【摘要】：目的探討Fascin-1對惡性黑色素瘤細胞增殖和凋亡的影響及其作用機制。方法體外培養(yǎng)人惡性黑色素瘤細胞A375和人皮膚成纖維細胞CCC-HSF-1。將A375細胞隨機分為CON組和Fascin-1-shRNA組,分別按照10 MOI的感染復(fù)數(shù)加入CON和Fascin-1-shRNA病毒,培養(yǎng)48 h。采用qRT-PCR法及Western blotting法檢測常規(guī)培養(yǎng)的CCC-HSF-1、A375細胞以及CON組、Fascin-1-shRNA組Fascin-1 mRNA和蛋白表達。分別采用Dye67染色法、Annexin V/PI染色法檢測CON組、Fascin-1-shRNA組細胞增殖指數(shù)及凋亡率,采用Western blotting法檢測Bcl-2、Bax、Bad蛋白表達。結(jié)果常規(guī)培養(yǎng)的CCC-HSF-1、A375細胞中Fascin-1 mRNA相對表達量分別為0.21±0.015、1.00±0.01,Fascin-1蛋白相對表達量分別為0.12±0.04、0.75±0.11,二者比較P均0.01。CON組、Fascin-1-shRNA組Fascin-1 mRNA相對表達量分別為1.00±0.01、0.19±0.04,Fascin-1蛋白相對表達量分別為1.28±0.17、0.24±0.10,兩組比較P均0.01。Fascin-1-shRNA組培養(yǎng)3、4天時細胞增殖指數(shù)均低于CON組同期(P均0.05)。Fascin-1-shRNA組細胞凋亡率高于CON組(P0.01)。Fascin-1-shRNA組Bcl-2蛋白相對表達量低于CON組,Bax、Bad蛋白相對表達量高于CON組(P均0.01)。結(jié)論 Fascin-1表達下調(diào)可抑制惡性黑色素瘤細胞增殖并誘導(dǎo)其凋亡,其機制可能與下調(diào)細胞中Bcl-2表達及上調(diào)Bax、Bad表達有關(guān)。
[Abstract]:Objective to investigate the effect and mechanism of Fascin-1 on proliferation and apoptosis of malignant melanoma cells. Methods Human malignant melanoma cell line A375 and human skin fibroblast CCC-HSF-1. were cultured in vitro. A375 cells were randomly divided into CON group and Fascin-1-shRNA group. According to the complex number of 10 MOI infection, CON and Fascin-1-shRNA virus were added to A375 cells for 48 h. QRT-PCR and Western blotting were used to detect the expression of Fascin-1 mRNA and protein in cultured CCC-HSF-1,A375 cells, CON group and Fascin-1-shRNA group. The cell proliferation index and apoptosis rate of CON group and Fascin-1-shRNA group were detected by Dye67 staining and Annexin V/PI staining respectively. Bcl-2,Bax,Bad protein expression was detected by Western blotting method. Results the relative expression of Fascin-1 mRNA in CCC-HSF-1,A375 cells was 0.21 鹵0.0151.00 鹵0.01Fascin-1, 0.12 鹵0.04 鹵0.75 鹵0.11, respectively. The relative expression of Fascin-1 mRNA in Fascin-1-shRNA group was 1.00 鹵0.01U 0.19 鹵0.04Fascin-1 protein, respectively 1.28 鹵0.170.24 鹵0.10, respectively. The cell proliferation index of 0.01.Fascin-1-shRNA group was lower than that of CON group after 3 days of culture (P0. 05). The apoptosis rate of Fascin-1-shRNA group was higher than that of CON group (P0. 01). The Bcl of Fascin-1-shRNA group was higher than that of CON group (P0. 01). The relative expression of -2 protein in CON group was lower than that in CON group. The relative expression of Bax,Bad protein was higher than that of CON group (P 0.01). Conclusion down-regulation of Fascin-1 expression can inhibit the proliferation and induce apoptosis of malignant melanoma cells, which may be related to down-regulation of Bcl-2 expression and up-regulation of Bax,Bad expression.
【作者單位】： 武漢市第一醫(yī)院;華中科技大學(xué)同濟醫(yī)學(xué)院附屬武漢中心醫(yī)院;
【分類號】：R739.5

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本文編號：2424083