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成年鼠被毛毛乳頭細(xì)胞分離方法的建立與評(píng)價(jià)

發(fā)布時(shí)間:2018-08-23 13:05
【摘要】:目的尋求一種簡單高效的分離培養(yǎng)小鼠被毛毛乳頭細(xì)胞的方法。方法取5周齡C57小鼠背部皮膚,刮去毛發(fā)后予0.2%Ⅰ型膠原酶37℃消化2 h,刮下毛球部,經(jīng)過2次Ficoll密度梯度離心后,得到純凈的毛乳頭進(jìn)行培養(yǎng)。檢測毛乳頭貼壁率、毛乳頭細(xì)胞特異性標(biāo)記表達(dá)及其體內(nèi)毛囊重建能力。結(jié)果該分離方法能顯著降低工作強(qiáng)度,減少污染機(jī)會(huì),獲得的毛乳頭貼壁快、細(xì)胞遷出快。qRT-PCR、細(xì)胞免疫熒光實(shí)驗(yàn)結(jié)果均證實(shí)體外培養(yǎng)的小鼠被毛毛乳頭細(xì)胞可表達(dá)與毛囊誘導(dǎo)能力相關(guān)的特異性標(biāo)記物ALP、β-catenin及Versican,且與觸須毛乳頭細(xì)胞相比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。體外培養(yǎng)的小鼠被毛毛乳頭細(xì)胞具有誘導(dǎo)毛囊再生的能力。結(jié)論膠原酶消化結(jié)合Ficoll梯度離心是一種簡單、有效地分離獲取小鼠背部毛乳頭的方法。
[Abstract]:Objective to find a simple and efficient method for isolation and culture of mouse hair papilla cells. Methods the dorsal skin of 5-week-old C57 mice was shaved, and then digested at 37 鈩,

本文編號(hào):2199167

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