發(fā)布時間：2017-12-15 06:20

  本文關(guān)鍵詞：大皰性類天皰瘡患者外周血中Th17、嗜酸性粒細胞及相關(guān)因子表達水平的研究

  更多相關(guān)文章： 大皰性類天皰瘡 Bullous Pemphigoid BP Th17 IL-17 嗜酸性粒細胞 EOS Eotaxin-2

【摘要】：背景和目的：大皰性類天皰瘡(Bullous Pemphigoid, BP)是臨床上較常見一種自身免疫性表皮下大皰病,該病好發(fā)于中老年人,患者大面積水皰、明顯瘙癢、糜爛滲出、繼發(fā)感染,嚴重影響生活質(zhì)量。近年來研究發(fā)現(xiàn)Th17細胞在許多自身免疫性疾病中發(fā)揮著重要的作用。而BP亦為一種自身免疫性疾病,它與Th17細胞及其細胞因子IL-17之間的關(guān)系,目前國內(nèi)外研究較少。另外,在BP患者組織病理可見水皰及真皮乳頭有多數(shù)嗜酸性粒細胞(EOS)浸潤、有的還可見到中性粒細胞、淋巴細胞。有研究報道EOS及Eotaxin-2與BP的發(fā)展變化均有著密切聯(lián)系,但哪一指標在疾病早期活動有更顯著的血清學變化,目前還沒有明確結(jié)論。本研究分別通過檢測Th17細胞、IL-17及EOS、Eotaxin-2在BP治療前后的變化,來探討它們在BP發(fā)病機制中的作用及與疾病活動性之間的關(guān)系。(一)大皰性類天皰瘡患者外周血中Th17及IL-17表達水平的研究方法：：分別收集27例BP患者在治療前、后及27例健康對照組的外周靜脈血。采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)技術(shù),檢測BP患者血清中IL-17的濃度；同時采用實時熒光定量反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)技術(shù)檢測外周血單個核細胞(PBMC)中細胞因子IL-17 mRNA的表達水平；并用流式細胞術(shù)(FCM)檢測外周血中Th17細胞占CD4+T細胞的百分比。結(jié)果：1、BP患者外周血中IL-17及IL-17mRNA的表達水平： (1)血清中IL-17的表達：實驗組治療前血清中幾-17的水平為32.34±9.55 ng/L,治療后血清中IL-17水平為17.47±3.01 ng/L,而對照組血清中IL-17表達水平為14.74±2.77 ng/L。實驗組治療前IL-17水平顯著高于治療后及對照組,差異有統(tǒng)計學意義,(P分別0.01、0.05)；治療后較對照組差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)。(2) PBMC中IL-17 mRNA的表達：實驗組治療前外周血單個核細胞IL-17 mRNA的相對表達水平是治療后的2.475倍(P0.05),是對照組的2.980倍(Il0.05),差異有統(tǒng)計學意義；而治療后的表達水平與對照組相近(1.204倍),差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)。2、BP患者外周血中Th17細胞占CD4+T細胞的百分比：實驗組治療前外周血中Thl7占CD4+T細胞的百分比為3.280%±0.197%,明顯高于對照組(0.675%±0.019%),差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)；治療后Th17的百分比為0.807%±0.118%,與對照組相比,差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)。結(jié)論：Th17細胞及其細胞因子IL-17可能參與BP的發(fā)病機制,并發(fā)揮著重要作用。(二)大皰性類天皰瘡患者外周血中Eotaxin-2的研究方法：分別收集32例BP患者(28例初發(fā)病例和4例復(fù)發(fā)病例)在治療前、后及32例健康對照組的外周靜脈血。采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)技術(shù),檢測BP患者血清中Eotaixn-2的濃度；同時采用實時熒光定量反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)技術(shù)檢測外周血單個核細胞(PBMC)中細胞因子Eotaixn-2 mRNA的表達水平。分別記錄32例BP患者在治療前、后血常規(guī)檢查中嗜酸性粒細胞絕對值的變化,分析BP患者治療前、后外周血中EOS與Eotaxion-2的變化,比較兩者對BP活動的敏感性。結(jié)果：1、BP患者外周血中Eotaxin-2及Eotaxin-2 mRNA的表達水平： (1)血清中Eotaxin-2的表達：實驗組治療前血清中Eotaxin-2的水平為225.77±36.12 ng/L,治療后為104.76±18.68 ng/L,而對照組為94.55±20.27ng/L。實驗組治療前Eotaxin-2的水平顯著高于治療后及對照組,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)；治療后較對照組差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)。(2) PBMC中Eotaxin-2 mRNA的表達：實驗組治療前外周血單個核細胞Eotaxin-2 mRNA的相對表達水平是治療后的4.324倍,是對照組的4.436倍,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)；而治療后的表達水平與對照組相近(1.026倍),差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)。2、BP患者在治療前后外周血中EOS與Eotaxin-2的變化的關(guān)系：32例BP患者中,只有6例初發(fā)患者EOS計數(shù)升高,4例復(fù)發(fā)患者EOS計數(shù)無升高,而25例初發(fā)患者及4例復(fù)發(fā)患者治療前血清中Eotaxin-2的表達水平都有顯著升高。且初發(fā)和復(fù)發(fā)病例治療前血清中Eotaixn-2的表達水平比較(223.58±29.14 ng/L vs.226.43±35.47ng/L),差異無統(tǒng)計學意義(P0.05),所有BP患者治療后外周血中EOS及Eotaxin-2的表達水平均降至正常水平。結(jié)論：在BP的發(fā)病中,Eotacxin-2可能是較EOS為更敏感的指標。
【學位授予單位】：濱州醫(yī)學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R758.66

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本文編號：1290945