本文關(guān)鍵詞：大皰性類(lèi)天皰瘡患者外周血中Th17、嗜酸性粒細(xì)胞及相關(guān)因子表達(dá)水平的研究

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【摘要】：背景和目的：大皰性類(lèi)天皰瘡(Bullous Pemphigoid, BP)是臨床上較常見(jiàn)一種自身免疫性表皮下大皰病,該病好發(fā)于中老年人,患者大面積水皰、明顯瘙癢、糜爛滲出、繼發(fā)感染,嚴(yán)重影響生活質(zhì)量。近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn)Th17細(xì)胞在許多自身免疫性疾病中發(fā)揮著重要的作用。而B(niǎo)P亦為一種自身免疫性疾病,它與Th17細(xì)胞及其細(xì)胞因子IL-17之間的關(guān)系,目前國(guó)內(nèi)外研究較少。另外,在BP患者組織病理可見(jiàn)水皰及真皮乳頭有多數(shù)嗜酸性粒細(xì)胞(EOS)浸潤(rùn)、有的還可見(jiàn)到中性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞。有研究報(bào)道EOS及Eotaxin-2與BP的發(fā)展變化均有著密切聯(lián)系,但哪一指標(biāo)在疾病早期活動(dòng)有更顯著的血清學(xué)變化,目前還沒(méi)有明確結(jié)論。本研究分別通過(guò)檢測(cè)Th17細(xì)胞、IL-17及EOS、Eotaxin-2在BP治療前后的變化,來(lái)探討它們?cè)贐P發(fā)病機(jī)制中的作用及與疾病活動(dòng)性之間的關(guān)系。(一)大皰性類(lèi)天皰瘡患者外周血中Th17及IL-17表達(dá)水平的研究方法：：分別收集27例BP患者在治療前、后及27例健康對(duì)照組的外周靜脈血。采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)技術(shù),檢測(cè)BP患者血清中IL-17的濃度；同時(shí)采用實(shí)時(shí)熒光定量反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)技術(shù)檢測(cè)外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMC)中細(xì)胞因子IL-17 mRNA的表達(dá)水平；并用流式細(xì)胞術(shù)(FCM)檢測(cè)外周血中Th17細(xì)胞占CD4+T細(xì)胞的百分比。結(jié)果：1、BP患者外周血中IL-17及IL-17mRNA的表達(dá)水平： (1)血清中IL-17的表達(dá)：實(shí)驗(yàn)組治療前血清中幾-17的水平為32.34±9.55 ng/L,治療后血清中IL-17水平為17.47±3.01 ng/L,而對(duì)照組血清中IL-17表達(dá)水平為14.74±2.77 ng/L。實(shí)驗(yàn)組治療前IL-17水平顯著高于治療后及對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,(P分別0.01、0.05)；治療后較對(duì)照組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。(2) PBMC中IL-17 mRNA的表達(dá)：實(shí)驗(yàn)組治療前外周血單個(gè)核細(xì)胞IL-17 mRNA的相對(duì)表達(dá)水平是治療后的2.475倍(P0.05),是對(duì)照組的2.980倍(Il0.05),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；而治療后的表達(dá)水平與對(duì)照組相近(1.204倍),差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。2、BP患者外周血中Th17細(xì)胞占CD4+T細(xì)胞的百分比：實(shí)驗(yàn)組治療前外周血中Thl7占CD4+T細(xì)胞的百分比為3.280%±0.197%,明顯高于對(duì)照組(0.675%±0.019%),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)；治療后Th17的百分比為0.807%±0.118%,與對(duì)照組相比,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論：Th17細(xì)胞及其細(xì)胞因子IL-17可能參與BP的發(fā)病機(jī)制,并發(fā)揮著重要作用。(二)大皰性類(lèi)天皰瘡患者外周血中Eotaxin-2的研究方法：分別收集32例BP患者(28例初發(fā)病例和4例復(fù)發(fā)病例)在治療前、后及32例健康對(duì)照組的外周靜脈血。采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)技術(shù),檢測(cè)BP患者血清中Eotaixn-2的濃度；同時(shí)采用實(shí)時(shí)熒光定量反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)技術(shù)檢測(cè)外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMC)中細(xì)胞因子Eotaixn-2 mRNA的表達(dá)水平。分別記錄32例BP患者在治療前、后血常規(guī)檢查中嗜酸性粒細(xì)胞絕對(duì)值的變化,分析BP患者治療前、后外周血中EOS與Eotaxion-2的變化,比較兩者對(duì)BP活動(dòng)的敏感性。結(jié)果：1、BP患者外周血中Eotaxin-2及Eotaxin-2 mRNA的表達(dá)水平： (1)血清中Eotaxin-2的表達(dá)：實(shí)驗(yàn)組治療前血清中Eotaxin-2的水平為225.77±36.12 ng/L,治療后為104.76±18.68 ng/L,而對(duì)照組為94.55±20.27ng/L。實(shí)驗(yàn)組治療前Eotaxin-2的水平顯著高于治療后及對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)；治療后較對(duì)照組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。(2) PBMC中Eotaxin-2 mRNA的表達(dá)：實(shí)驗(yàn)組治療前外周血單個(gè)核細(xì)胞Eotaxin-2 mRNA的相對(duì)表達(dá)水平是治療后的4.324倍,是對(duì)照組的4.436倍,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)；而治療后的表達(dá)水平與對(duì)照組相近(1.026倍),差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。2、BP患者在治療前后外周血中EOS與Eotaxin-2的變化的關(guān)系：32例BP患者中,只有6例初發(fā)患者EOS計(jì)數(shù)升高,4例復(fù)發(fā)患者EOS計(jì)數(shù)無(wú)升高,而25例初發(fā)患者及4例復(fù)發(fā)患者治療前血清中Eotaxin-2的表達(dá)水平都有顯著升高。且初發(fā)和復(fù)發(fā)病例治療前血清中Eotaixn-2的表達(dá)水平比較(223.58±29.14 ng/L vs.226.43±35.47ng/L),差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),所有BP患者治療后外周血中EOS及Eotaxin-2的表達(dá)水平均降至正常水平。結(jié)論：在BP的發(fā)病中,Eotacxin-2可能是較EOS為更敏感的指標(biāo)。
【學(xué)位授予單位】：濱州醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：R758.66

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本文編號(hào)：1290945