本文選題：黑素瘤細(xì)胞 + 慢病毒��； 參考：《細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志》2014年05期

【摘要】：目的構(gòu)建下調(diào)人Wnt5a基因表達(dá)的重組質(zhì)粒并制備重組慢病毒,感染黑素瘤細(xì)胞后,觀察其對(duì)該細(xì)胞侵襲的影響。方法構(gòu)建下調(diào)人Wnt5a基因表達(dá)的重組質(zhì)粒pLKO.1-shWnt5a,利用pLKO.1慢病毒包裝系統(tǒng)和HEK293T細(xì)胞包裝、制備攜帶shWnt5a的重組慢病毒顆粒,并感染W(wǎng)M793B黑素瘤細(xì)胞,建立穩(wěn)定低表達(dá)Wnt5a的WM793BWnt5a-黑素瘤細(xì)胞株。采取細(xì)胞遷移與侵襲實(shí)驗(yàn)檢測(cè)Wnt5a對(duì)黑素瘤細(xì)胞侵襲的影響。結(jié)果成功制備了攜帶shWnt5a的重組慢病毒,建立低表達(dá)Wnt5a的穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞株WM793BWnt5a-,細(xì)胞遷移與侵襲實(shí)驗(yàn)證明抑制Wnt5a基因的表達(dá)可以顯著抑制黑素瘤的侵襲能力。結(jié)論下調(diào)Wnt5a基因的表達(dá)對(duì)黑素瘤的侵襲能力有明顯的抑制作用。
[Abstract]:Objective to construct a recombinant plasmid that down-regulates the expression of human Wnt5a gene and prepare a recombinant lentivirus. After infected with melanoma cells, the effect of recombinant lentivirus on the invasion of human Wnt5a cells was observed. Methods Recombinant plasmid pLKO.1-shWnt5awas constructed, and pLKO.1 lentivirus packaging system and HEK293T cell packaging system were used to prepare recombinant lentivirus particles carrying shWnt5a and infect WM793B melanoma cells. WM793BWnt5a-melanoma cell line with low expression of Wnt5a was established. The effect of Wnt5a on the invasion of melanoma cells was detected by cell migration and invasion assay. Results Recombinant lentivirus carrying shWnt5a was successfully prepared, and a stable transfected cell line WM793BWnt5a-expressing Wnt5a was established. Cell migration and invasion experiments showed that inhibiting the expression of Wnt5a gene could significantly inhibit the invasion ability of melanoma. Conclusion down-regulation of Wnt5a gene can inhibit the invasion of melanoma.
【作者單位】： 第四軍醫(yī)大學(xué)西京醫(yī)院皮膚科;第四軍醫(yī)大學(xué)生物化學(xué)與分子生物學(xué)教研室;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金(81072235)
【分類號(hào)】：R739.5

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2049756