【摘要】：目的觀察枸杞多糖對UVB照射后HaCaT細胞的氧化損害及P38MAPK、caspase-8、caspase-3和Bcl-2含量的影響。方法超聲輔助水提法制備LBP粉末,體外培養(yǎng)HaCaT細胞,將它們隨機分為對照組、UVB照射組(UVB 30mJ/cm2照射40min)、UVB+LBP組(UVB 30mJ/cm2照射40min+LBP 1mg/ml),其中UVB+LBP組的LBP在UVB照射前12h加入,照射結束后培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)20h,用倒置顯微鏡觀察細胞的形態(tài)變化及凋亡;MTS法檢測各組細胞的A值(吸光度);酶生化法檢測各組細胞SOD、CAT、GSH-Px和MDA含量;蛋白免疫印跡實驗方法檢測各組細胞P38MAPK、caspase-8、caspase-3和Bcl-2含量。結果與對照組相比,UVB照射組細胞形態(tài)明顯異常,漂浮的死細胞明顯增多,A值顯著下降(P0.05);與UVB照射組相比,UVB+LBP組細胞的形態(tài)趨于正常,漂浮的死細胞明顯減少,A值顯著升高(P0.05)。與對照組相比,UVB照射組細胞SOD活力、CAT活力、GSH-Px含量均顯著下降,MDA含量顯著上升(P0.05);與UVB照射組相比,UVB+LBP組細胞SOD活力、CAT活力、GSH-Px含量顯著上升,MDA含量顯著下降(P0.05)。與對照組相比,UVB照射組細胞P38MAPK、caspase-8、caspase-3含量顯著上升,Bcl-2含量顯著下降(P0.05);與UVB照射組相比,UVB+LBP組細胞P38MAPK、caspase-8、caspase-3含量顯著下降,Bcl-2含量顯著增高(P0.05)。結論枸杞多糖可顯著緩解UVB照射HaCaT細胞所引起的氧化損害,并且下調P38MAPK、caspase-8、caspase-3含量及上調Bcl-2含量。
[Abstract]:Objective to observe the effects of Lycium barbarum polysaccharides on oxidative damage of HaCaT cells and the contents of caspase-8 caspase-3 and Bcl-2 after UVB irradiation. Methods LBP powder was prepared by ultrasonic assisted extraction of water. HaCaT cells were cultured in vitro. They were randomly divided into two groups: the control group (UVB 30mJ/cm2 irradiated 40min) and UVB 30mJ/cm2 LBP group (UVB 30mJ/cm2 irradiation 40min LBP 1mg/ml). LBP of UVB LBP group was added 12 hours before UVB irradiation. After irradiation, the cells were cultured in the incubator for 20 hours. The morphologic changes and apoptosis of the cells were observed by inverted microscope. The A value (absorbance) of the cells in each group was detected by MTS, and the contents of GSH-Px and MDA in the cells of each group were detected by enzyme biochemistry method. Western blot assay was used to detect the content of p38 MAPKT caspase-8 caspase-3 and Bcl-2. Results compared with the control group, the morphology of the cells in UVB irradiation group was obviously abnormal, the number of floating dead cells decreased significantly (P0.05), and the morphology of LBP cells in UVB group tended to be normal, while the dead cells in floating cells decreased significantly (P0.05). Compared with the control group, the content of SOD activity and cat activity and GSH-Px in UVB group decreased significantly (P0.05), and the content of SOD activity and cat activity and GSH-Px in UVB LBP group increased significantly compared with the control group (P0.05). Compared with the control group, the content of P38 MAPKtcaspase-8, caspase-8, caspase-3 in UVB irradiation group increased significantly (P0.05), and the content of Bcl-2 in UVB LBP group decreased significantly (P0.05), while that in UVB LBP group decreased significantly compared with the control group (P0.05). Conclusion Lycium barbarum polysaccharides can significantly alleviate the oxidative damage induced by UVB irradiation on HaCaT cells, and down-regulate the content of p38 MAPK- caspase-8 caspase-3 and up-regulate the content of Bcl-2.
【學位授予單位】：青海大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：R751

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