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shWnt5a重組慢病毒的制備及其對黑素瘤細胞侵襲的抑制作用

發(fā)布時間:2018-06-21 19:25

  本文選題:黑素瘤細胞 + 慢病毒; 參考:《細胞與分子免疫學雜志》2014年05期


【摘要】:目的構建下調(diào)人Wnt5a基因表達的重組質(zhì)粒并制備重組慢病毒,感染黑素瘤細胞后,觀察其對該細胞侵襲的影響。方法構建下調(diào)人Wnt5a基因表達的重組質(zhì)粒pLKO.1-shWnt5a,利用pLKO.1慢病毒包裝系統(tǒng)和HEK293T細胞包裝、制備攜帶shWnt5a的重組慢病毒顆粒,并感染W(wǎng)M793B黑素瘤細胞,建立穩(wěn)定低表達Wnt5a的WM793BWnt5a-黑素瘤細胞株。采取細胞遷移與侵襲實驗檢測Wnt5a對黑素瘤細胞侵襲的影響。結果成功制備了攜帶shWnt5a的重組慢病毒,建立低表達Wnt5a的穩(wěn)定轉染細胞株WM793BWnt5a-,細胞遷移與侵襲實驗證明抑制Wnt5a基因的表達可以顯著抑制黑素瘤的侵襲能力。結論下調(diào)Wnt5a基因的表達對黑素瘤的侵襲能力有明顯的抑制作用。
[Abstract]:Objective to construct a recombinant plasmid that down-regulates the expression of human Wnt5a gene and prepare a recombinant lentivirus. After infected with melanoma cells, the effect of recombinant lentivirus on the invasion of human Wnt5a cells was observed. Methods Recombinant plasmid pLKO.1-shWnt5awas constructed, and pLKO.1 lentivirus packaging system and HEK293T cell packaging system were used to prepare recombinant lentivirus particles carrying shWnt5a and infect WM793B melanoma cells. WM793BWnt5a-melanoma cell line with low expression of Wnt5a was established. The effect of Wnt5a on the invasion of melanoma cells was detected by cell migration and invasion assay. Results Recombinant lentivirus carrying shWnt5a was successfully prepared, and a stable transfected cell line WM793BWnt5a-expressing Wnt5a was established. Cell migration and invasion experiments showed that inhibiting the expression of Wnt5a gene could significantly inhibit the invasion ability of melanoma. Conclusion down-regulation of Wnt5a gene can inhibit the invasion of melanoma.
【作者單位】: 第四軍醫(yī)大學西京醫(yī)院皮膚科;第四軍醫(yī)大學生物化學與分子生物學教研室;
【基金】:國家自然科學基金(81072235)
【分類號】:R739.5

【參考文獻】

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