本文選題：強(qiáng)脈沖光 + 成纖維細(xì)胞�。� 參考：《中南大學(xué)》2010年碩士論文

【摘要】： 目的 1.觀察強(qiáng)脈沖光對(duì)體外培養(yǎng)人皮膚成纖維細(xì)胞增殖的影響。 2.探討細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶(ERK)信號(hào)通路及轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β-1 (TGF-p1)在強(qiáng)脈沖光對(duì)成纖維細(xì)胞增殖影響中的作用。 方法 1.分離培養(yǎng)人正常皮膚成纖維細(xì)胞,采用角蛋白和Ⅰ、Ⅲ型膠原染色進(jìn)行成纖維細(xì)胞的鑒定。 2.采用不同能量強(qiáng)脈沖光照射成纖維細(xì)胞,光學(xué)顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化；四甲基偶氮唑鹽(MTT)法檢測(cè)各組細(xì)胞增殖情況；蛋白質(zhì)免疫印跡(western blot)法測(cè)定磷酸化ERK變化。 3.在抑制劑干預(yù)研究中,應(yīng)用ERK信號(hào)通路特異性抑制劑PD98059、PD98059+強(qiáng)脈沖光分別處理成纖維細(xì)胞,觀察成纖維細(xì)胞增殖及磷酸化ERK的變化。 4.采用不同能量強(qiáng)脈沖光照射成纖維細(xì)胞,酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)法檢測(cè)TGF-p1分泌變化。 結(jié)果 1.培養(yǎng)細(xì)胞具有成纖維細(xì)胞形態(tài),經(jīng)角蛋白染色陰性,Ⅰ、Ⅲ型膠原染色陽(yáng)性。 2.成纖維細(xì)胞經(jīng)強(qiáng)脈沖光照射后與未照射組在光學(xué)顯微鏡下比較形狀無明顯差異。與未照射組比較,照射后12、24及48小時(shí),10、18、27、36 J/cm2的強(qiáng)脈沖光對(duì)成纖維細(xì)胞增殖均無影響(P0.05)；當(dāng)能量為36J/cm2×2(36J/cm2連續(xù)照射2次)時(shí),細(xì)胞增殖活性于照射后24及48小時(shí)顯著增高(P0.05)。36J/cm2的強(qiáng)脈沖光對(duì)成纖維細(xì)胞磷酸化ERK無明顯影響,當(dāng)能量為36J/cm2×2時(shí)磷酸化ERK表達(dá)明顯減少。 3.與未照射組比較,PD98059能明顯抑制成纖維細(xì)胞的增殖和降低磷酸化ERK水平。 4.與未照射組比較,36J/cm2的強(qiáng)脈沖光對(duì)成纖維細(xì)胞TGF-β1分泌無明顯影響(P0.05),當(dāng)能量為36J/cm2×2時(shí),成纖維細(xì)胞TGF-β1分泌顯著增加(P0.05) 結(jié)論 強(qiáng)脈沖光照射可促進(jìn)體外培養(yǎng)的人皮膚成纖維細(xì)胞的增殖,其機(jī)制之一可能是通過促進(jìn)TGF-β1分泌而不是通過ERK信號(hào)通路。
[Abstract]:Purpose1.To observe the effect of intense pulsed light on the proliferation of human skin fibroblasts in vitro.2.To investigate the role of extracellular signal-regulated kinase (ERK) signaling pathway and transforming growth factor 尾 -1 (TGF-p1) in the proliferation of fibroblasts induced by intense pulsed light.Method1.Human normal skin fibroblasts were isolated and identified by keratin and collagen 鈪，

本文編號(hào)：1757591