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玫瑰糠疹患者外周血單個(gè)核細(xì)胞中TLR4、TLR9 mRNA及其下游MyD88、TRIFmRNA的

發(fā)布時(shí)間:2016-12-20 19:41

  本文關(guān)鍵詞:玫瑰糠疹患者外周血單個(gè)核細(xì)胞中TLR4、TLR9 mRNA及其下游MyD88、TRIFmRNA的表達(dá)及意義,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


《河北醫(yī)科大學(xué)》 2013年

玫瑰糠疹患者外周血單個(gè)核細(xì)胞中TLR4、TLR9 mRNA及其下游MyD88、TRIFmRNA的表達(dá)及意義

石麗平  

【摘要】:目的:本課題應(yīng)用SYBR Green I實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR技術(shù)檢測(cè)玫瑰糠疹(pityriasis rosea,PR)患者外周血單個(gè)核細(xì)胞(the peripheral bloodmononuclear cells,PBMC)中TLR4、TLR9mRNA及其下游MyD88、TRIFmRNA的表達(dá)狀況,從免疫角度探討TOLL樣受體在玫瑰糠疹發(fā)病機(jī)制中的意義。PR是一種臨床常見的炎癥性皮膚病,病程6-8周,具有自限性,其特征性表現(xiàn)是長(zhǎng)軸與皮紋一致的圓形或橢圓形附有糠狀鱗屑的玫瑰色、鮮紅色或黃紅色的斑疹或丘疹。PR的病因不明,發(fā)病機(jī)制尚不清楚,目前多認(rèn)為與病毒感染和細(xì)胞免疫有關(guān)。 機(jī)體在抵御病原體的入侵時(shí)有兩套免疫防御機(jī)制:固有性免疫和適應(yīng)性免疫[1]。固有性免疫是宿主防御的第一道防線。固有性免疫應(yīng)答利用皮膚和粘膜上皮這兩個(gè)物理屏障來避免感染并迅速作出應(yīng)答。適應(yīng)性免疫應(yīng)答是由T和B細(xì)胞介導(dǎo)的相對(duì)較慢的過程,由于復(fù)雜的DNA重組使得其抗原受體高度多樣化,因此它既能識(shí)別異常的抗原也能識(shí)別保守的抗原。固有性免疫通過病原相關(guān)分子模式(pathogen-associated molecular patterns,PAMPs)識(shí)別病原體,哺乳動(dòng)物中負(fù)責(zé)識(shí)別PAMPs的受體稱為模式識(shí)別受體(pattern recognition receptors,PRRs)。TOLL樣受體(Toll-likereceptors,TLRS)是固有性免疫系統(tǒng)中一種重要的模式識(shí)別受體,它們完全是種系編碼并以既定的形式表達(dá)于免疫和非免疫細(xì)胞[1]。TLRS是近年研究的一個(gè)熱點(diǎn),它們分布廣泛,既可以表達(dá)于免疫細(xì)胞也可以表達(dá)于非免疫細(xì)胞,被認(rèn)為是固有性免疫和適應(yīng)性免疫的橋梁。當(dāng)TLRS識(shí)別病原體后便可介導(dǎo)固有免疫的跨膜信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo),并激活多種促炎癥因子如IL-12、TNF-α,進(jìn)而參與抗感染的炎癥過程。此外,TLRS還可以通過細(xì)胞因子(如TNF-a、IL-1)、趨化因子(如IL-8、MIP2)、協(xié)同刺激分子(如CD-40、CD-80)和粘附分子(如ICAM-1)的產(chǎn)生[2-4]和上調(diào)抗原提呈細(xì)胞表面共刺激分子(如CD80/CD86)的表達(dá),,在固有免疫和適應(yīng)性免疫應(yīng)答中起調(diào)節(jié)作用[5、6]。其中TLR4主要分布于抗原提呈細(xì)胞,革蘭陰性菌的細(xì)胞壁成分脂多糖是它的配體。TLR9表達(dá)于許多人類細(xì)胞,低甲基化的胞嘧啶磷酸鳥核苷酸(cytosine phosphate guanosine,CpG)DNA是它的配體,這種基序普遍存在于細(xì)菌及病毒的DNA中,但在哺乳動(dòng)物中卻極為罕見。TLRS依賴于胞漿外區(qū)的接頭蛋白分子和激酶進(jìn)行信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)。據(jù)接頭蛋白的不同分為MyD88(Myeloid differentiation factor-88,髓樣分化因子88)依賴性途徑和TRIF(Toll-IL-IR domain-containing adaptor-inducinginterferon-β,誘導(dǎo)干擾素β的含TIR結(jié)構(gòu)域的銜接蛋白)依賴性途徑。TLR4既可以通過MyD88依賴性途徑也可以通過TRIF依賴性途徑進(jìn)行信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo);TLR9僅通過MyD88依賴性途徑進(jìn)行信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)。近年來,TLRS在皮膚炎癥、皮膚惡性腫瘤和防御機(jī)制方面都有著重大進(jìn)展。 方法:病例組:26例玫瑰糠疹患者;對(duì)照組:20例健康人群。病例組:均來自河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院皮膚科門診,男12例,女14例,平均年齡:22.5歲,病程3天-1月,患者入選標(biāo)準(zhǔn):⑴均有典型的臨床表現(xiàn):胸背部與皮紋長(zhǎng)軸一致的黃紅色圓形或橢圓形境界清楚的斑疹或丘疹;⑵受試前臨床檢查無其他免疫相關(guān)性疾病、過敏性疾病、腫瘤和其他嚴(yán)重系統(tǒng)性疾病;⑶1個(gè)月內(nèi)無系統(tǒng)用藥史,未服用免疫抑制劑、糖皮質(zhì)激素及抗組胺藥。對(duì)照組:20例均無過敏性疾病、自身免疫性疾病及家族史的健康人群,其性別、年齡與病例組經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。本研究采用SYBR Green I實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR技術(shù)檢測(cè)病例組與對(duì)照組外周血單個(gè)核細(xì)胞中TLR4、TLR9及MyD88、TRIF mRNA的表達(dá)狀況,實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件分析,以P<0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。統(tǒng)計(jì)學(xué)方法選用的是正態(tài)性檢驗(yàn)、秩和檢驗(yàn)中的Mann-Whitney檢驗(yàn),定量數(shù)據(jù)用中位數(shù)或四分位數(shù)表示。 結(jié)果: 1TLR4的mRNA表達(dá)水平檢測(cè)結(jié)果:經(jīng)過正態(tài)性檢驗(yàn)P<0.1,不服從正態(tài)分布,結(jié)果用中位數(shù)或四分位數(shù)間距表示。病例組與正常對(duì)照組TLR4的mRNA表達(dá)水平的RQ值分別是8.102/11.87;7.275/4.96,采用秩和檢驗(yàn)中的Mann-Whitney檢驗(yàn),二者在統(tǒng)計(jì)學(xué)上無顯著性差異(P=0.09>0.05),所以尚不能認(rèn)為兩組TLR4的mRNA表達(dá)水平有差別。 2TLR9的mRNA表達(dá)水平檢測(cè)結(jié)果:經(jīng)過正態(tài)性檢驗(yàn)P<0.1,不服從正態(tài)分布,結(jié)果用中位數(shù)或四分位數(shù)間距表示。病例組與正常對(duì)照組TLR9mRNA表達(dá)水平的RQ值分別是:1.592/3.86;3.13/8.93,采用Mann-Whitney檢驗(yàn),二者在統(tǒng)計(jì)學(xué)上有差異(P=0.030.05)。 3MyD88的mRNA表達(dá)水平檢測(cè)結(jié)果:經(jīng)過正態(tài)性檢驗(yàn)P<0.1,不服從正態(tài)分布,結(jié)果用中位數(shù)或四分位數(shù)間距表示。病例組與正常對(duì)照組MyD88mRNA表達(dá)水平的RQ值分別是1.5005/1.445;1.7445/1.297,采用Mann-Whitney檢驗(yàn),二者在統(tǒng)計(jì)學(xué)上無顯著性差異(P=0.36>0.05),所以尚不能認(rèn)為兩組MyD88的mRNA表達(dá)水平有差別。 4TRIF的mRNA表達(dá)水平檢測(cè)結(jié)果:經(jīng)過正態(tài)性檢驗(yàn)P<0.1,不服從正態(tài)分布,結(jié)果用中位數(shù)或四分位數(shù)間距表示。病例組與正常對(duì)照組TLR4的mRNA表達(dá)水平的RQ值分別是3.0115/4.431;3.443/5.970,采用Mann-Whitney檢驗(yàn),二者在統(tǒng)計(jì)學(xué)上無顯著性差異(P=0.23>0.05),所以尚不能認(rèn)為兩組TRIF的mRNA表達(dá)水平有差別。 結(jié)論: 1玫瑰糠疹患者外周血單個(gè)核細(xì)胞中的TLR4mRNA與TRIFmRNA表達(dá)水平與正常對(duì)照組相比均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均0.05),表明病例組與正常對(duì)照組TLR4mRNA與TRIF mRNA表達(dá)水平無差別,推測(cè)玫瑰糠疹的發(fā)病可能與革蘭氏陰性菌感染無關(guān)。 2玫瑰糠疹患者外周血單個(gè)核細(xì)胞中的TLR9mRNA表達(dá)水平與正常對(duì)照組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P 0.05),表明玫瑰糠疹患者外周血單個(gè)核細(xì)胞中的TLR9mRNA低于正常對(duì)照組,原因可能是機(jī)體存在某些特定DNA序列抑制了TLR9的表達(dá)。根據(jù)本研究結(jié)果推測(cè)TLR9可能參與了玫瑰糠疹的發(fā)病。 3玫瑰糠疹患者外周血單個(gè)核細(xì)胞中的MyD88mRNA表達(dá)水平與正常對(duì)照組相比無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),表明玫瑰糠疹患者外周血單個(gè)核細(xì)胞中的MyD88mRNA表達(dá)水平與正常對(duì)照組相比無差別,可能的原因是MyD88依賴途徑的上游不僅僅只有TLR9,多個(gè)TLRS均可以依賴MyD88依賴途徑進(jìn)行信號(hào)傳導(dǎo)。

【關(guān)鍵詞】:
【學(xué)位授予單位】:河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2013
【分類號(hào)】:R758.64
【目錄】:

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7 余志平;[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2001年

8 湘南學(xué)院附屬醫(yī)院皮膚性病治療中心 伍斌 博士、教授;[N];郴州日?qǐng)?bào);2008年

9 四川 陳國華;[N];民族醫(yī)藥報(bào);2003年

10 ;[N];大眾衛(wèi)生報(bào);2009年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 石麗平;玫瑰糠疹患者外周血單個(gè)核細(xì)胞中TLR4、TLR9 mRNA及其下游MyD88、TRIFmRNA的表達(dá)及意義[D];河北醫(yī)科大學(xué);2013年

2 舒曉光;玫瑰糠疹效方治療風(fēng)熱蘊(yùn)膚型玫瑰糠疹的臨床研究[D];黑龍江省中醫(yī)藥科學(xué)院;2013年

3 樊磊強(qiáng);玫瑰糠疹患者外周血單個(gè)核細(xì)胞中轉(zhuǎn)錄因子T-bet mRNA及GATA-3 mRNA的表達(dá)及其意義[D];河北醫(yī)科大學(xué);2011年

4 劉爽;玫瑰糠疹患者外周血單個(gè)核細(xì)胞中轉(zhuǎn)錄因子T-bet、GATA-3及Foxp3的mRNA的表達(dá)及意義[D];河北醫(yī)科大學(xué);2012年

5 張文霞;玫瑰糠疹患者人類皰疹病毒-7感染及外周血T淋巴細(xì)胞亞群變化研究[D];青島大學(xué);2006年

6 劉亞玲;玫瑰糠疹患者血清中IL-2、IL-10和IFNγ水平的研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2006年

7 賈淑琳;銀翹散加減方聯(lián)合窄譜中波紫外線治療玫瑰糠疹臨床療效觀察[D];南京中醫(yī)藥大學(xué);2009年

8 張杰;玫瑰糠疹的病因?qū)W探討[D];河北醫(yī)科大學(xué);2005年

9 陳健;玫瑰糠疹中VEGF、MMP-9、NF-κB的表達(dá)及意義[D];河北醫(yī)科大學(xué);2008年

10 董海玲;白三烯B4、5-羥色胺和白介素-1β在玫瑰糠疹中的表達(dá)及意義[D];河北醫(yī)科大學(xué);2008年


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本文編號(hào):221436

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