人皮膚成纖維細(xì)胞衰老過(guò)程中表觀遺傳學(xué)相關(guān)基因表達(dá)的初步研究
本文選題:表觀遺傳學(xué) + 成纖維細(xì)胞; 參考:《中南大學(xué)》2010年碩士論文
【摘要】: 目的探討多種表觀遺傳學(xué)相關(guān)基因在人皮膚成纖維細(xì)胞自然衰老和氧化應(yīng)激誘導(dǎo)衰老過(guò)程中的表達(dá)差異及意義。 方法提取年輕組(16歲以下)及衰老組(55歲以上)人皮膚成纖維細(xì)胞中總RNA(自然衰老模型)及亞致死量H2O2處理誘導(dǎo)衰老組與未處理年輕對(duì)照組人皮膚成纖維細(xì)胞總RNA(氧化應(yīng)激誘導(dǎo)衰老模型),分別通過(guò)逆轉(zhuǎn)錄合成cDNA,利用倍比稀釋法建立表觀遺傳性相關(guān)催化酶基因EZH2、Bmi-1、JMJD3、DNMT1、MLL1和內(nèi)參基因β-actin的標(biāo)準(zhǔn)曲線,選用104濃度梯度進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)其基因表達(dá)水平的差異。 結(jié)果在各實(shí)驗(yàn)組中,PCR產(chǎn)物的濃度在(1.0×10-2)-(1.0×10-7)范圍時(shí),上述目的基因與內(nèi)參基因均得到一條平滑的擴(kuò)增曲線,模板濃度與可檢測(cè)的熒光信號(hào)的循環(huán)數(shù)之間呈負(fù)相關(guān)。在自然衰老模型和氧化應(yīng)激誘導(dǎo)衰老模型中,衰老組的EZH2、Bmi-1及DNMT1基因表達(dá)水平要顯著低于年輕組(P0.05),JMJD3、MLL1無(wú)明顯差異(P0.05)。 結(jié)論EZH2、Bmi-1及DNMT1基因在人皮膚成纖維細(xì)胞衰老過(guò)程中含量逐漸下降,在皮膚成纖維細(xì)胞衰老過(guò)程中起到重要的作用。
[Abstract]:Objective to investigate the expression differences and significance of several epigenetic related genes in natural senescence of human skin fibroblasts and oxidative stress induced senescence. Methods Total RNA (natural aging model) of human skin fibroblasts was extracted from young group (under 16 years old) and senescent group (over 55 years old), and the total number of human skin fibroblasts in aging group and untreated control group was induced by H2O2. RNA (oxidative stress induced senescence model) was used to synthesize cDNAs by reverse transcription, and the standard curves of EZH2Bmi-1, JMJD3DNMT1MLL1 and 尾 -actin were established by double dilution method. The difference of gene expression level was detected by real-time fluorescence quantitative PCR with 104 concentration gradient. Results when the concentration of PCR products was in the range of (1.0 脳 10 ~ (-2)-(1.0 脳 10 ~ (-7), a smooth amplification curve was obtained between the target gene and the internal reference gene, and there was a negative correlation between the template concentration and the cycle number of the detectable fluorescence signal. In natural senescence model and oxidative stress induced senescence model, the expression levels of EZH2OBmi-1 and DNMT1 gene in aging group were significantly lower than those in young group (P0.05) and JMJD3MLL1 had no significant difference (P0.05). Conclusion EZH2 Bmi-1 and DNMT1 genes decrease gradually during the senescence of human skin fibroblasts and play an important role in the process of skin fibroblast senescence.
【學(xué)位授予單位】:中南大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2010
【分類(lèi)號(hào)】:R751
【共引文獻(xiàn)】
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,本文編號(hào):2088425
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