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Sirt1和連接蛋白在銀屑病皮損中表達及Sirt1對連接蛋白影響的研究

發(fā)布時間:2016-10-26 13:45

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《南京醫(yī)科大學》 2012年

Sirt1和連接蛋白在銀屑病皮損中表達及Sirt1對連接蛋白影響的研究

吳軍陽  

【摘要】:背景和目的銀屑病(psoriasis)是一種常見的慢性炎癥性皮膚病,其發(fā)病率較高,病程較長,易于復發(fā),并主要侵犯青壯年,對患者的身心健康和生活質(zhì)量影響甚大,是當前皮膚病領域重點研究的疾病之一。 一般認為,銀屑病是遺傳因素與環(huán)境因素相互作用的多基因遺傳病,遺傳、免疫、感染、環(huán)境、精神、代謝、內(nèi)分泌等因素在其中發(fā)揮重要的作用,然而銀屑病的病因和發(fā)病機制至今尚未完全清楚。近年來有研究發(fā)現(xiàn)銀屑病患者存在不同程度皮膚屏障功能的損傷,其連接蛋白的表達分布明顯改變。緊密連接蛋白和粘著連接蛋白構成的緊密連接和粘著連接是形成表皮角質(zhì)形成細胞間連接的重要組成部分,參與維持皮膚機械屏障、滲透屏障、細胞間粘著、極性等重要功能。緊密連接蛋白和粘著連接蛋白的調(diào)節(jié)主要受控于基因和外部環(huán)境因素。其中,環(huán)境因素誘導的組蛋白乙;叭ヒ阴;磻且环N重要的表觀遺傳調(diào)控方式,可通過調(diào)節(jié)特定基因的表達水平影響皮膚的連接蛋白。沉默信息調(diào)節(jié)蛋白1(Silent information regulator proteinl, Sirtl)是機體內(nèi)一種非常重要的組蛋白去乙;,參與組蛋白的去乙;{(diào)控。 本課題通過研究Sirtl、緊密連接蛋白和粘著連接蛋白在銀屑病皮損組織中的表達情況,以及在體外培養(yǎng)的HaCaT角質(zhì)形成細胞中,Sirt1的異常表達與活化對角質(zhì)形成細胞緊密連接蛋白和粘著連接蛋白表達水平的影響,探討其之間可能的作用及其臨床意義。 方法(1)臨床組織實驗:利用免疫組化、免疫熒光技術檢測銀屑病皮損組織中Sirt1、緊密連接蛋白(occludin、ZO-1)、粘著連接蛋白(E-cadherin)的表達與定位,并以正常人皮膚組織作對照;(2)體外細胞學實驗:以皮膚角質(zhì)形成細胞系HaCaT細胞為研究對象,利用Sirt1的特異性激活劑(白藜蘆醇)及抑制劑(煙酰胺)誘導Sirt1的異常表達,經(jīng)RT-PCR技術檢測Sirt1激活劑白藜蘆醇、抑制劑煙酰胺對Sirt1基因表達水平的影響;利用Western blotting技術檢測相同條件下Sirt1緊密連接蛋白、粘著連接蛋白的蛋白表達水平。 結果(1)臨床組織實驗:與正常人皮膚組織相比,Sirt1在銀屑病皮損組織中表達量下降,連接蛋白occludin、ZO-1、E-cadherin表達水平均顯著升高。(2)體外細胞學實驗:與空白對照組相比,白藜蘆醇可顯著增加HaCaT細胞Sirt1的轉(zhuǎn)錄和翻譯水平,Sirt1的表達與活化可明顯降低HaCaT細胞緊密連接蛋白和粘著連接蛋白的表達水平。 結論Sirt1可能具有下調(diào)銀屑病表皮角質(zhì)形成細胞間連接蛋白表達的功能。

【關鍵詞】:
【學位授予單位】:南京醫(yī)科大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2012
【分類號】:R758.63
【目錄】:

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本文編號:154121

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