【摘要】： 目的: 觀察中藥益發(fā)口服液聯(lián)合糖皮質(zhì)激素(GC)治療重型斑禿的臨床療效及藥理機制。通過檢測重型斑禿患者血皮質(zhì)醇水平及外周血單個核細(xì)胞(PBMCs)中糖皮質(zhì)激素受體(GR)mRNA的表達(dá)水平,探討重型斑禿的發(fā)病機理,分析GR表達(dá)水平與病情程度及臨床療效的關(guān)系,進(jìn)而深入探討中藥聯(lián)合GC與糖皮質(zhì)激素受體之間的關(guān)系。 方法: 參照《中藥新藥臨床研究指導(dǎo)原則》第三輯內(nèi)容,選擇經(jīng)臨床確診為重型斑禿并且中醫(yī)辨證分型屬肝腎不足證的患者32例,并設(shè)正常健康人對照組20例。將32例重型斑禿病人隨機分為中西結(jié)合組(17例)和西藥組(15例),中醫(yī)結(jié)合組予益發(fā)口服液,每次20ml,每天3次;強的松0.25mg/kg,早8時一次頓服,每天1次,法莫替丁片20mg,口服,每天2次。西藥組予強的松及法莫替丁片口服,用法用量同中西結(jié)合組。兩組均治療6個月后評定療效,療效性指標(biāo)包括:治療期間頭發(fā)脫落的根數(shù);治療期間新發(fā)長出的面積;新生頭發(fā)的密度、粗細(xì)、色澤;病人的整體狀況。療效判定標(biāo)準(zhǔn)參照《中藥新藥臨床研究指導(dǎo)原則》第三輯有關(guān)內(nèi)容。治療前后均觀察兩組患者血、尿、便常規(guī)、心、肝、腎功能(EKG,ALT,AST,BUN,Cr)及不良反應(yīng)情況。應(yīng)用化學(xué)發(fā)光法檢測正常對照組以及重型斑禿患者治療前血清皮質(zhì)醇含量并比較。應(yīng)用逆轉(zhuǎn)錄-實時熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(RT-qRealTime-PCR)檢測正常對照組以及重型斑禿患者治療前、后的GRmRNA表達(dá)水平并比較。采用SPSS13.0統(tǒng)計軟件包建立數(shù)據(jù)庫并進(jìn)行統(tǒng)計分析。 結(jié)果: (一)血清皮質(zhì)醇方面:重型斑禿患者治療前血清中皮質(zhì)醇濃度與正常對照組相比無顯著性差異(P＞0.05);中西結(jié)合組與西藥組兩組的血皮質(zhì)醇濃度比較,差異也是無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。 (二) GRmRNA表達(dá)水平方面: 1.正常對照組與重型斑禿病例組比較:正常對照組與重型斑禿病例組PBMCs均有GRmRNA表達(dá),重型斑禿患者治療前、后GRmRNA表達(dá)水平均低于正常對照組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05);并且治療后GRmRNA表達(dá)水平比治療前更低,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01)。 2.中西結(jié)合組和西藥組比較:(1)組內(nèi)比較:兩組治療后GRmRNA表達(dá)水平均較治療前明顯降低,經(jīng)配對樣本比較,差異均有顯著性意義,中醫(yī)結(jié)合組(P＜0.05),西藥組(P＜0.01)。但西藥組比中西醫(yī)組下降幅度更大。(2)組間比較:治療前,中西結(jié)合組與西藥組外周血GRmRNA表達(dá)水平無顯著性差異(P＞0.05)。治療后,中西結(jié)合組GRmRNA表達(dá)水平要明顯高于西藥組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。 (三)療效比較:采用符合方案集分析(PP)對依從性好且完成試驗的受試者進(jìn)行分析;采用ITT意圖治療分析(ITT)對全部的受試者進(jìn)行統(tǒng)計分析。方案集分析:中西結(jié)合組治愈率58.82%,總有效率為94.1%;西藥組治愈率為40%,總有效率為80%,兩組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。兩組的意圖治療數(shù)據(jù)集療效比較結(jié)果與方案集分析結(jié)果相同。兩組的不良反應(yīng)比較,差異無顯著性意義(P＞0.01)。 (四)按脫發(fā)面積分為普禿、全禿、斑片組,結(jié)果斑片組GRmRNA表達(dá)水平較高。普禿、全禿組GRmRNA表達(dá)水平較低。 (五)按療效分成痊愈、顯效、有效、無效四組,結(jié)果四組治療前的GRmRNA表達(dá)水平組間比較無統(tǒng)計學(xué)差異(P＞0.05)。但四組治療后的GRmRNA表達(dá)水平組間比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。組內(nèi)比較:痊愈、顯效、有效組治療前后GRmRNA的差值比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05);無效組治療前后GRmRNA差值比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。 結(jié)論: 通過本次研究得到以下結(jié)論: 1.國內(nèi)外首次報道重型斑禿患者治療前血皮質(zhì)醇含量與正常對照相比無顯著性差異,但外周血單一核細(xì)胞上的GR mRNA表達(dá)水平明顯降低。表明重型斑禿患者存在GC-GR紊亂,GRmRNA表達(dá)水平降低可能參與了重型斑禿的發(fā)病機制。 2.國內(nèi)外首次報道肝腎不足證型的重型斑禿患者外周血單一核細(xì)胞上的GRmRNA表達(dá)水平顯著低于正常對照組,這可能是重型斑禿肝腎不足證型在受體及基因水平上的病理變化。GRmRNA表達(dá)水平能否作為肝腎不足證型的現(xiàn)代病理學(xué)量化依據(jù),還有待進(jìn)一步深入的研究。 3.國內(nèi)外首次報道中西結(jié)合組治療后GRmRNA表達(dá)水平要明顯高于西藥組,中西結(jié)合組治療重型斑禿療效要優(yōu)于單純西藥組。表明益發(fā)口服液與GC合用,可提高患者血GRmRNA表達(dá),或能減輕激素對自身受體的下調(diào)作用,從而增強GC敏感性,保證GC與GR的結(jié)合水平。從中也提示益發(fā)口服液聯(lián)合GC治療斑禿的作用與其對GR的調(diào)節(jié)作用有一定關(guān)聯(lián),這可能是益發(fā)口服液治療斑禿的作用機制之一。 4.國內(nèi)外首次報道病情較輕的,GRmRNA表達(dá)水平較高。病情較重,GRmRNA表達(dá)水平較低。因此檢測GRmRNA表達(dá)水平對判斷重型斑禿的預(yù)后有一定作用。 5.國內(nèi)外首次報道療效好的重型斑禿患者其PBMCs中GR mRNA表達(dá)水平相對高,療效差者GR mRNA表達(dá)水平相對低。提示如果對反應(yīng)不佳的患者盲目加大GC的用量只會增加不良反應(yīng),弊大于利。推測重型斑禿患者治療前PBMCs中GRmRNA表達(dá)水平的檢測可能有助于預(yù)測患者對GC的效果,也許能作為指導(dǎo)治療與預(yù)后的參考指標(biāo)之一。
【圖文】：

ぶ始に囟災(zāi)匭桶咄夯頰嚀瞧ぶ始に厥芴逕戶A表達(dá)的影響圖1一 1GR標(biāo)準(zhǔn)曲線圖1一ZG^PDH標(biāo)準(zhǔn)曲線(十)擴增產(chǎn)物特異性分析1.取10協(xié)L擴增產(chǎn)物點樣于2%瓊脂糖凝膠板(含澳化乙錠6mg/m1)，，在電泳儀上進(jìn)行恒壓電泳分析:電泳條件 :90v45min。電泳結(jié)束后，在紫外燈下觀察產(chǎn)物特異性�？梢婋娪緱l帶單一清晰(見圖1一3)。 GRGAPDHM

本文編號：2612724