yīng)中的作用和機(jī)制[D];華中科技大學(xué);2012年

6 孫麗光;誘導(dǎo)T細(xì)胞成熟及免疫抑制劑對調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的影響[D];吉林大學(xué);2006年

7 張建;原發(fā)性膽汁性肝硬化患者中CD4～+CD25～+免疫調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2006年

8 張愛軍;靛玉紅對CD4+CD25+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的影響及在特發(fā)性血小板減少性紫癜中的應(yīng)用研究[D];山東大學(xué);2007年

9 楊治芳;LADA患者羅格列酮的治療及其免疫機(jī)制研究[D];中南大學(xué);2007年

10 高琳;Foxp3，F(xiàn)as，F(xiàn)asL，COMT基因多態(tài)性與漢族尋常型銀屑病相關(guān)性分析[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2008年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 張秀娟;FOXP3、T淋巴細(xì)胞亞群在鼻息肉中的表達(dá)及其臨床意義[D];鄭州大學(xué);2010年

2 楊軼;食管癌患者CD4~+CD25~+Foxp3~+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的表達(dá)及其臨床意義[D];鄭州大學(xué);2010年

3 耿曄;類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者CD4~+CD25~+T細(xì)胞FOXP3基因啟動子區(qū)甲基化水平研究[D];山西醫(yī)科大學(xué);2011年

4 袁寧;初診2型糖尿病患者CD4~+CD25~+Foxp3~+ Treg的表達(dá)及血清中相關(guān)細(xì)胞因子IL-10和TGF-β變化[D];吉林大學(xué);2011年

5 周秉俠;FOXP3在玫瑰糠疹、扁平苔蘚、大斑塊型副銀屑病及蕈樣肉芽腫中的表達(dá)及意義[D];山東大學(xué);2011年

6 崔善;FOXJ1基因多態(tài)性與中國朝鮮族人群哮喘易感性的相關(guān)性研究[D];延邊大學(xué);2011年

7 林靜;CD4+CD25+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞對巨噬細(xì)胞泡沫化的影響[D];華中科技大學(xué);2010年

8 馬旭明;急性冠脈綜合癥患者胸腺新近輸出CD4~+CD25~+FOXP3~+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的檢測及意義[D];華中科技大學(xué);2011年

9 周麗娜;酵母雙雜交系統(tǒng)篩選FOXP3相互作用蛋白[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2006年

10 賈維勝;Foxp3基因轉(zhuǎn)染的CD4+CD25-T細(xì)胞對小鼠心臟移植物存活的影響[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2006年

本文編號：2668376