本文關(guān)鍵詞：XPD基因的克隆及其在惡性黑素瘤細胞中的表達，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

《大連醫(yī)科大學(xué)》 2012年

XPD基因的克隆及其在惡性黑素瘤細胞中的表達

王月  

【摘要】：背景： XPD是核酸切除修復(fù)過程的主要蛋白，因此XPD與腫瘤的關(guān)系越來越受到研究者的重視。因此XPD與腫瘤的關(guān)系越來越受到研究者的重視。對皮膚惡性黑素瘤基因易感性分子機制的研究表明XPD是皮膚惡性黑素瘤易感的生物標(biāo)志。DNA修復(fù)酶的調(diào)控，是預(yù)防腫瘤和治療的關(guān)鍵，HIF-1在參與調(diào)控XPD修復(fù)中起著重要作用，增加了HIF1和sp1他們重疊的結(jié)合位點之間的競爭，紫外線誘導(dǎo)的磷酸化增強了HIF-1蛋白直接結(jié)果，而XPD基因啟動子取悅的HRE，在編碼DNA修復(fù)蛋白的基因中，是DNA修復(fù)機制的一個關(guān)鍵調(diào)節(jié)機制。在XPD基因中的DNA修復(fù)因子TFIIH存在亞基突變。許多人著色性干皮病患者的致病與XPD點突變R683W有著某種關(guān)聯(lián)。然而，有明顯的異質(zhì)性，有研究對XPD基因中的TFIIH酶功能的突變的效果發(fā)現(xiàn)，每一個突變，表現(xiàn)出獨特的生化屬性。XPD751密碼子的Gln/Gln基因型是男性惡性黑素瘤高風(fēng)險的有意義基因標(biāo)志，Lys/Gln基因型對預(yù)測惡性黑素瘤惡化有重要意義。在本實驗中，，我們克隆了XPD，構(gòu)建了pEGFP-N1/XPD及pcDNA3.1(+)/XPD重組表達質(zhì)粒，并轉(zhuǎn)染至人惡性黑素瘤細胞，觀察它們的表達情況及其在惡性黑素瘤細胞內(nèi)定位，利用MTT檢測細胞的增殖力，以討論XPD對惡性黑素瘤細胞的生物學(xué)影響及其可能的功能。 目的：克隆XPD基因并探討其在惡性黑素瘤細胞內(nèi)的定位及其功能。 方法：克隆出人全長XPD cDNA，將該基因構(gòu)建入pEGFP-N1/XPD質(zhì)粒，利用脂質(zhì)體法轉(zhuǎn)染pEGFP-N1/XPD及pcDNA3.1(+)/XPD至人惡性黑素瘤A375細胞，檢測XPD蛋白的表達，然后利用GM130和KDEL進行染色，觀察基因XPD的細胞定位。細胞增殖力檢測使用MTT法。 結(jié)果：1.培養(yǎng)Hela細胞并進行RNA逆轉(zhuǎn)錄，PCR克隆了人全長XPD cDNA，電泳在約1234bp處見條帶。2.將XPD基因連入PEGFP載體并測序鑒定，測序結(jié)果與GenBank中人XPD進行比對，結(jié)果一致。4. XPD在轉(zhuǎn)染細胞中的高表達。5. PEGFP/XPD重組質(zhì)粒定位于A375細胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中。6.與轉(zhuǎn)染pcDNA3.1(+)組和空白對照組相比，轉(zhuǎn)染pcDNA3.1(+)/XPD組惡性黑素瘤A375細胞數(shù)較少，XPDA375細胞的生長被XPD基因抑制。 結(jié)論：1.從Hela細胞中成功克隆出同源盒基因XPD。2.構(gòu)建pEGFP-N1/XPD質(zhì)粒。3.用免疫熒光染色證實XPD基因定位于惡性黑素瘤A375細胞的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中。4. A375細胞的生長被XPD基因抑制。

【關(guān)鍵詞】：
【學(xué)位授予單位】：大連醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2012
【分類號】：R739.5
【目錄】：

下載全文 更多同類文獻

CAJ全文下載

(如何獲取全文？ 歡迎：購買知網(wǎng)充值卡、在線充值、在線咨詢)

CAJViewer閱讀器支持CAJ、PDF文件格式

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 王平,畢志剛;UVB誘發(fā)皮膚癌的分子機制研究進展[J];國外醫(yī)學(xué).皮膚性病學(xué)分冊;2005年01期

2 Alan DOMBKOWSKI,Lynn CHUANG;The involvement of XPC protein in the cisplatin DNA damaging treatment-mediated cellular response[J];Cell Research;2004年04期

3 李艷茹;王曉彥;;中波紫外線與皮膚鱗狀細胞癌發(fā)生機制研究進展[J];醫(yī)學(xué)綜述;2008年19期

【共引文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 李雄;;1961-2007年期間南寧紫外線輻射的變化趨勢及其與皮膚癌發(fā)病相關(guān)分析[J];城市環(huán)境與城市生態(tài);2009年01期

2 倪昌雯;黃玲;王敏華;黃靜;;窄譜UVB治療皮膚病201例不良反應(yīng)的觀察與處理[J];大理學(xué)院學(xué)報;2009年10期

3 劉芷寧;劉馨;;非小細胞肺癌RRM1、ERCC1的表達及對含鉑化療方案預(yù)后的影響[J];重慶醫(yī)學(xué);2014年09期

4 李培;康曉征;陳克能;;ERCC1、RRM1和TS在非小細胞肺癌中的臨床意義[J];中國肺癌雜志;2014年06期

5 Maimon C.Rose;Elina Kostyanovskaya;R.Stephanie Huang;;Pharmacogenomics of Cisplatin Sensitivity in Non-small Cell Lung Cancer[J];Genomics,Proteomics & Bioinformatics;2014年05期

6 張淑娟;劉寧;代曉明;李逸松;;皮膚鱗癌動物模型構(gòu)建[J];昆明醫(yī)學(xué)院學(xué)報;2009年S2期

7 朱東寧;簡強;薛柯;劉博強;王玲;李承新;;UVB照射對PIG1細胞增殖活性的影響[J];中國美容醫(yī)學(xué);2011年06期

8 田玉旺;許春偉;高文斌;張玉萍;張博;;非小細胞肺癌ROS1融合基因與ERCC1和RRM1基因mRNA表達的關(guān)系[J];解放軍醫(yī)藥雜志;2014年09期

9 王參智;羅林;;XRCC1基因在腦膠質(zhì)瘤中的表達[J];遼寧醫(yī)學(xué)院學(xué)報;2015年01期

10 王雷;李愛國;劉慶熠;賈金明;欒艷超;杜媛鯤;;晚期非小細胞肺癌ERCC1基因表達量的臨界值研究及驗證[J];臨床與實驗病理學(xué)雜志;2014年08期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 劉文輝;徐萍;盛利;;DNA修復(fù)基因多態(tài)性與非小細胞肺癌鉑類化療療效的相關(guān)性[A];2013年中國藥學(xué)大會暨第十三屆中國藥師周論文集[C];2013年

2 劉文輝;徐萍;盛利;;DNA修復(fù)基因多態(tài)性與非小細胞肺癌鉑類化療療效的相關(guān)性[A];第十三屆全國青年藥師成才之路論壇暨抗腫瘤藥物合理應(yīng)用與臨床藥學(xué)實踐國家級繼教會議論文集[C];2014年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 楊鎮(zhèn)洲;組織特異的APE1siRNA載體增強多發(fā)性骨髓瘤化療敏感性實驗研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2005年

2 陳斌;紫外線輻射對皮膚細胞作用的蛋白質(zhì)組學(xué)研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2006年

3 王瑞;DNA雙鏈斷裂修復(fù)基因XRCC2和XRCC5多態(tài)性與肺癌關(guān)系的研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2007年

4 陳宏泉;Tempol抗中波紫外線照射所致皮膚光老化的作用機制及影響因素的探討[D];山東大學(xué);2008年

5 張青;有機（聚合物）/無機復(fù)合材料的設(shè)計、制備與表征[D];吉林大學(xué);2010年

6 支軼;膀胱癌XPC表達缺失參與影響染色體畸變的分子機制研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2012年

7 李群;Survivin的下調(diào)對內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激誘導(dǎo)的黑色素瘤細胞凋亡抗性的影響機制研究[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2012年

8 徐瀟靜;eIF3a和CTR1基因變異與肺癌患者鉑類化療藥物反應(yīng)差異及預(yù)后的相關(guān)性研究[D];中南大學(xué);2013年

9 劉海波;DNA修復(fù)基因多態(tài)性與膠質(zhì)瘤發(fā)病相關(guān)關(guān)系研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2014年

10 錢程遠;APE1小分子抑制劑的篩選鑒定及其抗腫瘤活性研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2014年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 邱立新;XRCC1、ADPRT基因多態(tài)性和TS基因表達與惡性腫瘤化療敏感性關(guān)系的實驗和循證醫(yī)學(xué)研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2009年

2 張淑娟;紫外線誘導(dǎo)裸鼠皮膚鱗癌動物模型的構(gòu)建[D];昆明醫(yī)學(xué)院;2011年

3 陳晶;非甾體抗炎藥對中波紫外線誘導(dǎo)小鼠皮膚免疫抑制的影響[D];中國醫(yī)科大學(xué);2007年

4 鄧芳;XPGC46T單核苷酸多態(tài)與晚期結(jié)直腸癌對奧沙利鉑化療敏感性的關(guān)系[D];青島大學(xué);2009年

5 朱曉玲;DNA修復(fù)基因hOGG1、XPC和XPA多態(tài)性與食管鱗狀細胞癌易感性關(guān)系的研究[D];華中科技大學(xué);2008年

6 魏丹;二苯甲酰甲烷及其衍生物的合成新方法與性能研究[D];廣東藥學(xué)院;2009年

7 王玉林;漢麻植物成分防曬性能研究及其在軍用防曬護膚品中的應(yīng)用[D];廣東海洋大學(xué);2013年

8 孫海燕;DNA修復(fù)基因遺傳多態(tài)性與上皮性卵巢癌患者鉑類化療臨床預(yù)后關(guān)系的研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2013年

9 鄭澤斌;采用表達譜芯片篩選初治非小細胞肺癌含鉑方案化療敏感組與耐藥組之間的差異表達基因[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2013年

10 鄧雙年;晚期非小細胞肺癌BRCA1表達與順鉑化療療效關(guān)系及預(yù)后分析[D];遵義醫(yī)學(xué)院;2013年

【二級參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 張丹英;趙晶;雷艷霞;;Fas/FasL系統(tǒng)與鈣、硒、碘及ROS的關(guān)系研究[J];國外醫(yī)學(xué)(醫(yī)學(xué)地理分冊);2006年04期

2 閔瑋,駱丹;中波紫外線與皮膚惡性腫瘤發(fā)生機制的研究進展[J];國外醫(yī)學(xué).皮膚性病學(xué)分冊;2004年03期

3 王平,畢志剛;UVB誘發(fā)皮膚癌的分子機制研究進展[J];國外醫(yī)學(xué).皮膚性病學(xué)分冊;2005年01期

4 尹銳,石永誠;紫外線誘導(dǎo)皮膚腫瘤形成的分子學(xué)機制[J];國外醫(yī)學(xué)(腫瘤學(xué)分冊);2001年04期

5 齊蕊,王勤;Fas/FasL系統(tǒng)對腫瘤細胞凋亡失效的研究進展[J];國外醫(yī)學(xué)(腫瘤學(xué)分冊);2004年S1期

6 徐晶;駱丹;周炳榮;郝曉幀;馬全紅;顧寧;張曉軍;余美玲;;表沒食子兒茶素沒食子酸酯對紫外線輻射后小鼠表皮細胞凋亡的影響[J];臨床皮膚科雜志;2006年12期

7 張軍,張敬,石紅軍,黃小波,郭超,李卓權(quán);茶多酚對紫外線引起的DNA損傷的保護作用[J];同濟大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2004年02期

8 張瑞;王曉彥;;Fas/FasL與皮膚腫瘤的相關(guān)性研究進展[J];醫(yī)學(xué)綜述;2008年07期

9 駱丹;徐麗賢;繆旭;林向飛;吉璽;朱潔;;表沒食子兒茶素沒食子酸酯下調(diào)紫外線誘導(dǎo)小鼠皮膚TNF-α mRNA及p53蛋白水平的研究[J];中草藥;2006年09期

10 張軍,張敬,石紅軍,黃小波,王昆侖,郭超,李卓權(quán);硒和維生素E對紫外線引起DNA損傷的保護作用[J];中國公共衛(wèi)生;2003年08期

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 龍朝欽,鄧軍,鐘白玉,郝飛;5-氨基酮戊酸光動力效應(yīng)對體外培養(yǎng)人惡性黑素瘤細胞的物理學(xué)干預(yù)特征[J];中國臨床康復(fù);2005年10期

2 李雅琳;焦振山;張玉環(huán);劉棟;;梔子苷、黃芩苷、華蟾酥毒基對體外培養(yǎng)的B16惡性黑素瘤細胞細胞增殖的抑制作用[J];中國中西醫(yī)結(jié)合皮膚性病學(xué)雜志;2007年04期

3 余德厚,陸洪光,程波,吳承龍,牟霞,汪宇;金黃色葡萄球菌腸毒素A對B16惡性黑素瘤細胞的殺傷作用[J];中華皮膚科雜志;2004年10期

4 涂亞庭,陶娟,黃長征,張杏平,張麗霞,沈關(guān)心;血管內(nèi)皮生長因子-siRNA對惡性黑素瘤細胞生長的抑制作用[J];中華皮膚科雜志;2005年05期

5 權(quán)錦花;高明陽;;MCL-1反義寡核苷酸轉(zhuǎn)染惡性黑素瘤細胞的光鏡和電鏡觀察[J];中國皮膚性病學(xué)雜志;2007年10期

6 田羽;;抗體截獲皮癌細胞[J];國外醫(yī)學(xué)情報;1988年23期

7 侯麥花,朱文元,盧新政;三氧化二砷對小鼠惡性黑素瘤細胞Cloudman S91的作用[J];中華皮膚科雜志;2004年04期

8 余晶晶,盛晚香,魯英,王玉,余月英,黃霞;腺病毒介導(dǎo)p27mt基因轉(zhuǎn)移誘導(dǎo)惡性黑素瘤細胞凋亡的實驗研究[J];中國麻風(fēng)皮膚病雜志;2005年09期

9 殷河慧;廖文俊;王巖;謝楊新;高天文;;RNA干擾技術(shù)抑制人惡性黑素瘤細胞A375中淋巴樣增強因子mRNA及蛋白表達[J];中華皮膚科雜志;2006年04期

10 林萬蓮;用抗體治療皮膚癌[J];廣東醫(yī)學(xué);1989年02期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 李雅琳;焦振山;張玉環(huán);劉棟;;梔子苷對體外培養(yǎng)的B16惡性黑素瘤細胞的分化誘導(dǎo)和促凋亡作用[A];中華醫(yī)學(xué)會第十五次全國皮膚性病學(xué)術(shù)會議論文集[C];2009年

2 李春英;高天文;李廷慧;孫東杰;李強;高鴿;劉玉峰;;人酪氨酸酶相關(guān)蛋白1(TRP1)編碼基因反義核酸對人黑素細胞及惡性黑素瘤細胞影響的研究[A];2003中國中西醫(yī)結(jié)合皮膚性病學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2003年

3 吳麗莎;唐麗梅;李岱;趙爽;陽丹雯;粟娟;匡葉紅;陳翔;;白黎蘆醇通過上調(diào)miR-492抑制CD147的表達而促進惡性黑素瘤細胞的凋亡[A];中華醫(yī)學(xué)會第十八次全國皮膚性病學(xué)術(shù)年會論文匯編[C];2012年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 高明陽;聯(lián)合應(yīng)用反義Bcl-x1和反義Mcl-1寡核苷酸對惡性黑素瘤細胞耐藥性影響的研究[D];大連醫(yī)科大學(xué);2006年

2 龍婷婷;CD147與CAML在惡性黑素瘤細胞中的相互作用研究[D];中南大學(xué);2013年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 王月;XPD基因的克隆及其在惡性黑素瘤細胞中的表達[D];大連醫(yī)科大學(xué);2012年

2 翟瑞峰;RNAi沉默WT1基因逆轉(zhuǎn)惡性黑素瘤細胞耐藥性的研究[D];大連醫(yī)科大學(xué);2009年

3 權(quán)錦花;MCL-1反義寡核苷酸對惡性黑素瘤細胞多藥耐藥性影響的研究[D];大連醫(yī)科大學(xué);2006年

4 羅鐘玲;CD147與NDUFS6結(jié)合對惡性黑素瘤細胞線粒體功能和凋亡的影響[D];中南大學(xué);2013年

5 高田原;CD147與GLUT1在人惡性黑素瘤細胞中相互作用的研究[D];中南大學(xué);2014年

6 陳恒君;DKK1對惡性黑素瘤細胞A375增殖影響的初步研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2010年

7 王艷;聯(lián)合應(yīng)用反義Bcl-xl和反義Mcl-1寡核苷酸對惡性黑素瘤細胞多藥耐藥性影響的研究[D];大連醫(yī)科大學(xué);2007年

8 蔣明浩;CD147對惡性黑色素瘤細胞中GLUT-1、4表達和功能的影響[D];中南大學(xué);2012年

9 馬慧芳;聯(lián)合應(yīng)用WT1-siRNA和人參皂甙Rg3對惡性黑素瘤細胞WM451耐藥性的逆轉(zhuǎn)[D];大連醫(yī)科大學(xué);2010年

10 王正想;PPO基因沉默對人惡性黑素瘤細胞A375增殖影響的實驗研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2011年

  本文關(guān)鍵詞：XPD基因的克隆及其在惡性黑素瘤細胞中的表達，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：192668