【摘要】： c-Myc是體內(nèi)重要的轉(zhuǎn)錄因子,可以調(diào)控數(shù)以千計的基因表達(dá),其生理功能十分廣泛,參與增殖,分化,凋亡,腫瘤等多個生理病理過程。同時,c-Myc也是Wnt,TGF-beta,EGF等多條信號通路的下游效應(yīng)分子。 毛囊是皮膚重要的附屬器之一,其峽部的表皮干細(xì)胞是可以在生理狀態(tài)下和創(chuàng)傷修復(fù)時為皮膚表皮組分提供細(xì)胞來源。小鼠毛囊發(fā)育起始于胚胎中晚期,至生后8天左右完成,其后毛囊開始以生長-退化-靜止的周期性再生循環(huán)實現(xiàn)毛發(fā)周期性更新。c-Myc是否也參與了毛囊的發(fā)育過程以及在其中所起的作用尚不清楚。在毛發(fā)周期中,曾有研究證實成年人毛囊中存在c-Myc的表達(dá),但是表達(dá)部位存在爭議,且缺乏完整毛發(fā)周期的表達(dá)資料;小鼠毛發(fā)周期中c-Myc的表達(dá)規(guī)律也未見報道,c-Myc在毛發(fā)再生過程中所扮演的角色仍不清楚。 為了探明c-Myc是否參與小鼠毛囊發(fā)育和毛發(fā)周期性再生過程,以及c-Myc在其中的作用,本研究從以下幾個方面展開實驗:通過IHC,RT-PCR, Western blot等多種實驗手段檢測c-Myc在小鼠毛囊發(fā)育過程中的表達(dá);檢測c-Myc在小鼠自然毛發(fā)周期與同步化毛發(fā)周期中表達(dá)變化特點。在功能研究上,一方面應(yīng)用針對c-Myc蛋白的特異性抑制多肽干擾c-Myc蛋白的正常功能發(fā)揮,另一方面通過基因表達(dá)載體介導(dǎo)c-Myc局部過表達(dá),觀察其對毛囊生長的影響及相關(guān)因子的表達(dá)變化.主要結(jié)果如下: 1.發(fā)現(xiàn)c-Myc在小鼠毛囊發(fā)育起始到發(fā)育完成的各主要階段中存在持續(xù)性表達(dá)。 2.探明了c-Myc在自然毛發(fā)周期和同步化毛發(fā)周期中的表達(dá)規(guī)律,即生長期主要表達(dá)于毛囊毛母質(zhì)及內(nèi)根鞘,退化期表達(dá)于殘留的內(nèi)根鞘,靜止期毛囊不表達(dá)。 3.在生長期,通過在體水平局部皮膚內(nèi)特異性抑制c-Myc蛋白功能,發(fā)現(xiàn)毛囊生長減緩,毛囊變小。 4.通過在體水平重啟毛發(fā)周期的情況下,c-Myc在局部皮膚內(nèi)過表達(dá)可以促進(jìn)毛發(fā)較快生長,但在單獨過表達(dá)c-Myc并不能重啟毛囊周期。 總之,本課題探明了c-Myc在小鼠毛囊發(fā)育和毛發(fā)再生過程中表達(dá)的動態(tài)變化規(guī)律,c-Myc在毛發(fā)周期特定階段和毛囊特定結(jié)構(gòu)中的表達(dá)對其功能有極其重要的提示作用;而通過單獨抑制c-Myc蛋白功能發(fā)揮,發(fā)現(xiàn)毛囊生長變緩和毛囊變小,相關(guān)因子表達(dá)出現(xiàn)相應(yīng)變化;其過表達(dá)可以使毛發(fā)生長加快,說明c-Myc在毛囊發(fā)育和毛發(fā)再生過程中發(fā)揮重要作用.
【圖文】：

25圖 2-1 C57BL/6 雌鼠在脫毛后周期時間表以及皮膚顏色與厚度變化圖表來源：J Invest Dermatol. 2001 Jul;117（1）:3-15.材料與方法材料要實驗設(shè)備-20℃冰箱 Siemens超低溫冰箱 SANYO系統(tǒng) Millipore

A B圖 2－2 拔毛后小鼠背毛同步化情況 （A:脫毛后 0.2 小時，B：脫毛后 8 天，第 5 天時有一只小鼠被取走用于預(yù)實驗）2. IHC 檢測 c-Myc 在同步化的毛囊周期中的表達(dá)生長期：脫毛后第 3 天：陽性著色主要表達(dá)于毛母質(zhì)和皮脂腺（圖 A）。脫毛后第 5 天，第 8 天，，第 10 天，第 13 天，第 16 天：陽性著色主要位于毛母質(zhì)脂腺和內(nèi)根鞘（圖 B，C，D，E，F(xiàn)）。退化期：脫毛后第 20 天：陽性著色位于尚未凋亡的內(nèi)根鞘，皮脂腺。靜止期：脫毛后第 25 天：陽性著色只出現(xiàn)在皮脂腺。
【學(xué)位授予單位】：第三軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2010
【分類號】：R751

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本文編號：2575752