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樹突狀細(xì)胞與黑色素瘤細(xì)胞體外共培養(yǎng)體系對(duì)小鼠黑色素瘤形成的影響

發(fā)布時(shí)間:2018-03-13 23:41

  本文選題:黑色素瘤 切入點(diǎn):樹突狀細(xì)胞 出處:《山東醫(yī)藥》2017年05期  論文類型:期刊論文


【摘要】:目的探討樹突狀細(xì)胞(DC)與黑色素瘤細(xì)胞(B16)體外共培養(yǎng)后對(duì)小鼠黑色素瘤形成的影響。方法提取小鼠骨髓細(xì)胞,分化DC,培養(yǎng)至第6天,將細(xì)胞分為4組,脂多糖(LPS)組、聚肌胞[Poly(IC)]組、Melan-A抗原肽(Melan-A)組分別加入DC佐劑LPS(終濃度100 ng/m L)、Poly(IC)(終濃度20 ng/m L)、Melan-A抗原肽(終濃度5μmol/L)進(jìn)行處理,未處理組未進(jìn)行干預(yù)。采用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)DC成熟狀態(tài)。B16細(xì)胞與培養(yǎng)第6天的DC共培養(yǎng)2 d。取C57BL/6J小鼠皮下注射B16細(xì)胞(8只),DC+B16細(xì)胞(8只),LPS(8只)、poly(IC)(8只)、Melan-A抗原肽激活(8只)的DC+B16細(xì)胞,接種B16細(xì)胞1周再接種DC+B16細(xì)胞(5只),對(duì)照組(3只)不接種細(xì)胞。于接種第14天取部分小鼠處死,取脾臟,鏡下觀察其組織形態(tài);接種第28天測(cè)算腫瘤體積。結(jié)果 LPS組、Poly(IC)組、Melan-A組成熟DC多于未處理組。接種DC+B16細(xì)胞的小鼠未見腫瘤生長(zhǎng);接種第28天,與接種B16細(xì)胞的小鼠比較,接種LPS、poly(IC)、Melan-A抗原肽激活的DC+B16細(xì)胞及接種B16細(xì)胞1周再接種DC+B16細(xì)胞的小鼠腫瘤體積減小(P均0.05)。與對(duì)照組比較,第14天接種DC+B16細(xì)胞小鼠脾臟濾泡結(jié)構(gòu)無明顯變化,而接種B16細(xì)胞及LPS、poly(IC)、Melan-A抗原肽激活的DC+B16細(xì)胞小鼠,脾臟濾泡結(jié)構(gòu)增加。結(jié)論DC與B16共培養(yǎng)可抑制小鼠黑色素瘤的形成。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of dendritic cell (DC) co-culture with melanoma cell line (B16) on the formation of mouse melanoma. Methods Murine bone marrow cells were extracted, differentiated and cultured to the 6th day. The cells were divided into 4 groups, lipopolysaccharide (LPS) group. In the Melan-A antigenic peptide group, the DC adjuvant LPS (final concentration 100 ng/m / L) was added to the polymyocytosis group. The final concentration was 20 ng/m / L, and the final concentration was 5 渭 mol / L (final concentration 5 渭 mol 路L ~ (-1)). No intervention was made in the untreated group. Flow cytometry was used to detect the mature state of DC. B16 cells were co-cultured with DC on the 6th day of culture for 2 days. Eight B16 cells were injected subcutaneously into C57BL / 6J mice. DC B16 cells, B16 cells were inoculated with DC B16 cells for 1 week, 5 DC B16 cells were inoculated, and 3 control cells were inoculated. Some of the mice were killed on the 14th day of inoculation, the spleen was taken and the histological morphology was observed under microscope. Results the number of mature DC in LPS group was more than that in untreated group. No tumor growth was found in mice inoculated with DC B16 cells, and 28 days after inoculation, compared with mice inoculated with B16 cells. The tumor volume of DC B16 cells inoculated with LPSN polyICN Melan-A antigen peptide and mice inoculated with DC B16 cells for 1 week decreased by 0.05. Compared with the control group, the splenic follicular structure of mice inoculated with DC B16 cells did not change significantly on the 14th day. The splenic follicular structure was increased in mice inoculated with B16 cells and activated by LPSN polyICN Melan-A antigenic peptide. Conclusion Co-culture of DC and B16 can inhibit the formation of melanoma in mice.
【作者單位】: 天津醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院;天津醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院;
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(21373151)
【分類號(hào)】:R739.5

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本文編號(hào):1608666

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