本文選題：著色性干皮病基因D + HepG細胞　； 參考：《中國病理生理雜志》2014年01期

【摘要】：目的:探討人剪切修復(fù)基因著色性干皮病基因D(xeroderma pigmentosum D,XPD)對肝癌細胞鼠雙微體2(murine double minute 2,Mdm2)和鼠雙微體4(murine double minute 4,Mdm4)表達的影響。方法:用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法將重組質(zhì)粒pEGFP-N2/XPD和空載質(zhì)粒pEGFP-N2轉(zhuǎn)染進入人肝癌細胞株HepG2,實驗分為3組:(1)空白對照組;(2)pEGFP-N2組;(3)pEGFP-N2/XPD組。用MTT法觀察細胞的增殖活力;用流式細胞術(shù)檢測細胞周期和凋亡率;用RT-PCR和Western blotting檢測XPD、Mdm2、Mdm4和P53表達量的變化。結(jié)果:MTT結(jié)果顯示,重組質(zhì)粒pEGFP-N2/XPD的轉(zhuǎn)染抑制了肝癌細胞的增殖活力;流式細胞術(shù)結(jié)果顯示,重組質(zhì)粒pEGFP-N2/XPD的轉(zhuǎn)染引起了G1期細胞增加,S期減少,凋亡率增加。RT-PCR和Western blotting檢測發(fā)現(xiàn),重組質(zhì)粒pEGFP-N2/XPD的轉(zhuǎn)染使得XPD表達增高,同時使得Mdm2和Mdm4表達降低,P53表達增高。結(jié)論:XPD能下調(diào)肝癌細胞中Mdm2和Mdm4的表達,上調(diào)P53表達,并能抑制肝癌細胞增殖及誘導(dǎo)其凋亡。
[Abstract]:Aim: to investigate the effects of human shearing repair gene (D(xeroderma pigmentosum DX PDD) on the expression of 2(murine double minute _ 2 (Mdm2) and 4(murine double minute _ 4 (Mdm4) in hepatoma cells. Methods: recombinant plasmid pEGFP-N2/XPD and empty plasmid pEGFP-N2 were transfected into human hepatoma cell line HepG2 by liposome transfection. The proliferative activity was observed by MTT assay, the cell cycle and apoptosis rate were detected by flow cytometry, and the expression of Mdm4 and p53 were detected by RT-PCR and Western blotting. Results the transfection of recombinant plasmid pEGFP-N2/XPD inhibited the proliferative activity of hepatoma cells, and the flow cytometry showed that the transfection of recombinant plasmid pEGFP-N2/XPD resulted in the increase of S phase and the increase of apoptosis rate. RT-PCR and Western blotting analysis showed that the transfection of recombinant plasmid pEGFP-N2/XPD inhibited the proliferation of hepatoma cells. The transfection of recombinant plasmid pEGFP-N2/XPD increased the expression of XPD and decreased the expression of Mdm2 and Mdm4. Conclusion: XPD can down-regulate the expression of Mdm2 and Mdm4, upregulate p53 expression, inhibit the proliferation and induce apoptosis of HCC cells.
【作者單位】： 南昌大學(xué)第二附屬醫(yī)院消化內(nèi)科;
【基金】：國家自然科學(xué)基金資助項目(No.81300348) 江西省教育廳科學(xué)技術(shù)研究項目(No.GJJ13158)
【分類號】：R758.58

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本文編號：1903579