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ERK信號通路及TGF-β1在強脈沖光對成纖維細胞增殖影響中的作用

發(fā)布時間:2018-04-16 06:03

  本文選題:強脈沖光 + 成纖維細胞 ; 參考:《中南大學(xué)》2010年碩士論文


【摘要】: 目的 1.觀察強脈沖光對體外培養(yǎng)人皮膚成纖維細胞增殖的影響。 2.探討細胞外信號調(diào)節(jié)激酶(ERK)信號通路及轉(zhuǎn)化生長因子β-1 (TGF-p1)在強脈沖光對成纖維細胞增殖影響中的作用。 方法 1.分離培養(yǎng)人正常皮膚成纖維細胞,采用角蛋白和Ⅰ、Ⅲ型膠原染色進行成纖維細胞的鑒定。 2.采用不同能量強脈沖光照射成纖維細胞,光學(xué)顯微鏡下觀察細胞形態(tài)學(xué)變化;四甲基偶氮唑鹽(MTT)法檢測各組細胞增殖情況;蛋白質(zhì)免疫印跡(western blot)法測定磷酸化ERK變化。 3.在抑制劑干預(yù)研究中,應(yīng)用ERK信號通路特異性抑制劑PD98059、PD98059+強脈沖光分別處理成纖維細胞,觀察成纖維細胞增殖及磷酸化ERK的變化。 4.采用不同能量強脈沖光照射成纖維細胞,酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)法檢測TGF-p1分泌變化。 結(jié)果 1.培養(yǎng)細胞具有成纖維細胞形態(tài),經(jīng)角蛋白染色陰性,Ⅰ、Ⅲ型膠原染色陽性。 2.成纖維細胞經(jīng)強脈沖光照射后與未照射組在光學(xué)顯微鏡下比較形狀無明顯差異。與未照射組比較,照射后12、24及48小時,10、18、27、36 J/cm2的強脈沖光對成纖維細胞增殖均無影響(P0.05);當(dāng)能量為36J/cm2×2(36J/cm2連續(xù)照射2次)時,細胞增殖活性于照射后24及48小時顯著增高(P0.05)。36J/cm2的強脈沖光對成纖維細胞磷酸化ERK無明顯影響,當(dāng)能量為36J/cm2×2時磷酸化ERK表達明顯減少。 3.與未照射組比較,PD98059能明顯抑制成纖維細胞的增殖和降低磷酸化ERK水平。 4.與未照射組比較,36J/cm2的強脈沖光對成纖維細胞TGF-β1分泌無明顯影響(P0.05),當(dāng)能量為36J/cm2×2時,成纖維細胞TGF-β1分泌顯著增加(P0.05) 結(jié)論 強脈沖光照射可促進體外培養(yǎng)的人皮膚成纖維細胞的增殖,其機制之一可能是通過促進TGF-β1分泌而不是通過ERK信號通路。
[Abstract]:Purpose1.To observe the effect of intense pulsed light on the proliferation of human skin fibroblasts in vitro.2.To investigate the role of extracellular signal-regulated kinase (ERK) signaling pathway and transforming growth factor 尾 -1 (TGF-p1) in the proliferation of fibroblasts induced by intense pulsed light.Method1.Human normal skin fibroblasts were isolated and identified by keratin and collagen 鈪,

本文編號:1757591

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