【摘要】： 惡性黑色素瘤因具有高度遷移性和致死性而被人們熟知。明膠酶,即基質(zhì)金屬蛋白酶2(MMP-2)和基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP-9),在黑色素瘤遷移過(guò)程中參與基底膜降解和細(xì)胞外基質(zhì)重構(gòu),與腫瘤惡性化程度密切相關(guān)。明膠酶不僅參與胞外基質(zhì)與基底膜重構(gòu),在血管發(fā)生、侵潤(rùn)和遷移等腫瘤發(fā)生過(guò)程中發(fā)揮了重要作用。隨著對(duì)明膠酶研究的深入,人們發(fā)現(xiàn)明膠酶不僅由腫瘤細(xì)胞分泌并且可以由基質(zhì)細(xì)胞分泌,不僅能與細(xì)胞外基質(zhì)蛋白相互作用,而且能與包括整合素在內(nèi)的多種非基質(zhì)蛋白相互作用。 在黑色素瘤中,整合素αvβ3(integrin)是一類重要的異二聚體跨膜糖蛋白,能夠與含有RGD片段的配體結(jié)合,通過(guò)這種結(jié)合αvβ3可以介導(dǎo)細(xì)胞外配體與胞內(nèi)骨架蛋白和各種信號(hào)途徑間的信號(hào)傳遞。然而,整合素αvβ3與MMP-2間的識(shí)別是通過(guò)MMP-2羧基端的PEX區(qū)而非RGD區(qū),對(duì)于MMP-2是否能通過(guò)與αvβ3的這種結(jié)合而發(fā)揮一定的信號(hào)傳遞作用目前還沒(méi)有報(bào)道。 在本研究中,我們首先利用明膠酶譜法對(duì)A375細(xì)胞中明膠酶的表達(dá)進(jìn)行了檢測(cè),證實(shí)在人源黑色素瘤A375細(xì)胞中MMP-2和MMP-9均有所表達(dá)。通過(guò)使用MMP廣譜抑制劑對(duì)A375細(xì)胞鋪展和遷移進(jìn)行觀察發(fā)現(xiàn),MMP-2對(duì)A375細(xì)胞的影響比較顯著。通過(guò)對(duì)A375細(xì)胞鋪展過(guò)程中MMP-2和F-actin進(jìn)行免疫熒光標(biāo)記,發(fā)現(xiàn)MMP-2與肌動(dòng)蛋白細(xì)胞骨架的變化有一定相關(guān)性。同時(shí),免疫熒光標(biāo)記觀察發(fā)現(xiàn)MMP-2和整合素αvβ3在A375細(xì)胞懸浮、鋪展和遷移三種狀態(tài)下均有共定位現(xiàn)象。通過(guò)靜止粘附實(shí)驗(yàn)我們證實(shí),MMP-2能夠影響整合素αvβ3與其配體的結(jié)合能力。這些結(jié)果表明,MMP-2在A375中可能通過(guò)整合素αvβ3而發(fā)揮某些信號(hào)作用從而影響腫瘤細(xì)胞的發(fā)展。
[Abstract]:Malignant melanoma is well known for its high mobility and mortality. Gelatinase, namely matrix metalloproteinase 2 (MMP-2) and matrix metalloproteinase 9 (MMP-9), is involved in basement membrane degradation and extracellular matrix remodeling during melanoma migration, which is closely related to the malignancy of the tumor. Gelatinase not only participates in the remodeling of extracellular matrix and basement membrane, but also plays an important role in angiogenesis, invasion and migration. With the further study of gelatinase, it has been found that gelatinase is not only secreted by tumor cells but also by stromal cells, and can interact with extracellular matrix proteins. And can interact with a variety of non-matrix proteins, including integrins. In melanoma, integrin 偽 v 尾 3 (integrin) is an important heterodimer transmembrane glycoprotein that binds to ligand containing RGD fragments. This binding 偽 v 尾 3 mediates signal transduction between extracellular ligands, intracellular cytoskeleton proteins and various signal pathways. However, the recognition of integrin 偽 v 尾 3 and MMP-2 is through the PEX region of the carboxyl terminal of MMP-2 rather than the RGD region. It has not been reported whether MMP-2 can play a certain role in signal transduction through the combination of 偽 v 尾 3 with 偽 v 尾 3. In this study, we first detected the expression of gelatinase in A375 cells by gelatinase spectroscopy, and confirmed that both MMP-2 and MMP-9 were expressed in human melanoma A375 cells. The proliferation and migration of A375 cells were observed by using MMP broad-spectrum inhibitor. It was found that MMP-2 had a significant effect on A375 cells. By immunofluorescence labeling of MMP-2 and F-actin during the spreading of A375 cells, it was found that MMP-2 was related to the change of actin cytoskeleton. At the same time, immunofluorescence staining showed that MMP-2 and integrin 偽 v 尾 3 were co-located in A375 cell suspension, spreading and migration. Through the static adhesion experiment, we confirmed that MMP-2 can affect the binding ability of integrin 偽 v 尾 3 to its ligand. These results suggest that MMP-2 may play some signaling role in A375 by integrin 偽 v 尾 3, which may affect the development of tumor cells.
【學(xué)位授予單位】：東北師范大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2010
【分類號(hào)】：R739.5

【共引文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 馮紅超;彭江帆;馬洪;宋宇峰;;口腔癌組織中缺氧微環(huán)境對(duì)單核/巨噬細(xì)胞分泌VEGF影響的實(shí)驗(yàn)研究[J];重慶醫(yī)學(xué);2010年17期

2 陳秋鳳;周防震;;明膠酶檢測(cè)方法研究進(jìn)展[J];湖北民族學(xué)院學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2012年01期

3 段思佳;曾慶黎;;利用組織芯片研究VEGF-C和MMP-9在大腸癌中的表達(dá)及意義[J];江西醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2009年07期

4 張承俊;朱興雷;;辛伐他汀對(duì)腫瘤壞死因子α誘導(dǎo)的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞基質(zhì)金屬蛋白酶9表達(dá)的影響[J];中國(guó)動(dòng)脈硬化雜志;2006年01期

5 殷平,喬愛(ài)國(guó);腫瘤細(xì)胞浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移間質(zhì)傳導(dǎo)調(diào)解機(jī)制的研究進(jìn)展[J];牡丹江醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2002年03期

6 冷啟新,李瑞祥,劉執(zhí)玉;基質(zhì)金屬蛋白酶-9的研究進(jìn)展[J];四川解剖學(xué)雜志;2000年02期

7 閆媛;李小歐;章杰;黃巍;李凌波;楊渝珍;;重組人TACE的解整合素域?qū)θ朔蜗侔〢549體外增殖、粘附和侵襲的抑制作用[J];生物工程學(xué)報(bào);2007年04期

8 趙欣;王允山;吉愛(ài)國(guó);;基質(zhì)金屬蛋白酶在乳腺癌上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化中的作用[J];生命的化學(xué);2011年05期

9 馮紅超;彭江帆;馬洪;宋宇峰;唐路;;單核/巨噬細(xì)胞在缺氧微環(huán)境下對(duì)Tca8113舌鱗癌細(xì)胞系殺傷作用的實(shí)驗(yàn)研究[J];實(shí)用口腔醫(yī)學(xué)雜志;2009年06期

10 朱波;趙惠柳;王英;勞明;黃昭東;劉志民;謝娟;歐超;;非小細(xì)胞肺癌KAI1基因和TIMP-1、MMP-9表達(dá)與臨床生物學(xué)行為的關(guān)系研究[J];檢驗(yàn)醫(yī)學(xué);2014年03期

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 許艷麗;Cofilin-1基因在子宮內(nèi)膜異位癥發(fā)病機(jī)制中的作用研究[D];中國(guó)醫(yī)科大學(xué);2010年

2 李志紅;糖尿病足患者外周血基質(zhì)金屬蛋白酶-2和-9表達(dá)的研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2011年

3 張衛(wèi)強(qiáng);基質(zhì)金屬蛋白酶-1，，-9基因多態(tài)性和肺癌易感性關(guān)系的研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2005年

4 于春媛;基質(zhì)金屬蛋白酶-2基因啟動(dòng)子區(qū)多態(tài)與肺癌及食管癌發(fā)生和轉(zhuǎn)移風(fēng)險(xiǎn)的研究[D];中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2004年

5 錢海利;MTA1基因在腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移中的作用及機(jī)制研究[D];中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2005年

6 曾憲東;MMP9. COX-2基因多態(tài)性與大腸癌易感性的關(guān)聯(lián)研究[D];中國(guó)醫(yī)科大學(xué);2006年

7 趙成海;Wnt拮抗劑SFRP1在胃腸道腫瘤發(fā)病機(jī)制中的作用[D];中國(guó)醫(yī)科大學(xué);2007年

8 董瑞;炎癥相關(guān)刺激對(duì)乳腺癌細(xì)胞MCF-7遷移能力的影響及其分子機(jī)制的初步研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2007年

9 楊盛波;雷公藤內(nèi)酯醇對(duì)人纖維肉瘤HT-1080細(xì)胞基質(zhì)金屬蛋白酶-9表達(dá)的影響及其機(jī)制研究[D];中南大學(xué);2008年

10 牛紀(jì)曉;細(xì)胞粘附分子與血小板在腫瘤轉(zhuǎn)移中的作用[D];中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2006年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 岳新召;非小細(xì)胞肺癌中MMP-10的表達(dá)與MVD的關(guān)系及意義[D];鄭州大學(xué);2010年

2 張志強(qiáng);青年組和其他年齡組乳腺癌淋巴管生成與VEGF-C、MMP-9表達(dá)關(guān)系的研究[D];濱州醫(yī)學(xué)院;2010年

3 陳偉露;ZHX2基因與肝細(xì)胞癌轉(zhuǎn)移關(guān)系的研究[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2011年

4 林青;白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ對(duì)紫杉醇誘導(dǎo)的人卵巢癌細(xì)胞存活素survivin表達(dá)的拮抗作用及促凋亡作用[D];成都中醫(yī)藥大學(xué);2011年

5 段思佳;血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子-C和基質(zhì)金屬蛋白酶-9在大腸癌中表達(dá)及意義的研究[D];南昌大學(xué);2011年

6 胡文娟;MMP-3多態(tài)性與乳腺癌關(guān)聯(lián)分析及龍泉復(fù)方抗腫瘤機(jī)制研究[D];中南民族大學(xué);2010年

7 辛杰華;整合素αvβ5在宮頸癌中的表達(dá)及臨床意義[D];青島大學(xué);2011年

8 謝衛(wèi)紅;口腔頜面部肉瘤中FAK、MMP-9和uPA的表達(dá)及其生物學(xué)意義[D];鄭州大學(xué);2004年

9 姜輝;一氧化氮供體對(duì)腫瘤生長(zhǎng)轉(zhuǎn)移調(diào)控的研究[D];中國(guó)人民解放軍軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院;2005年

10 趙濤;手術(shù)創(chuàng)傷與人乳腺癌轉(zhuǎn)移的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2007年

本文編號(hào)：2234367