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腎上腺素能β2受體參與慢性應(yīng)激誘導(dǎo)大鼠瘙癢機制研究

發(fā)布時間:2017-12-17 18:05

  本文關(guān)鍵詞:腎上腺素能β2受體參與慢性應(yīng)激誘導(dǎo)大鼠瘙癢機制研究


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【摘要】:目的:1、明確慢性應(yīng)激實驗?zāi)芊裨黾哟笫箴W的行為學(xué)表現(xiàn)。2、探討慢性應(yīng)激誘導(dǎo)大鼠瘙癢的分子機制。方法:1)慢性應(yīng)激大鼠模型(HIS)的建立:三種不同應(yīng)激源:45分鐘4°C冷束縛,20分鐘強迫游泳,1小時孤島實驗。重復(fù)三次進行連續(xù)九天應(yīng)激實驗?zāi)M出慢性應(yīng)激大鼠模型。在應(yīng)激結(jié)束后第一天,第四天,第七天分別在大鼠一側(cè)臉頰注射致癢劑5-HT(200μg)。2)大鼠臉頰瘙癢模型的建立:在大鼠臉頰皮內(nèi)注射5-HT引發(fā)大鼠后肢搔抓的動作,記錄注射后一小時內(nèi)搔抓的次數(shù)可以反應(yīng)瘙癢程度。3)毀損外周交感神經(jīng)系統(tǒng):采取胍乙啶(50mg/kg,ip)持續(xù)皮下注射12天毀損大鼠交感神經(jīng)法,將大鼠分為胍乙啶+應(yīng)激組,胍乙啶+未應(yīng)激組,NS+應(yīng)激組,觀察不同組別在處理結(jié)束后大鼠對致癢原5-HT的瘙癢反應(yīng)程度。4)通過藥物干預(yù),確定α,β受體中哪個受體參與到應(yīng)激引起的大鼠瘙癢的病理過程中:α受體阻滯劑酚妥拉明,β受體阻滯劑普萘洛爾(10mg/kg)分別在應(yīng)激大鼠與非應(yīng)激大鼠中連續(xù)腹腔注射9天,第十天臉頰皮下注射5-HT,記錄注射后1小時內(nèi)不同組別的搔抓次數(shù),明確哪個受體能夠降低應(yīng)激后瘙癢現(xiàn)象。5)確定相應(yīng)的受體后,采取同樣的方法確定是哪個受體的亞型參與這一過程,進一步采取同樣方法利用受體激動劑是否能夠模擬出應(yīng)激引起的瘙癢現(xiàn)象。6)運用Western Blotting方法檢測對照組和HIS模型大鼠皮膚組織中腎上腺素能β2受體以及TNF-α炎性因子表達(dá)情況。7)通過QPCR檢查不同組別的皮膚炎癥因子的表達(dá)程度:取應(yīng)激組,非應(yīng)激組,應(yīng)激+藥物干預(yù)組的大鼠非注射側(cè)的臉頰皮膚,進行QPCR檢測TNF-α,IL-1β,IL-6,NGF炎性因子的表達(dá)。結(jié)果:1)應(yīng)激大鼠能夠增加5-HT的致癢效果,且在應(yīng)激結(jié)束后至少持續(xù)4天,在第7天,應(yīng)激產(chǎn)生的瘙癢作用消失。2)胍乙啶系統(tǒng)性損毀外周兒茶酚胺的釋放后,應(yīng)激增加大鼠瘙癢的作用消失。3)普萘洛爾、布托沙明能夠顯著減輕應(yīng)激增加的瘙癢程度,使用β2受體激動劑特布他林能夠模擬出應(yīng)激對瘙癢的增加程度。4)臉頰注射不同劑量的腎上腺素(E)與去甲腎上腺素(NE)(0.1μg,1μg,10μg),能夠增加大鼠對5-HT的瘙癢程度,并且存在劑量關(guān)系。5)Western Blotting檢測發(fā)現(xiàn),在應(yīng)激后大鼠皮膚組織中腎上腺素能β2受體以及TNF-α炎性因子表達(dá)量均明顯增加。6)應(yīng)激組中炎癥因子(TNF-α,IL-1β,IL-6,NGF)的表達(dá)均升高。并且在使用β受體阻滯劑與β2受體阻滯劑的應(yīng)激大鼠中,炎癥因子有不同程度的降低,在NE與E組別的大鼠皮膚上,炎癥因子有不同程度的增加,在β2受體激動劑的大鼠皮膚上能夠顯著增加TNF-α,IL-1β的表達(dá)量。結(jié)論:1)應(yīng)激能夠顯著增加大鼠的瘙癢癥狀。2)交感系統(tǒng)參與到應(yīng)激增加的瘙癢現(xiàn)象中,抑制交感腎上腺素系統(tǒng)釋放E與NE能夠顯著減輕應(yīng)激引起的瘙癢反應(yīng)。3)β受體尤其是β2受體在應(yīng)激增加的瘙癢中發(fā)揮重要作用。
【學(xué)位授予單位】:蘇州大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號】:R758.31

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2 祝~=驤;iJ梊霞;洃克琴;崔素英;文允摪;,

本文編號:1301038


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