熱處理、UVB輻射后HSP72和P53的變化對黑素細(xì)胞功能影響的實(shí)驗(yàn)研究
發(fā)布時間:2018-03-11 08:35
本文選題:熱處理 切入點(diǎn):UVB 出處:《安徽醫(yī)科大學(xué)》2012年碩士論文 論文類型:學(xué)位論文
【摘要】:目的通過檢測人表皮黑素細(xì)胞在熱處理、UVB輻射及二者聯(lián)合作用后HSP72、P53蛋白與基因表達(dá)的變化,初步分析熱處理及二者聯(lián)合作用后黑素細(xì)胞功能變化的可能機(jī)制,為熱治療白癜風(fēng)及熱聯(lián)合UVB治療白癜風(fēng)提供理論依據(jù)。 方法(1)黑素細(xì)胞原代及傳代培養(yǎng):取新鮮的包皮環(huán)切標(biāo)本,逐步進(jìn)行組織及細(xì)胞分離,經(jīng)過黑素細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)2代后獲得純化的黑素細(xì)胞。(2)選取3-5代細(xì)胞生長至60%-70%融合時,對細(xì)胞進(jìn)行熱處理(42℃每天干預(yù)1h,連續(xù)干預(yù)3d),分別在末次處理后4h,6h,24h采用Western印跡技術(shù)觀察HSP72蛋白的表達(dá)及變化趨勢;末次處理后6h,12h,24h觀察P53蛋白的表達(dá)及變化趨勢。選取后續(xù)實(shí)驗(yàn)收集細(xì)胞的最佳時間點(diǎn)。(3)將細(xì)胞隨機(jī)分為對照組,,熱處理組(42℃每天干預(yù)1h,連續(xù)干預(yù)3d),UVB輻射組(50mj/3
本文編號:1597390
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