發(fā)布時(shí)間：2018-04-02 19:32

  本文選題：肥大細(xì)胞　切入點(diǎn)：白細(xì)胞介素(IL-)　出處：《細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志》2016年04期

【摘要】：目的檢測白細(xì)胞介素33(IL-33)對小鼠骨髓來源肥大細(xì)胞(BMMC)脫顆粒及細(xì)胞因子分泌的影響。方法原代培養(yǎng)小鼠BMMC,用(0、10、20、50)ng/m L的IL-33進(jìn)行刺激,分別收集細(xì)胞及培養(yǎng)上清。Western blot法檢測c-Kit表達(dá)水平;于收集的各IL-23處理組培養(yǎng)上清中分別加入β己糖胺酶底物,通過底物與β己糖胺酶反應(yīng)所得產(chǎn)物吸光度值,間接測定上清中β己糖胺酶含量。ELISA測定細(xì)胞上清液中組織胺含量評估肥大細(xì)胞脫顆粒情況;ELISA檢測培養(yǎng)細(xì)胞上清液中IL-1β、IL-6及腫瘤壞死因子α(TNF-α)的水平。結(jié)果 IL-33促進(jìn)BMMC的c-Kit表達(dá)。不同劑量的IL-33作用于BMMC 30 min后,可濃度依賴性地促進(jìn)β己糖胺酶及組織胺的釋放。IL-33作用于BMMC 24 h可促進(jìn)IL-1β分泌,以50 ng/m L IL-33時(shí)作用最顯著;IL-33可促進(jìn)IL-6分泌,以50 ng/m L濃度時(shí)作用最顯著;IL-33可促進(jìn)TNF-α分泌,以20 ng/m L濃度時(shí)作用最顯著。結(jié)論 IL-33可刺激BMMC脫顆粒,并分泌IL-1β、IL-6及TNF-α。
[Abstract]:Objective to detect interleukin 33 (IL-33) of mouse bone marrow-derived mast cell (BMMC) effect of degranulation and cytokine secretion. Methods primary cultured mouse BMMC, with ng/m L IL-33 (0,10,20,50) stimulation, the cells were collected and the supernatant of.Western blot were used to detect the expression level of c-Kit in the collection; all IL-23 treated cultured beta hexosaminidase substrates were added in the supernatant by substrate and beta hexosaminidase reaction products of absorbance, the indirect determination of evaluation of mast cells degranulation histamine content in the supernatant was determined.ELISA beta hexosaminidase content in the supernatant; ELISA detection of cell culture supernatant of IL-1 beta, and IL-6 tumor necrosis factor alpha (TNF- alpha) level. The results showed that IL-33 promotes BMMC expression of c-Kit. Different doses of IL-33 to BMMC 30 min after the release of.IL in a dose-dependent manner to promote beta hexosaminidase and amino groups The effect of -33 on BMMC 24 h can promote the secretion of IL-1 beta, with 50 ng/m L IL-33 is the most significant effect; IL-33 can promote the secretion of IL-6, with 50 ng/m L when the concentration of the most significant effect; IL-33 can promote TNF- secretion, with 20 ng/m concentration of L is the most significant. Conclusion IL-33 can stimulate the degranulation of BMMC, and the secretion of IL-1 beta, TNF- alpha and IL-6.

【作者單位】： 中國藥科大學(xué)新藥篩選中心;江南大學(xué)藥學(xué)院;
【基金】：十二五國家支撐計(jì)劃(2012BAI30B00)
【分類號】：R758.41

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本文編號：1701799