本文關(guān)鍵詞：常見致病真菌的分子鑒定及FUNGUS3測定馬爾尼菲青霉體外藥敏實(shí)驗(yàn)的比較研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

《廣西醫(yī)科大學(xué)》 2013年

常見致病真菌的分子鑒定及FUNGUS3測定馬爾尼菲青霉體外藥敏實(shí)驗(yàn)的比較研究

湯露露  

【摘要】：目的：尋找適用的常見致病真菌的通用引物,并建立穩(wěn)定的真菌PCR分子鑒定平臺(tái)。 方法：1、尋找常見致病真菌穩(wěn)定的通用引物：選擇基于真菌rDNA ITS區(qū)的常用4對通用引物,搜集臨床致病菌株,提取病真菌的DNA進(jìn)行PCR,并將擴(kuò)增后產(chǎn)物行凝膠電泳檢驗(yàn)產(chǎn)物性質(zhì),出現(xiàn)單一條帶則認(rèn)為擴(kuò)增成功,比較各引物的適用性。2、將擴(kuò)增產(chǎn)物送基因測序并與基因庫對照,進(jìn)行菌種鑒定,并與傳統(tǒng)真菌鑒定結(jié)果進(jìn)行比較。 結(jié)果：1、每次試驗(yàn)陰性對照均未出現(xiàn)擴(kuò)增陽性條帶；2、四對引物中ITS4, ITS86穩(wěn)定性較好；3、真菌rDNA ITS區(qū)通用引物PCR擴(kuò)增加基因測序可將大部分常見致病真菌鑒定到種,但不是全部的；4、分子診斷技術(shù)辨別出數(shù)例臨床誤診菌株。 結(jié)論：真菌ITS區(qū)通用引物PCR擴(kuò)增加基因測序技術(shù)快捷、敏感、特異性高,能將臨床大部分常見真菌鑒定到種。為真菌感染早期診斷,抗真菌藥物的選擇及改善預(yù)后奠定了基礎(chǔ),適合推廣于臨床應(yīng)用。 目的：評價(jià)CLSI M27-A3微量液基稀釋法與ATB FUNGUS3半固體培養(yǎng)基法測定馬爾尼菲青霉酵母相體外藥物敏感試驗(yàn)結(jié)果中的異同。 方法：利用CLSI M27-A3微量液基稀釋法和ATB FUNGUS3法測定和比較分析21株馬爾尼菲青霉酵母相對兩性霉素B (AMB),氟胞嘧啶(5-Fc)、氟康唑(FLC)、伊曲康唑(ITC)及伏立康唑(VRC)的敏感性。兩種方法測得結(jié)果均在同一判讀折點(diǎn)區(qū)間視為一致。 結(jié)果：①每次試驗(yàn)質(zhì)控菌株MIC值均在規(guī)定范圍類；②兩種方法實(shí)驗(yàn)室內(nèi)均有良好的重復(fù)性；③對于21株馬爾尼菲青霉酵母相,當(dāng)ATB FUNGUS3接種量為0.5～2.5x104CFU/mL時(shí),2種方法測定AMB、5-Fc、FLC、 ITC及VRC的一致性較高分別為85.7%、95.2%、95.2%、100%、100%,其中最高為ITC、VRC,最低為AMB；所有受試的菌株種兩種方法所得一致性為95.2%。但出現(xiàn)2處小錯(cuò)誤、3處巨大錯(cuò)誤。④對于16株馬爾尼菲青霉酵母相,當(dāng)ATB FUNGUS3接種量為3x105CFU/mL時(shí),2種方法測定AMB、5-Fc、FLC、ITC及VRC的一致性均較前提高,分別為87.5%、100%、93.75%、100%、100%,所有受試菌株中的一致性為96.25%,出現(xiàn)1處小錯(cuò)誤,2處巨大錯(cuò)誤。⑤ATB FUNGUS3中除FLC外余藥物的MIC值判讀范圍均偏高,實(shí)際操作中不能讀出精確的MIC值。 結(jié)論：ATB FUNGUS3法簡便、快速、準(zhǔn)確、重復(fù)性好在測定馬爾尼菲青霉對常用抗真菌藥物敏感性上可作為一種的替代方案。

【關(guān)鍵詞】：
【學(xué)位授予單位】：廣西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R440;R756
【目錄】：

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