強脈沖光對成纖維細胞分泌TGF-β1的影響及信號通路研究
本文選題:強脈沖光 + 成纖維細胞 ; 參考:《中南大學》2010年碩士論文
【摘要】: 目的通過強脈沖光(Intense Pulsed Light, IPL)對成纖維細胞分泌轉(zhuǎn)化生長因子-β1 (transforming growth factor-β1, TGF-β1)的影響以及信號通路的研究,進一步探討IPL治療皮膚光老化的分子生物學機制。 方法分離培養(yǎng)皮膚原代成纖維細胞。將實驗分為兩組,一組為IPL治療組,用能量密度分別為0 J/cm2(陰性對照)、10 J/cm2、18 J/cm2、27 J/cm2、36 J/cm2和36 J/cm2x2(36 J/cm2的IPL重復治療兩次)的IPL照射,另一組為IPL+抑制劑組,包括IPL(對照),IPL+SP600125(JNK抑制劑),IPL+SB203580(P38抑制劑),在加入抑制劑處理2h后,均用能量密度為36 J/cm2的IPL照射。采用ELISA法檢測兩組細胞培養(yǎng)上清液(cultural supernatants, CS)中TGF-β1的濃度,Western印跡法檢測IPL治療組p-JNK(磷酸化的JNK)和p-P38(磷酸化的P38)的表達。 結(jié)果 1.兩組CS中TGF-β1的濃度 ①.IPL治療組CS中TGF-β1的濃度:IPL治療組CS中TGF-β1的濃度在10 J/cm2,18 J/cm2,27 J/cm2,36 J/cm2與陰性對照相比均下降(P0.05),有顯著統(tǒng)計學差異,在36 J/cm2與陰性對照相比均下降(P0.05),但無統(tǒng)計學差異,在36 J/cm2x2與陰性對照相比升高(P0.05),有顯著統(tǒng)計學差異。 ②.IPL+抑制劑組CS中TGF-β1的濃度:IPL+SP600125組TGF-β1的濃度與對照相比下降(P0.05);IPL+SB203580與對照相比有明顯升高(P0.05),均有顯著統(tǒng)計學差異。 2.IPL治療組中p-JNK和p-P38的表達:p-JNK和p-P38信號均先增強后減弱,10J/cm2最強,18J/cm2開始減弱,以后明顯減弱。 結(jié)論 1.IPL在較低能量密度時抑制皮膚成纖維細胞TGF-β1的分泌,較高能量密度時能促進TGF-β1的分泌。 2.P38、JNK激酶在IPL影響成纖維細胞分泌TGF-β1的過程中起重要作用,IPL可能通過JNK途徑上調(diào)皮膚成纖維細胞TGF-β1的分泌,通過P38途徑下調(diào)TGF-β1的分泌。
[Abstract]:Objective to investigate the molecular biological mechanism of intense pulsed light (IPL) on the secretion of transforming growth factor 尾 1 (transforming growth factor- 尾 1 (TGF- 尾 1) in fibroblasts and its signal pathway. Methods Primary fibroblasts were isolated and cultured. The experiment was divided into two groups: one group was treated with IPL, and the other group was treated with IPL with energy density of 10 J / cm 2 10 J / cm 2, 18 J / cm 2, 27 J / cm 2, 36 J / cm 2 and 36 J / cm 2 (36 J / cm 2 repeated IPL treatment twice), and the other group was treated with IPL inhibitor. IPL SB203580 (P38 inhibitor), including IPL (control) IPL SP600125 (JNK inhibitor), was irradiated with IPL with an energy density of 36 J / cm2 for 2 h. The expression of p-JNK (phosphorylated JNK) and p-P38 (phosphorylated P38) in cultured supernatant of two groups were detected by Elisa and Western blot. Result 1. The concentration of TGF- 尾 1 in CS of IPL treatment group: the concentration of TGF- 尾 1 in CS of IPL treatment group was significantly lower than that of negative control group at 10 J / cm 2, 18 J / cm 2, 27 J / cm 2 and 36 J / cm 2 (P0.05). There was no statistical difference between 36 J / cm2 and negative control (P0.05). The concentration of TGF- 尾 _ 1 in the control group was significantly higher than that in the negative control group (P0.05). 2. The concentration of TGF- 尾 _ 1 in the IPL inhibitor group was significantly lower than that in the control group (P0.05), and the concentration of TGF- 尾 _ 1 in the control group was significantly lower than that in the control group (P0.05). IPL SB203580 significantly increased compared with the control group (P0.05). 2. The expression of p-JNK and p-P38 in IPL treatment group was increased first, then decreased. Conclusion 1. IPL inhibited the secretion of TGF- 尾 1 in skin fibroblasts at low energy density. 2. P38 JNK kinase plays an important role in the effect of IPL on the secretion of TGF- 尾 1 by fibroblasts. IPL may up-regulate the secretion of TGF- 尾 1 by skin fibroblasts through JNK pathway. The secretion of TGF- 尾 1 was down-regulated by P38 pathway.
【學位授予單位】:中南大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2010
【分類號】:R758.1
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,本文編號:2115057
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