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體外培養(yǎng)的人惡性黑色素瘤球體細胞干細胞特性觀察

發(fā)布時間:2018-06-02 13:32

  本文選題:黑色素瘤 + 腫瘤干細胞; 參考:《山東醫(yī)藥》2016年19期


【摘要】:目的觀察體外培養(yǎng)的人惡性黑色素瘤球體細胞的干細胞特性。方法利用無血清培養(yǎng)基培養(yǎng)人惡性黑色素瘤A375細胞系,獲得黑色素瘤球體細胞(球體組)和普通貼壁細胞(貼壁組)。采用Transwell小室檢測兩組細胞遷移能力。采用免疫熒光法檢測兩組細胞中的CD20、CD133。取BALB/c小鼠16只,分實驗組和對照組(各8只),于小鼠肩胛骨處皮下分別注射球體組、貼壁組細胞各1 m L(10~4個細胞),觀察并比較兩組細胞致瘤能力。6周后處死小鼠,取瘤。結果 A375細胞接種于無血清培養(yǎng)基后,可見小的類圓形懸浮細胞球形成并逐漸變大,球內細胞連接緊密,折光性好。球體組細胞遷移能力及細胞中CD20、CD133表達強度均高于貼壁組。注射細胞6周后,實驗組小鼠均長出較大腫瘤,對照組小鼠均未見腫瘤生長。取實驗組小鼠的腫瘤組織行HE染色,病理診斷為惡性黑色素瘤。結論體外培養(yǎng)的人惡性黑色素瘤球體細胞具有干細胞特性,遷移能力和致瘤能力強,高表達免疫標記CD20、CD133,惡性黑色素瘤存在腫瘤干細胞。
[Abstract]:Objective to observe the stem cell characteristics of human malignant melanoma cells cultured in vitro. Methods Human malignant melanoma cell line A375 was cultured in serum-free medium and the spherical melanoma cells (spherical group) and common adherent cells (adherent group) were obtained. The migration ability of the two groups was measured by Transwell chamber. CD20 and CD133 were detected by immunofluorescence assay. Sixteen BALB/c mice were divided into experimental group (n = 8) and control group (n = 8). The mice were injected subcutaneously into the shoulder scapula of the experimental group and the adherent group were injected with 10 ~ 4 cells respectively. The tumorigenic ability of the two groups was observed and compared. After 6 weeks, the mice were killed and the tumor was removed. Results after A375 cells were inoculated in serum-free medium, the small round suspension cell spheres were formed and gradually enlarged, the cells in the spheres were closely connected, and the refraction was good. The cell migration ability and the expression of CD20 + CD133 in the spherical group were higher than those in the adherent group. After 6 weeks of injection, the mice in the experimental group all developed large tumors, while the control mice did not see the tumor growth. The tumor tissues of the experimental group were stained with HE and diagnosed as malignant melanoma by pathology. Conclusion the cultured human malignant melanoma corpuscle cells have the characteristics of stem cells, strong ability of migration and tumorigenesis, high expression of CD20 and CD133. malignant melanoma has tumor stem cells.
【作者單位】: 南昌大學第一附屬醫(yī)院;
【基金】:江西省科技支撐計劃項目(2010BSA14600)
【分類號】:R739.5

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本文編號:1968940


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